細(xì)胞結(jié)團(tuán)的原因及解決辦法-低分子量葡聚糖硫酸鈉(DSS)
細(xì)胞培養(yǎng)過程中，有時會出現(xiàn)細(xì)胞結(jié)團(tuán)，此時的細(xì)胞大多是輪廓模糊、透光性差，甚至?xí)霈F(xiàn)合胞體，伴有細(xì)胞碎片，這證明細(xì)胞已經(jīng)衰老或產(chǎn)生病變，狀態(tài)不佳。
是什么導(dǎo)致了細(xì)胞結(jié)團(tuán)？
1. 過度消化，某些用于組織分解的酶，如胰蛋白酶，如果過量使用會導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)塊；
2. 環(huán)境壓力，物理壓力和反復(fù)的溫度變化會導(dǎo)致細(xì)胞死亡，從而導(dǎo)致細(xì)胞的“粘性”的DNA分子將相鄰的細(xì)胞連接在一起；
3. 組織分解，在制備單細(xì)胞懸浮液時，使用酶、機(jī)械或化學(xué)分解策略可使細(xì)胞破裂，從而導(dǎo)致碎片的聚團(tuán)；
4. 過度生長，當(dāng)細(xì)胞在其培養(yǎng)基中密度過大的時候，細(xì)胞將開始溶解并釋放碎片，碎片中的粘性因子會將細(xì)胞聚集到一起；
5. 污染，某些細(xì)菌和真菌病原體導(dǎo)致細(xì)胞溶解，結(jié)塊通常是細(xì)胞培養(yǎng)物被污染的跡象。
怎樣減少細(xì)胞結(jié)團(tuán)？
1. 低密度傳代。將已聚集的細(xì)胞進(jìn)行消化傳代，連續(xù)傳三次，細(xì)胞抱團(tuán)就會越來越小，這樣幾代過后，再按照常規(guī)消化方法和時間能將細(xì)胞逐漸傳成單個細(xì)胞；
2. 選擇適當(dāng)?shù)碾x心轉(zhuǎn)速和時間離心聚團(tuán)細(xì)胞。通常情況下，較快的速度可以離心散細(xì)胞，但在高速下也必須考慮細(xì)胞的脆弱性，所以適當(dāng)?shù)难娱L離心的時間也不失為一種較好的將懸浮聚團(tuán)細(xì)胞離心散開的方法，但轉(zhuǎn)速及時間要通過實(shí)驗(yàn)來把握。
3. 添加DNA酶I的內(nèi)切酶。可以混合到培養(yǎng)基中，從破裂的細(xì)胞中分離DNA，分解這些多余的碎片有助于保持靶細(xì)胞生長的空間。但是，dna酶I使用過多會導(dǎo)致細(xì)胞突變，最終會影響實(shí)驗(yàn)效果，所以不到萬一，不建議使用。
4. 添加低分子量葡聚糖硫酸鈉鹽?？梢曰旌系脚囵B(yǎng)基中，通過改變細(xì)胞表面電荷，促使單個細(xì)胞懸浮，防止結(jié)團(tuán)，安全有效。例如CHO細(xì)胞，推薦濃度10~50mg/L以達(dá)到防止結(jié)團(tuán)的效果。
翌圣生物提供高品質(zhì)葡聚糖硫酸鈉
葡聚糖硫酸鈉（Dextran sulfate sodium salt，DSS）是葡聚糖的聚陰離子衍生物，由葡聚糖和氯磺酸的酯化反應(yīng)形成，以鈉鹽形式提供，并通過添加少量磷酸鹽進(jìn)行穩(wěn)定。
Dextran sulfate sodium salt,Mw 5,000 葡聚糖硫酸鈉，平均分子量約5 kD，可通過改變細(xì)胞表面的電荷，來促使單個細(xì)胞懸浮，防止細(xì)胞結(jié)團(tuán)，支持細(xì)胞高密度培養(yǎng)，提高細(xì)胞活力
圖1.硫酸葡聚糖鈉鹽結(jié)構(gòu)式
產(chǎn)品特點(diǎn)
1、 性能優(yōu)良：純度高（98%），含硫量16~20%；
2、 穩(wěn)定性高：聚陰離子復(fù)合物，可溶于水，形成無色溶液，形似天然粘多糖；
3、 安全無毒：可被自然降解，對細(xì)胞傷害較小。
更多應(yīng)用場景
1、 支持高密度培養(yǎng)，阻止細(xì)胞結(jié)團(tuán)，提高細(xì)胞活力；
2、 具有抗病毒活性：阻止病毒進(jìn)入宿主，抑制病毒的復(fù)制；
3、 作為合成納米顆粒的原料，用于研究藥物包封率等；
4、 抑制P53誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，扮演抗凋亡（anti-apoptotic）作用；
5、 激活分子伴侶介導(dǎo)的細(xì)胞自噬或巨自噬等；
6、 具有抑制補(bǔ)體通路及抗凝作用；
7、 在缺血再灌注損傷模型中，減少血管內(nèi)皮組織的損傷；
價格對比
性能對比
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品牌 |
進(jìn)口品牌S* |
翌圣生物 |
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含硫量 |
16.0-20.0% |
16.0-20.0% |
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游離硫 |
/ |
＜0.2% |
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溶解度 |
H2O：0.1 g/mL，澄清，無色至微黃色 |
H2O：0.1 g/mL澄清或者輕微模糊的黃色溶液 |
產(chǎn)品訂購
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產(chǎn)品名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
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60316EG25 |
25 g |
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60316EG60 |
100 g |
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60316EG76 |
500 g |
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60316EG80 |
1 kg |
葡聚糖硫酸鈉系列產(chǎn)品
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產(chǎn)品名稱 |
產(chǎn)品編號 |
規(guī)格 |
應(yīng)用場景 |
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60316ES25/60/76/80 |
25g/100g/500g/1kg |
結(jié)腸炎造模 |
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60316EA25/60/76/80 |
25g/100g/500g/1kg |
1）可提高核酸雜交率 2）沉淀脂蛋白 3）具有抗病毒活性 4）分離細(xì)菌、病毒、蛋白質(zhì)及核酸等 5）可抑制一些膽固醇酯水解酶活性 |
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60316EB25/60/76/80 |
25g/100g/500g/1kg |
1）多糖測定標(biāo)準(zhǔn)品 2）刺激B淋巴細(xì)胞增殖 3）脂蛋白沉淀劑 4）具有抗病毒活性 |
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60316EC25/60/76/80 |
25g/100g/500g/1kg |
1）蛋白純化過程中可以去除脂類的污染 2）分子實(shí)驗(yàn) 3）具有抗病毒活性 |
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60316ED25/60/76/80 |
25g/100g/500g/1kg |
具有抗病毒活性 |
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60316EF25/60/76/80 |
25g/100g/500g/1kg |
1）作為體積排阻劑有助于核酸雜交 2）作為合成納米顆粒的原料，用于研究藥物包封率等 3）具有抗病毒活性 |
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60316EH25/60/76/80 |
25g/100g/500g/1kg |
具有抗病毒活性 |
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60316EI25/60/76/80 |
25g/100g/500g/1kg |
具有抗病毒活性 |
葡聚糖硫酸鈉系列產(chǎn)品客戶發(fā)文（不完全統(tǒng)計(jì)）
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