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      產(chǎn)品推薦│耐熱SSB助您的PCR產(chǎn)量更高更快
       
       
      


      

      

      在PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)過程中，雙鏈DNA解鏈?zhǔn)潜夭豢缮俚囊徊?，解開的單鏈DNA會(huì)重新配對形成雙鏈DNA或自身形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)，又或者被降解，導(dǎo)致不能穩(wěn)定擴(kuò)增DNA。為解決這個(gè)問題，單鏈DNA結(jié)合蛋白(single-stranded DNA-binding protein, SSB)就應(yīng)運(yùn)而生了。
      


       
      


      SSB具有高度的親和力，能夠迅速結(jié)合到DNA 的單鏈上，形成SSB-DNA復(fù)合體防止DNA再結(jié)合成雙鏈，使螺旋二聚體變得不穩(wěn)定，促進(jìn)引物和聚合酶與目標(biāo)DNA的結(jié)合，從而提高PCR的產(chǎn)量。正因如此，SSB蛋白被廣泛地用于各種基于PCR技術(shù)的PCR、RT-PCR、DNA測序等領(lǐng)域。
      


       
      


      


      圖1.SSB結(jié)合ssDNA示意圖
      


      （圖片源自：DOI: 10.1038/4611067a.）
      


       
      


      

      

      

      

      PCR擴(kuò)增必須經(jīng)歷高溫變性過程，這要求SSB蛋白具有熱穩(wěn)定性，能夠在高溫條件下仍然保持活性。為滿足這一需求，翌圣通過ZymeEditor™酶改造平臺(tái)對來源于嗜熱細(xì)菌的SSB進(jìn)行重組表達(dá)，獲得高純度耐高溫的SSB（Cat#14561ES）。翌圣SSB能夠在高溫條件下保持穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)與功能，具有提高PCR反應(yīng)的產(chǎn)量和特異性、提高RT-PCR中反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量和延伸能力以及改善強(qiáng)二級結(jié)構(gòu)區(qū)域的DNA測序的特點(diǎn)。
      

      

      

      

      


       
      

      


      

       
      


      

      

      

      

       
      

      


      

      部分?jǐn)?shù)據(jù)展示
      

      

      

      

      


       
      


      

      

      

      

      01
      

      


      

      無外切酶、切口酶殘留
      


      

       
      


      

       
      

      

      

      

      

      

      


      將0.5、2 μg的SSB分別與底物DNA在37℃孵育4 h，瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA譜帶不發(fā)生變化，表明SSB無外切酶及切口酶殘留。
      

      


      

      


      圖2. 外切酶和切口酶殘留檢測
      


       
      


      

      

      

      

      02
      

      


      

      

      無RNase殘留 
      

      


      

       
      


      

       
      

      

      

      

      

      

      


      將0.5 μg的SSB與底物RNA在37℃孵育4 h，瓊脂糖凝膠電泳檢測RNA譜帶不發(fā)生變化，表明SSB無RNase殘留。
      


      


      圖3. RNase殘留檢測
      

      


      

       
      


       
      


      

      

      

      

       
      

      


      

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      定位
      
			      		
			
			
      產(chǎn)品名稱
      
			      		
			
			
      產(chǎn)品貨號(hào)
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      耐熱SSB
      
			      		
			
			
      Single-Stranded DNA Binding Protein 
      
			      		
			
			
      14561ES
      
			      		
		
      
		
      
			
			
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      14672ES
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      UCF.ME® Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG), heat-labile(1U/μL)
      
			      		
			
			
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      T4 DNA Polymerase(5 U/μL) 
      
			      		
			
			
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      T4 Polynucleotide kinase(10 U/μL) 
      
			      		
			
			
      12902ES
      
			      		
		
      
		
      
			
			
      Hieff® Quick T4 DNA Ligase 
      
			      		
			
			
      10301ES
      
			      		
		
      
	      

      

      


      

       
      


      參考文獻(xiàn)：
      


      George NP, Keck JL. Molecular biology: Slip sliding on DNA. Nature. 2009 Oct 22;461(7267):1067-8. doi: 10.1038/4611067a.
      


       
      

      

      


       
      


      


       
      

       
       
       
       
       
       
       
      400-6111-883