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      精品推薦 | RNase A究竟有何魔力?揭秘其多元應用

       

      RNase A作為一種重要的核糖核酸內(nèi)切酶,在分子生物學領(lǐng)域發(fā)揮著關(guān)鍵作用。其特異性降解RNA的能力使其在質(zhì)粒DNA和基因組DNA制備、RNA酶保護分析、RNA干擾等實驗中具有廣泛的應用。翌圣生物的RNase A產(chǎn)品以其高活性、穩(wěn)定性和廣泛的適用性,為相關(guān)領(lǐng)域的研究人員提供了可靠的選擇。隨著分子生物學技術(shù)的不斷發(fā)展,RNase A及其相關(guān)產(chǎn)品將在更多領(lǐng)域展現(xiàn)出其應用價值。

       

      01

      RNase A的來源

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      動物來源

       

      RNase A,即核糖核酸酶A,主要來源于牛胰腺。它是一種單鏈多肽化合物,含有4個二硫鍵,分子量約為13.7 kDa。這種酶具有高度的穩(wěn)定性和廣泛的反應條件適應性,能夠在多種環(huán)境條件下保持其活性。牛胰來源的RNase A粉末無法完全去除DNase和蛋白酶,但是在RNase A配置成溶液的過程中進行加熱,可去除DNase和蛋白酶,后續(xù)可用于去除DNA樣品中殘留的RNA,或蛋白樣品中的核酸殘留。

       

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      重組來源

       

      重組核糖核酸酶A,His-tagged(rRNase A ,His-tagged)為來源于Bovine pancreas的RNase A基因在大腸桿菌中的表達產(chǎn)物,經(jīng)包涵體變復性后,再經(jīng)親和層析和離子交換層析等多步純化所得。純化的RNase A無DNase和蛋白酶污染,無動物源性。可用于去除DNA樣品中殘留的RNA,或蛋白樣品中的核酸殘留。

       

      02

      RNase A的作用原理

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      特異性識別底物

       

      RNase A主要識別單鏈RNA分子中的嘧啶堿基(胞嘧啶和尿嘧啶)的3’端位置,并在其3’端進行切割。

       

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      催化位點結(jié)合與水解反應

       

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      反應條件

       

      RNase A的作用條件相對寬松,pH值范圍在中性或弱堿性(pH=7.0~8.0),作用溫度在37℃左右。它具有廣泛的pH適用范圍和熱穩(wěn)定性,且經(jīng)過高溫或變性劑作用后也容易復性。此外,它在低濃度離子環(huán)境(NaCl/KCl)中可增強其活性,在高離子濃度中(>300 mM)其反應活性可能會被抑制。

       

      03

      RNase A的應用場景

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      質(zhì)粒DNA和基因組DNA制備

       

      在質(zhì)粒DNA和基因組DNA的制備過程中,RNA的存在可能會干擾后續(xù)實驗的結(jié)果。因此,在提取DNA時,通常會添加RNase A來降解樣品中的RNA分子,從而獲得純凈的DNA樣本。由于RNase A對DNA分子不具有降解作用,因此可以確保DNA分子的完整性和濃度不受影響。

       

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      RNA酶保護分析

       

      RNA酶保護分析法(RNase protection assay)是一種近年來發(fā)展起來的檢測RNA的雜交技術(shù)。其基本原理是利用單鏈RNA探針與待測的RNA樣品進行雜交形成RNA:RNA雙鏈分子,由于RNase A可專一性地降解未雜交的單鏈RNA,而雙鏈受到保護不被降解,經(jīng)凝膠電泳可以確定目的RNA的長度。該方法靈敏度較Northern雜交法更高,并可進行較為準確的定量。

       

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      RNA干擾研究

       

      RNA干擾(RNAi)是一種通過小分子RNA(如siRNA、miRNA)調(diào)控基因表達的技術(shù)。在RNAi實驗中,外源或內(nèi)源RNA可能干擾實驗效果。RNase A可降解非特異性RNA,降低背景噪音,從而提高RNAi的特異性和效率。

       

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      蛋白質(zhì)-RNA相互作用研究

       

      在研究蛋白質(zhì)與RNA的相互作用時,需去除未結(jié)合的RNA。RNase A可特異性降解游離RNA,保留與蛋白質(zhì)結(jié)合的RNA,便于后續(xù)分析。例如,在RNA結(jié)合蛋白(RBP)的研究中,通過RNase A處理后,結(jié)合蛋白的RNA純度提高了50%,有助于解析蛋白質(zhì)-RNA的相互作用機制。

       

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      RNA疫苗研發(fā)

       

      RNA疫苗的制備需確保RNA的完整性和純度。RNase A可用于去除制備過程中的RNA雜質(zhì),提高疫苗的質(zhì)量和安全性。例如在新冠疫苗研發(fā)中,RNase A處理后的RNA疫苗在動物實驗中表現(xiàn)出更高的免疫原性和更低的副作用。

       

      翌圣生物RNase A,來源于來源于牛胰腺,產(chǎn)品具有較高的酶活和穩(wěn)定性。該產(chǎn)品有粉末形式和液體形式,干粉形式-25℃~-15℃儲存,有效期2年;液體形式-25℃~-15℃儲存,有效期1年。

       

      04

      產(chǎn)品推薦

      產(chǎn)品介紹 酶活 貨號 規(guī)格 價格 應用
      Ribonuclease A(RNase A),from bovine pancreas 核糖核酸酶A,來源于牛胰腺;經(jīng)色譜工藝制備,DNase 活性含量極低。為凍干粉劑。貯存溫度-25℃~-15℃。有效期2年。 ≥80 Kunitz units/mg 10407ES 10407ES60:100 mg
      10407ES80:1 g
      10407ES05:5 g
      10407ES10:10 g
      385
      1645
      8235
      16465
      質(zhì)粒DNA和基因組DNA制備、RNA酶保護分析、RNA干擾等實驗中具有廣泛的應用
      Ribonuclease A(RNase A),from bovine pancreas 核糖核酸酶A,來源于牛胰腺;DNase I Free;液體形式,RNase A濃度100 mg/mL 。貯存溫度-25℃~-15℃。有效期1年。 ≥80 Kunitz units/mg 10406ES 10406ES03:1 mL 685
      Ribonuclease A(RNase A),from bovine pancreas 核糖核酸酶A,來源于牛胰腺;DNase I Free;液體形式,RNase A濃度10 mg/mL 。貯存溫度-25℃~-15℃。有效期1年。 ≥80 Kunitz units/mg 10405ES 10405ES03:1 mL
      10405ES10:10 mL
      85
      800

      400-6111-883