在所有RNA實(shí)驗(yàn)中，RNA的純度和完整性能夠直接影響RNA分析的結(jié)果。RNA酶污染是導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗的主要原因，RNA制劑中微量的RNase污染足以導(dǎo)致樣本中RNA的完全降解。外源性的RNase存在于試劑、耗材、器械、操作人員的皮膚或唾液中，也可存在于空氣、灰塵中。而各種組織和細(xì)胞中則含有大量?jī)?nèi)源性的RNase。因此，在實(shí)驗(yàn)中，想要避免RNA被降解，一方面要嚴(yán)格控制外源性RNase的污染，使用無RNase的耗材，盡量避免源自人和環(huán)境的RNase污染。另一方面，要最大限度地抑制內(nèi)源性的RNA酶，使用RNA抑制劑來抑制RNase的活性。

圖1. 常用的RNase抑制劑
 

 常見的RNase抑制劑有焦碳酸二乙酯（DEPC）、異硫氰酸胍、氧釩核糖核苷復(fù)合物（RVC）和RNA酶的蛋白質(zhì)抑制劑（RNasin）。其中，DEPC和異硫氰酸胍具有一定的毒性，RVC對(duì)PCR聚合酶有抑制作用，不利于展開后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。RNA酶的蛋白質(zhì)抑制劑是一種從大鼠肝或人胚盤中提取得來的酸性糖蛋白，能夠特異地與RNase以非共價(jià)鍵結(jié)合，形成復(fù)合體使RNase失活，不具有毒性，不影響后續(xù)的PCR實(shí)驗(yàn)，常被用來減少RNase的污染。

 

 

產(chǎn)品特點(diǎn)

 

翌圣生物MRI與人源RNase inhibitor相比，具有更高的抗氧化活性，適合于對(duì)高DTT敏感性實(shí)驗(yàn)，除此之外，翌圣MRI還具有以下特點(diǎn)：

 

 

      

廣譜的RNase抑制活性：可抑制包括RNase A、RNase B、RNase C等在內(nèi)的RNase。

      

兼容廣泛的反應(yīng)條件：在pH 5.0至9.0條件下和25℃至60℃的溫度下都具有活性。

      

兼容廣泛的下游實(shí)驗(yàn)：對(duì)SP6、T7/T3 RNA聚合酶、AMV、M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq DNA聚合酶酶活性無影響。

      

規(guī)模化量產(chǎn)：?jiǎn)未紊a(chǎn)20億U，確保了產(chǎn)品的均一性、穩(wěn)定性和供貨的及時(shí)性，有利于成本控制。

      

批間穩(wěn)定性：成熟的蛋白表達(dá)和純化平臺(tái)，符合ISO13485質(zhì)量管理體系，根據(jù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行質(zhì)控檢測(cè)，保證批次間產(chǎn)品的穩(wěn)定性。

 

 

 

 

 

 

產(chǎn)品性能

 

 

RNase Inhibitor可有效抑制RNase活性

1μg HEK細(xì)胞總RNA，1μL RNase inhibitor可有效抑制5ng RNase。

圖2. RNase抑制劑抑制效果圖

 

 

RNase Inhibitor在qPCR實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)優(yōu)于國(guó)際同類產(chǎn)品

在相同實(shí)驗(yàn)條件下，以qPCR方法分別對(duì)翌圣和R*公司的鼠源RNase抑制劑（MRI）的抑制效果進(jìn)行檢測(cè)，翌圣鼠源RNase抑制劑能有效抑制體系中的RNaseA，抑制效果優(yōu)于競(jìng)品。


圖3. R* MRI抑制RNase能力測(cè)試

注：圖中曲線從左到右依次為：PC（僅RNA，無RNase和MRI）、40 U MRI、30 U MRI、20 U MRI、10 U MRI、NC（RNA+RNase、無MRI）。

圖4. Yeasen MRI抑制RNase能力測(cè)試

 

注：圖中曲線從左到右依次為：PC（僅RNA，無RNase和MRI）、80 U MRI、60 U MRI、40 U MRI、30 U MRI、20 U MRI、10 U MRI、NC（RNA+RNase、無MRI）。

圖5. 圖3與圖4 Ct值結(jié)果柱狀圖

 

 

產(chǎn)品信息