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      分子生物學(xué)用緩沖液buffer
       
             分子生物學(xué)緩沖液是用于維持生物分子在特定pH條件下的穩(wěn)定性和反應(yīng)速率的一種溶液。常用的分子生物學(xué)緩沖液包括Tris緩沖液、Phosphate緩沖液、HEPES緩沖液、MES緩沖液、MOPS緩沖液等。不同的緩沖液適用于不同的實(shí)驗(yàn)條件和分子生物學(xué)應(yīng)用。分子生物學(xué)緩沖體系是指用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的所有緩沖液的集合。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常需要使用多種緩沖液來適應(yīng)不同的反應(yīng)條件和實(shí)驗(yàn)需求。因此，一個(gè)完整的分子生物學(xué)緩沖體系應(yīng)該包括不同種類的緩沖液、不同濃度的緩沖液以及相應(yīng)的pH調(diào)節(jié)劑。在實(shí)驗(yàn)中，操作人員需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇合適的緩沖液和配方來實(shí)現(xiàn)最佳實(shí)驗(yàn)效果。
      


       
      


      在生化研究工作中，常常需要使用緩沖溶液來維持實(shí)驗(yàn)體系的酸堿度。研究工作的溶液體系pH值的變化往往直接影響到研究工作的成效。如果“提取酶”實(shí)驗(yàn)體系的pH值變動(dòng)或大幅度變動(dòng)，酶活性就會(huì)下降甚至完全喪失。所以配制緩沖溶液是一個(gè)不可或缺的關(guān)鍵步驟。
      
 
      


      緩沖溶液是無機(jī)化學(xué)及分析化學(xué)中的重要概念，緩沖溶液的pH值在一定的范圍內(nèi)不因稀釋或外加少量的酸或堿而發(fā)生顯著的變化，緩沖溶液依據(jù)共軛酸堿對及其物質(zhì)的量不同而具有不同的pH值和緩沖容量。分析測試中，在絡(luò)合滴定和分光光度法等許多反應(yīng)里都要求溶液的pH值保持在一個(gè)范圍內(nèi)，以保證指示劑的變色和顯色劑的顯色等，這些條件都是通過加入一定量的緩沖溶液達(dá)到的，所以緩沖溶液是分析測試中經(jīng)常需要的一種試劑。 采用電位滴定法測定外加酸或堿對不同配比同一種緩沖溶液的滴定曲線，不僅有助于理解緩溶液及緩沖容量的概念而且對分析測試中正確選緩沖溶液的配制方法及用量具有指導(dǎo)意義。
      
 
      


      采用電位滴定法測定緩沖溶液的滴定曲線，選擇 了常見的NH。-NH C1緩沖溶液，分別按照不同的配 比得到4種緩沖溶液，實(shí)驗(yàn)測定了強(qiáng)酸、強(qiáng)堿對緩沖 溶液的滴定曲線，滴定結(jié)果直觀清晰，對理解緩沖容 量的概念及實(shí)踐中緩沖溶液的選擇有積極的意義。
      
 
      


      1、組成
      
 
      


      緩沖體系由
      


      1、弱酸和它的鹽（如HAc---NaAc）
      


      2、弱堿和它的鹽（NH3·H2O---NH4Cl）
      


      3、多元弱酸的酸式鹽及其對應(yīng)的次級(jí)鹽（如NaH2PO4---Na2HPO4）
      


      的水溶液組成。
      
 
      


      2、配制
      
 
      


      只要知道緩沖對的PK值，和要配制的緩沖液的pH值（及要求的緩沖液總濃度），就能按公式計(jì)算[鹽]和[酸]的量。這個(gè)算法涉及對數(shù)換算，較麻煩，前人為減少后人的計(jì)算麻煩，已為我們總結(jié)出pH值與緩沖液對離子用量的關(guān)系并列出了表格。只要我們知道要配制的緩沖液的pH，經(jīng)查表便可計(jì)算出所用緩沖劑的比例和用量。例如配制500nmpH5.8濃度為0.1M磷酸緩沖液。
      


      經(jīng)查表知pH5.8濃度為0.2M Na2HPO48.0毫升，而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推論出配制100ml0.1M的磷酸緩沖液需要0.1M Na2HPO48.0毫升，而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。
      


      計(jì)算好后，按計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確稱好固態(tài)化學(xué)成分，放于燒杯中，加少量蒸餾水溶解，轉(zhuǎn)移入50ml容量瓶，加蒸餾水至刻度，搖勻，就能得到所需的緩沖液。
      


      各種緩沖溶液的配制，均按表格按比例混合，某些試劑，必須標(biāo)定配成準(zhǔn)確濃度才能進(jìn)行，如醋酸、氫氧化鈉等。另外，所有緩沖溶劑的配制計(jì)量都能從以上的算式準(zhǔn)確獲得。
      
 
      


      3、PH影響
      
 
      


      設(shè)緩沖系統(tǒng)的弱酸的電離常數(shù)為Ka（平衡常數(shù)），平衡時(shí)弱酸的濃度為[酸]，弱酸鹽的濃度為[鹽]，則由弱酸的電離平衡式可得下式：
      


      [H+] = Ka {[弱酸]/[共軛堿]}
      


      pH = pKa + lg {[共軛堿]/[弱酸]}
      


      這就是Henderson-Hasselbach 等式。
      


      如果[弱酸] = [共軛堿]，則
      


      pH =pKa
      


      根據(jù)此式可得出下列幾點(diǎn)結(jié)論：
      


      1 緩沖液的pH值與該酸的電離平衡常數(shù)Ka及鹽和酸的濃度有關(guān)。弱酸的pKa值衡定，但酸和鹽的比例不同時(shí)，就會(huì)得到不同的pH值。酸和鹽濃度相等時(shí)，溶液的pH值與PKa值相同。
      


      2 酸和鹽濃度等比例增減時(shí)，溶液的pH值不變。
      


      3 酸和鹽濃度相等時(shí)，緩沖液的緩沖效率為最高，比例相差越大，緩沖效率越低，緩沖液的一般有效緩沖范圍為pH=pKa+-1,pOH=pKb+-1。
      
 
      


      4、產(chǎn)品訂購：所有產(chǎn)品現(xiàn)貨，純度高于99.5%
      
 
      



       
       
       
       
       
       
       
      400-6111-883