硅膠膜離心柱法核酸提取原理
磁珠法核酸提取原理
運用納米技術,對超順磁性納米顆粒的表面進行表面修飾制備成超順磁性氧化硅納米磁珠。核酸結合到磁珠上主要依靠靜電作用、疏水作用和氫鍵作用。在鹽離子和外加磁場的作用下,能從樣本中分離出核酸,并洗去非特異性吸附的雜質(zhì),得到純化后的核酸。
核酸提取常見的問題及解決方案
A260 / A280比值應大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。
DNA提取中RNA 污染會增高260/280比值;
RNA提取中RNA降解會增高260/280比值;
蛋白的污染會降低A260 / A280比值。
較純凈的核酸A260/A230的比值一般在1.8-2.2之間;
酚、胍鹽、蛋白的污染會降低A260/A230的比值;
當樣本核酸濃度太低時,A260/A230結果不準確,會導致比值偏低;
當樣本濃度低于50ng/µl,A260/ A280、A260/ A230比值波動非常大,應謹慎對待!
提取的基因組DNA中鹽分濃度過高,請嚴格按照說明書操作;
提取的基因組DNA中含有乙醇。離心的速度和時間應該嚴格遵循說明書要求進行。
菌體裂解和中和過程中,劇烈混合造成基因組DNA斷裂所致。請溫和地進行菌體的裂解和中和;
每一步嚴格按照說明書的操作時間;
細菌的質(zhì)量差,中有許多斷裂或降解而游離的基因組DNA,請使用生長良好的新鮮細菌。
縮短干燥時間;
增強混勻震蕩強度。
NO!通常情況下,磁珠法試劑盒給出的參考磁珠用量都是略微過量的。
過多的磁珠將無法均勻分散于液體中;
過量的磁珠會吸附更多的雜質(zhì);
過多的磁珠會吸附蛋白酶、溶菌酶等功能成分,導致整個提取效率降低。
NO!于不同磁珠適合的體系和用量是不同的,往往需要調(diào)整后才能獲得更好的提取效果。
有的磁珠適合偏酸性系列的試劑體系,有的適合偏堿性系列的試劑體系;
有的磁珠磁響應性好但是沉降速度快,更適合磁棒式自動提取儀;
有的磁珠沉降速度慢但是磁響應時間長,更適合移液式自動提取儀。
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類別 | 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品應用 |
柱式RNA提取 | 19221ES | MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit | 細胞/組織總RNA提取 |
19211ES | MolPure® TRIeasy Plus Total RNA Kit | 總RNA提取 | |
19231ES | MolPure® Cell RNA Kit | 培養(yǎng)細胞RNA提取 | |
磁珠法RNA提取 | 18600ES | MolPure® Magnetic Tissue/Cell Total RNA Kit | 組織/細胞RNA提取 |
柱式DNA提取 | 18700ES | MolPure® Cell/Tissue DNA Kit | 細胞/組織DNA提取 |
18815ES | MolPure® Soil DNA Kit | 土壤DNA提取 | |
18820ES | MolPure® Stool DNA Kit | 糞便DNA提取 | |
磁珠法DNA提取 | 18371ES | MolPure® Magnetic FFPE DNA Kit | FFPE DNA提取 |
18382ES | MolPure® Magnetic Circulating Cell-Free DNA Kit v2 | 血漿游離DNA提取 | |
18504ES | MolPure® Magnetic M4P1 Blood DNA Kit | 血液gDNA提取 | |
質(zhì)粒提取 | 19036ES | MolPure® Endo-free Plasmid Maxi Kit | 無內(nèi)毒素質(zhì)粒大量提取 |
PCR產(chǎn)物回收 | 19101ES | MolPure® Gel Extraction Kit | 瓊脂糖凝膠回收 |