為提高含高GC含量或連續(xù)多個A/T的復雜基因的PCR擴增效率及擴增特異性，科研人員通常會嘗試在PCR反應體系中添加增效劑。翌圣生物現為廣大科研人員提供質量高、適用性廣的兩種PCR增效劑：甜菜堿與海藻糖。

其中，海藻糖（Trehalose）是一種雙糖，能夠在高溫、高寒、干燥失水等惡劣的條件下在細胞表面形成特殊的保護膜，有效的保護生物分子結構不被破壞，從而維持生命體的生命過程和生物特征。翌圣生物提供的海藻糖，為海藻糖水合物，分子式為C12H22O11•2H2O，純度≥99%，金屬離子含量低，可用于分子生物學實驗。
 

產品介紹
 

翌圣生物是在工具酶及其反應輔助試劑方面極具經驗，確保原裝進口高品質海藻糖，并大量現貨，可保證批次間產品的穩(wěn)定性。該產品可作為酶保護劑，用于DNA聚合酶、逆轉錄酶等工具酶的穩(wěn)定劑，因此作為PCR、RT-PCR、qPCR等實驗反應優(yōu)化的添加劑成分，大大改善擴增效率和擴增特異性、改善逆轉錄效率等。
 

海藻糖特點

1. 海藻糖具有熱穩(wěn)定性和熱激活特性。海藻糖在蛋白熱變性過程中可維持蛋白的骨架，保持其天然結構。在分子生物學多種酶促反應中得到驗證，如逆轉錄酶參與的cDNA合成，Dnase I參與的DNA降解，限制性內切酶的酶切反應等[1]。

2. 海藻糖可作為PCR增強劑。通過降低DNA雙鏈融解溫度，維持Taq DNA聚合酶穩(wěn)定性，提高PCR反應效率[2]。

3. 海藻糖可中和抑制劑對DNA聚合酶的抑制作用，維持PCR擴增效率。海藻糖作為SYBR Green I法實時熒光定量PCR添加劑，有效降低SYBR Green I對PCR的抑制[3]。
 

4. 海藻糖可作為珍稀樣本基因組或極低濃度基因組的保存劑[4]。

 

 

圖1. 海藻糖可保護Taq DNA聚合酶酶活性，提升PCR擴增性能

數據來源DOI: 10.1373/clinchem.2004.031336 Published June 2004

 

主要應用

 

1. 作為酶穩(wěn)定劑，維持酶的活性及熱活化后的酶活性。

2. 可應用于DNA的測序反應實驗中，提升含有重復序列(連續(xù)多個A或T)的測序精準性。

3. 復雜模板的PCR擴增，如高GC含量的樣本。

4. 適用于較長cDNA的逆轉錄反應，尤其是全長cDNA的合成，提升文庫建立的覆蓋度。

5. 微量DNA樣品的保存劑。

6. qRT-PCR反應體系添加劑，提升反應性能。
 

溶液配制

溶于水。50mg/ml。
 

海藻糖參數

中文別名（Chinese Synonym）	α,α-海藻糖，α-D-吡喃葡萄糖基-α-D-吡喃葡萄糖苷
英文別名（English Synonym）	alpha-D-Glucopyranosyl-alpha-D-glucopyranoside; Mycose
CAS 號（CAS NO.）	6138-23-4
分子式（Molecular Formula）	· C12H22O11 2H2O
分子量（Molecular Weight）	· 378.33g/mol
外觀（Appearance）	白色或灰白色粉末
溶解性（Solubility）	溶于水
純度（Purity）	≥99%
結構式（Structure）

 

參考文獻

[1]. Butler SL,Falke JJ. Effects of protein stabilizing agents on thermal backbone motions: a disulfide trapping study. Biochemistry.1996 Aug 20;35(33):10595-600.

[2]. Spiess AN,Mueller N,Ivell R. Trehalose is a potent PCR enhancer: lowering of DNA melting temperature and thermal stabilization of taq polymerase by the disaccharide trehalose. Clin Chem.2004 Jul;50(7):1256-9.

[3]. Horáková H.1,2-propanediol-trehalose mixture as a potent quantitative real-time PCR enhancer.BMC Biotechnol.2011 Apr 18;11:41. doi: 10.1186/1472-6750-11-41.

[4]. Smith S,Morin PA.Optimal storage conditions for highly dilute DNA samples: a role for trehalose as a preserving agent.J Forensic Sci.2005 Sep;50(5):1101-8.

 

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產品貨號	產品名稱	規(guī)格	價格（元）
60352ES25	D-(+)-Trehalose 海藻糖	25g	356.00
60352ES60	α,α-海藻糖	100g	756.00
60352ES80	α-D-吡喃葡萄糖基-α-D-吡喃葡萄糖苷	1kg	3756.00