環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增(loop mediated isothermal amplification,LAMP)使用具有鏈置換特性的Bst DNA聚合酶,在等溫條件下高效、快速、特異性擴(kuò)增靶標(biāo)序列,可在15-60分鐘內(nèi)實現(xiàn)109-1010倍的擴(kuò)增。等溫擴(kuò)增因其反應(yīng)快速、特異高、設(shè)備簡單易操作、結(jié)果易于鑒定等優(yōu)點,已經(jīng)應(yīng)用于病原菌、寄生蟲、病毒、疾病和轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測等領(lǐng)域,并且還將廣泛應(yīng)用于臨床傳染病診斷、環(huán)境監(jiān)測、食品安全等領(lǐng)域,已經(jīng)成為一種適用于分子POCT平臺的理想方法。
LAMP檢測方法分為多種,包括比濁法、pH顯色法、熒光染料法(如NHB、鈣黃綠素、SYBR Green、Syto等)、熒光探針法等。我司最新開發(fā)的LAMP檢測試劑盒具有靈敏度高、引物適用性好、在特異性、耐受性和穩(wěn)定性上均有較為優(yōu)秀的表現(xiàn)。在與同類產(chǎn)品的對上,具有較為明顯的優(yōu)勢。
LAMP與PCR擴(kuò)增對比
pH顯色法RT-LAMP是將可視染料作為敏感指示劑,在60-65℃等溫條件下,利用恒溫水浴鍋或普通PCR儀完成一步法RNA核酸擴(kuò)增。30min即可通過反應(yīng)后顏色的變化,判斷是否感染病原體,結(jié)果更直觀(陽性為橙黃色,陰性為洋紅色)。該方法適用于大批量人群的快速檢測。
RT-LAMP pH Sensitive Dyestuff Kit(13906ES)
RT-LAMP pH Sensitive Dye Chromogenic Version Freeze-Dryable Kit(13920)(可凍干版)
靈敏度、特異性
穩(wěn)定性
熒光染料法RT-LAMP是將熒光染料(如SYBR Green、Syto等)作為熒光標(biāo)記物,在擴(kuò)增反應(yīng)中與雙鏈DNA結(jié)合后,熒光信號會增強(qiáng)800-1000倍。使用熒光定量PCR儀在60-65℃恒溫條件下進(jìn)行測試,約30min后即可通過擴(kuò)增結(jié)果判斷是否感染病原體,還可搭配微流控芯片或便攜式檢測儀快速檢測。
RT-LAMP Dye Assay Kit(UDGplus)(13762ES)