太實用了！轉(zhuǎn)染試劑常見問題大全，你想要的答案這里都有
選擇一款轉(zhuǎn)染試劑后，在使用過程中也會遇到各種問題，我們接下來對yeasen品牌產(chǎn)品常見問題進(jìn)行匯總，供大家參考↓↓↓
Hieff Trans™ Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑
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血清的存在會影響脂質(zhì)體的形成，建議配制核酸轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物時采用無血清培養(yǎng)基（一般推薦MEM 培養(yǎng)基）。
轉(zhuǎn)染試劑能否凍存？
不能。本試劑一定要4 ℃保存，要注意避免反復(fù)多次長時間開蓋，長時間開蓋會導(dǎo)致脂質(zhì)體氧化而影響轉(zhuǎn)染效率。
使用Hieff Trans™脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑需要注意什么？
1）細(xì)胞鋪板密度較高，以90%-95%為佳；
2）使用高純度的DNA有助于獲得較高的轉(zhuǎn)染效率；
3）制備轉(zhuǎn)染復(fù)合物時要求用無血清培養(yǎng)基稀釋DNA和轉(zhuǎn)染試劑；
4）轉(zhuǎn)染的時候培養(yǎng)基中不能添加抗生素；
5）試劑應(yīng)該在4度保存，要注意避免多次反復(fù)長時間開蓋；
6）初次使用應(yīng)優(yōu)化DNA濃度和陽離子脂質(zhì)體試劑量以得到最大的轉(zhuǎn)染效率。DNA 和轉(zhuǎn)染試劑的比例，通常推薦是1:2-1:3。
不需要。脂質(zhì)體復(fù)合物可以穩(wěn)定存在6個小時。如果在進(jìn)行轉(zhuǎn)染前沒有進(jìn)行細(xì)胞換液，為了保證細(xì)胞正常生長所需的營養(yǎng)，需要在4～6小時后換用新的培養(yǎng)基。但如果轉(zhuǎn)染之前已進(jìn)行過換液則在脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染后不需要進(jìn)行再次換液。
若想提高轉(zhuǎn)染效率，應(yīng)該注意什么？
1）轉(zhuǎn)染時細(xì)胞的密度，90%-95%。
2）轉(zhuǎn)染時，核酸和脂質(zhì)體稀釋液要用MEM無血清培養(yǎng)基。
3）轉(zhuǎn)染后4-6h可選擇換液。
可否進(jìn)行DNA和siRNA的共轉(zhuǎn)染？效果如何？
DNA和siRNA的共轉(zhuǎn)染時候，siRNA轉(zhuǎn)染效率差。
轉(zhuǎn)染試劑可否進(jìn)行慢病毒包裝的轉(zhuǎn)染呢？
慢病毒包裝是可以的，但是在進(jìn)行慢病毒包裝的效率不一定和轉(zhuǎn)染的效率有關(guān)，同時還跟包裝質(zhì)粒的選擇和質(zhì)粒間的比例有關(guān)系。
懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染是否可以用Hieff Trans™脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑？
Hieff Trans™脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑可以用于懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染，具體操作可見Protocol。另外，我們還推出了專門用于懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染試劑（Cat No. 40805, 懸浮細(xì)胞專用脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑）。
Hieff Trans™ siRNA/miRNA體外轉(zhuǎn)染試劑
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DNA轉(zhuǎn)染和siRNA轉(zhuǎn)染有什么不同？
1）siRNA由于只有二十幾個堿基對，相比DNA幾千上萬對堿基，小了許多。
2）用于轉(zhuǎn)染DNA的轉(zhuǎn)染試劑和方法并不適用于轉(zhuǎn)染siRNA。
3）siRNA轉(zhuǎn)染比DNA轉(zhuǎn)染對轉(zhuǎn)染試劑細(xì)胞毒性的要求嚴(yán)格。
轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染后需要換液嗎？
對于換液可以區(qū)分兩種情況：
1）轉(zhuǎn)染之前如果沒有換液應(yīng)在轉(zhuǎn)染6 小時左右后換液，以保證細(xì)胞生長所需營養(yǎng)。
2）如果轉(zhuǎn)染之前如果有換液，可以按照平時等到培養(yǎng)基出現(xiàn)營養(yǎng)不足時換液。
PEI轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)siRNA和質(zhì)粒的效率如何？
不可凍存，因為轉(zhuǎn)染試劑是一種PEI陽離子轉(zhuǎn)染試劑，低溫下凍存，會破壞PEI轉(zhuǎn)染試劑的活性，因此最好是4 度儲存，保持最好的轉(zhuǎn)染效能。
若想提高轉(zhuǎn)染效率，應(yīng)該怎么操作？
1）轉(zhuǎn)染時細(xì)胞的密度，30%-50%。
2）轉(zhuǎn)染時，siRNA和脂質(zhì)體稀釋液要用Opti-MEM 無血清培養(yǎng)基。
3）轉(zhuǎn)染后4-6h 可選擇換液。
