核酸是由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,為生命的最基本物質(zhì)之一。核酸廣泛存在于所有動(dòng)植物細(xì)胞、微生物內(nèi),并且常與蛋白質(zhì)結(jié)合形成核蛋白。核酸提取是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中最基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)之一,幾乎所有的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)上游都需要用到核酸提取。
核酸提取方法簡(jiǎn)介
核酸提取包含裂解和純化兩大步驟,裂解是使樣品中的核酸游離在裂解體系中的過(guò)程。通過(guò)使蛋白質(zhì)變性,破壞膜結(jié)構(gòu)及解開與核酸相連接的蛋白質(zhì),從而實(shí)現(xiàn)核酸游離在裂解體系中。裂解體系中還可能加入蛋白酶,利用蛋白酶將蛋白質(zhì)消化成小的片段,促進(jìn)核酸與蛋白質(zhì)的分開,同時(shí),也便于后面的純化操作以及獲得更純的核酸。
表1. 核酸提取常見裂解方式
裂解方法 |
原理 |
應(yīng)用 |
適用樣本 |
CTAB法 |
一種陽(yáng)離子去污劑,可溶解細(xì)胞膜,并與核酸形成復(fù)合物。該復(fù)合物在高鹽溶液中可溶,通過(guò)有機(jī)溶劑抽提,去除蛋白、多糖、酚類等雜質(zhì)后加入乙醇沉淀即可使核酸分離出來(lái)。 |
DNA、RNA提取 |
植物組織、真菌等 |
SDS法 |
一種陰離子去污劑,可促使細(xì)胞裂解,使染色體離析、蛋白質(zhì)變性,釋放出核酸。 |
DNA提取、質(zhì)粒提取 |
適用于大部分實(shí)驗(yàn)材料,如血液、細(xì)胞、動(dòng)物組織、細(xì)菌、酵母等 |
胍鹽法 |
胍鹽是蛋白強(qiáng)變性劑,采用高濃度的胍鹽裂解細(xì)胞,促使核蛋白體解離,同時(shí)使細(xì)胞內(nèi)核酸酶失活,避免釋放出的核酸被降解。 |
DNA、RNA提取 |
適用于各類動(dòng)物組織、培養(yǎng)細(xì)胞、次生代謝物較少的植物組織 |
純化則是使核酸與裂解體系中的其它成分,如蛋白質(zhì)、鹽及其它雜質(zhì)徹底分離的過(guò)程。常見的純化方式有:有機(jī)溶劑抽提、硅膠質(zhì)吸附(柱式法)、磁珠吸附3種。第一種方法是利用有機(jī)溶劑對(duì)裂解體系進(jìn)行反復(fù)抽提以去除蛋白等雜質(zhì);再用醇將核酸沉淀下來(lái),實(shí)現(xiàn)核酸與鹽的分離。第二種和第三種方法都是利用某些固相介質(zhì),在某些特定的條件下,選擇性地吸附核酸,而不吸附蛋白質(zhì)及鹽的特點(diǎn),實(shí)現(xiàn)核酸與蛋白質(zhì)及鹽的分離。
核酸提取的原則
保證核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)的完整性
排除其它核酸分子的污染(如提取DNA時(shí)排除RNA的干擾)
核酸樣品中不應(yīng)存在對(duì)酶有抑制作用的有機(jī)溶劑和高濃度的金屬離子
盡可能降低蛋白質(zhì)、多糖和脂類等大分子物質(zhì)污染
MolPure®系列試劑盒,理想的核酸提取產(chǎn)品!
MolPure®柱式核酸提取系列試劑盒采用MolPure® DNA/RNA Column和新型的溶液體系,適用于從各種反應(yīng)體系樣品、多種動(dòng)植物樣本、菌體等復(fù)雜樣本中高效提取和純化高純度、高質(zhì)量的核酸。大部分試劑盒提取過(guò)程不需要用到有毒的酚、氯仿等有機(jī)物抽提,也不需要用到耗時(shí)的異丙醇或乙醇沉淀,操作簡(jiǎn)便,具有高效、快速、環(huán)保等特點(diǎn)。升級(jí)版的離心柱能高效結(jié)合核酸,不吸附蛋白質(zhì)、多糖、脂類及其它非核酸類物質(zhì),提取的核酸純度高,可直接用于各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品類型
樣本類型 |
產(chǎn)品名稱/貨號(hào) |
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多類型樣本 |
動(dòng)物細(xì)胞、組織、常規(guī)植物樣本 |
總RNA提取試劑(同TRIzol)(10606ES) |
總RNA提取試劑盒(帶離心柱)(19211ES) |
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各類液體樣本 |
液體總RNA提取試劑(同TRIzol LS)(19201ES) |
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醫(yī)療樣本 |
細(xì)胞、組織 |
細(xì)胞/組織DNA提取試劑盒(18700ES) |
海洋動(dòng)物DNA提取試劑盒(18725ES) |
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微量樣本DNA提取試劑盒(18780ES) |
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細(xì)胞/組織總RNA提取試劑盒(19221ES) |
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培養(yǎng)細(xì)胞RNA提取試劑盒(19231ES) |
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細(xì)胞/組織miRNA提取試劑盒(19331ES) |
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血液、血清、血漿 |
血液DNA提取試劑盒(18730ES) |
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血清/血漿miRNA提取試劑盒(19332ES) |
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拭子類 |
拭子樣本DNA提取試劑盒(18790ES) |
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醫(yī)療樣本中及培養(yǎng)物中的病毒 |
病毒DNA/RNA提取試劑盒(19321ES) |
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植物樣本 |
常規(guī)植物樣本 |
植物DNA提取試劑盒(18800ES) |
多糖多酚植物DNA提取試劑盒(18801ES) |
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植物RNA提取試劑盒(19291ES) |
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多糖多酚植物RNA提取試劑盒(19292ES) |
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植物miRNA提取試劑盒(19333ES) |
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細(xì)菌樣本 |
細(xì)菌培養(yǎng)物 |
細(xì)菌DNA提取試劑盒(18806ES) |
細(xì)菌RNA提取試劑盒(19301ES) |
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真菌樣本 |
真菌培養(yǎng)物 |
真菌DNA提取試劑盒(18812ES) |
宏基因組樣本 |
土壤中的全微生物 |
土壤DNA提取試劑盒(18815ES) |
糞便中的全微生物 |
糞便DNA提取試劑盒(18820ES) |
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質(zhì)粒樣本 |
質(zhì)粒小量提取試劑盒(19001ES) |
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無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒(19021ES) |
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無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒大量提取試劑盒(19036ES) |
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DNA產(chǎn)物 |
瓊脂糖凝膠回收試劑盒(19101ES) |
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PCR產(chǎn)物純化試劑盒(19106ES) |
*以上產(chǎn)品除19101,19106ES外,均可參與發(fā)文章獎(jiǎng)勵(lì)活動(dòng),活動(dòng)見:http://www.vaaedu.com/news/detail/182
產(chǎn)品性能
DNA提取系列產(chǎn)品特點(diǎn)
得率高:產(chǎn)量高達(dá)40 µg
DNA純度高:無(wú)蛋白質(zhì)和RNA污染,可直接用于PCR、酶切和雜交等實(shí)驗(yàn)
快速簡(jiǎn)便:操作過(guò)程1 h完成
安全環(huán)保:無(wú)需使用酚氯仿等有機(jī)物抽提
RNA提取系列產(chǎn)品特點(diǎn)
操作簡(jiǎn)單,操作時(shí)間短:30 min內(nèi)完成單個(gè)樣本RNA提取。最快11min完成提取步驟。
安全無(wú)毒:無(wú)需氯仿、異丙醇等有機(jī)溶劑抽提。
RNA純度高:分為柱上DNase I消化和gDNA清除柱兩種產(chǎn)品形式。
回收效率高:與TRIzol一致。
應(yīng)用案例
DNA提取
RNA提取
膠回收和質(zhì)粒提取試劑盒
圖3:500 bp/1 kb PCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠回收膠圖,19101回收效率略優(yōu)于T公司同類產(chǎn)品。
產(chǎn)品訂購(gòu)
柱式DNA提取
產(chǎn)品名稱 |
貨號(hào) |
規(guī)格 |
18700ES50/70 |
50/200 T |
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18725ES50/70 |
50/200 T |
|
18730ES50/70 |
50/200 T |
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18780ES50/70 |
50/200 T |
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18790ES50/70 |
50/200 T |
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18800ES50/70 |
50/200 T |
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MolPure® Plant Plus DNA Kit 多糖多酚植物DNA提取試劑盒 |
18801ES50/70 |
50/200 T |
18806ES50/70 |
50/200 T |
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18812ES50/70 |
50/200 T |
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18815ES50/70 |
50/200 T |
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18820ES50/70 |
50/200 T |
質(zhì)粒DNA提取
產(chǎn)品名稱 |
貨號(hào) |
規(guī)格 |
19001ES50/70 |
50/200 T |
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MolPure® Endo-free Plasmid Mini Kit 無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒HOT |
19021ES50/70 |
50/200 T |
MolPure® Endo-free Plasmid Maxi Kit 無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒大量提取試劑盒HOT |
19036ES10 |
10 T |
產(chǎn)物純化與回收
產(chǎn)品名稱 |
貨號(hào) |
規(guī)格 |
19101ES50/70 |
50/200 T |
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19106ES50/70 |
50/200 T |
傳統(tǒng)總RNA提取
產(chǎn)品名稱 |
貨號(hào) |
規(guī)格 |
10606ES60 |
100 mL |
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TRIeasyTM LS Total RNA Extraction Reagent 液體總RNA提取試劑(同TRIzol LS) |
19201ES60 |
100 mL |
柱式總RNA提取
產(chǎn)品名稱 |
貨號(hào) |
規(guī)格 |
19211ES60 |
100 T |
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19221ES50 |
50 T |
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19231ES50 |
50 T |
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19291ES50 |
50 T |
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MolPure® Plant Plus RNA Kit 多糖多酚植物RNA提取試劑盒 |
19292ES50 |
50 T |
19301ES50 |
50 T |
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19321ES50 |
50 T |
|
19331ES50 |
50 T |
|
19332ES50 |
50 T |
|
MolPure® Plant miRNA Kit 植物miRNA提取試劑盒HOT |
19333ES50 |
50 T |
HB201214
更多產(chǎn)品敬請(qǐng)期待,持續(xù)上新中~