產(chǎn)品說明書
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COA
已發(fā)表文獻
產(chǎn)品簡介
白細胞介素12（IL-12）是一種異二聚體多效性細胞因子，由p40亞基和p35亞基組成，IL-12 p40亞基由IL-23共享。IL-23是另一種異二聚體細胞因子，由一個獨特的 p19 亞基和 IL-12 的 p40 亞基組成，具有與IL-12相似和不同的生物活性。IL-12由巨噬細胞和B細胞產(chǎn)生，已被證明對T細胞和自然殺傷（NK）細胞有多種作用。IL-23由活化的樹突狀細胞和巨噬細胞分泌，并通過IL-23R與IL-12Rβ1復合的受體發(fā)出信號。IL-23已被證明能增強記憶性T細胞的增殖。
翌圣Mouse IL-12/IL-23 p40 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿中的小鼠p40(Mouse IL-12/IL-23 p40)。特異性抗小鼠p40抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本，經(jīng)過孵育，樣本中存在的小鼠p40與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質(zhì)后，加入檢測抗體孵育結合，經(jīng)洗滌，再加入酶結合物(Streptavidin-HRP)孵育結合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中小鼠p40的濃度成正比。加入終止液終止反應，在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產(chǎn)品信息
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貨號 |
98026ES48 / 98026ES96 |
|
規(guī)格 |
48 T / 96 T |
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檢測范圍 |
31.25-2000 pg/mL |
|
檢測方法 |
雙抗夾心法 |
|
檢測時長 |
4.5小時 |
|
靈敏度 |
14.87 pg/mL |
|
稀釋線性 |
89 - 124% |
|
回收率 |
94 - 107% |
|
板內(nèi)差 |
4.6% |
|
板間差 |
5.2% |
實驗數(shù)據(jù)
- 標曲數(shù)據(jù)
數(shù)據(jù)擬合繪制標準曲線，生成的標曲用于實驗數(shù)據(jù)分析。
標準曲線圖
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濃度（pg/mL） |
顯色值 |
平均值 |
校準值 |
|
|
2000 |
1.967 |
1.883 |
1.925 |
1.925 |
|
1000 |
1.143 |
1.094 |
1.118 |
1.117 |
|
500 |
0.655 |
0.643 |
0.649 |
0.657 |
|
250 |
0.419 |
0.413 |
0.416 |
0.399 |
|
125 |
0.266 |
0.221 |
0.243 |
0.256 |
|
62.5 |
0.190 |
0.170 |
0.180 |
0.178 |
|
31.25 |
0.137 |
0.130 |
0.134 |
0.135 |
|
0 |
0.086 |
0.084 |
0.085 |
/ |
- 靈敏度檢測
IL-12/IL-23 p40的最低檢測限為14.87 pg/mL，通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
- 精密度檢測
酶標板內(nèi)精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內(nèi)重復測定8次，評估酶標板內(nèi)的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測30次，評估酶標板間的精密度。
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項目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
||||
|
樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
8 |
8 |
8 |
30 |
30 |
30 |
|
|
平均值 |
764.4 |
202.1 |
82.0 |
780.6 |
197.6 |
80.5 |
|
標準差 |
36.0 |
8.4 |
4.1 |
37.8 |
8.4 |
5.2 |
|
變異系數(shù)（%） |
4.7 |
4.2 |
5.0 |
4.8 |
4.3 |
6.5 |
- 回收率檢測
通過不同水平的IL-12/IL-23 p40添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:
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樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍（%） |
|
血清 |
98.3 |
94.4-103.8 |
|
101.8 |
95.7-106.8 |
- 稀釋線性檢測
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血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
109.9 |
102.4-117.9 |
|
1:04 |
106.0 |
93.3-112.9 |
|
1:08 |
109.4 |
101.5-116.0 |
|
1:16 |
113.0 |
101.0-121.7 |
|
血漿稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
108.7 |
99.0-116.3 |
|
1:04 |
110.2 |
97.2-124.0 |
|
1:08 |
111.4 |
103.8-119.0 |
|
1:16 |
100.7 |
89.2-116.3 |
|
細胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
93.5 |
91.7-95.7 |
|
1:04 |
94.7 |
91.3-99.9 |
|
1:08 |
101.1 |
96.8-108.8 |
|
1:16 |
102.8 |
96.5-107.2 |
- 樣本值
應用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
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樣本類型 |
樣本數(shù)目 |
平均值（pg/mL） |
樣本值（pg/mL） |
|
血清 |
8 |
160.1 |
157.1-171.9 |
|
細胞培養(yǎng)上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得31.25 pg/mL
- 測定特異性
本試劑盒識別天然和重組小鼠p40。下述因子進行了特異性的評估，沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。
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Recombinant human: |
Recombinant Mouse: |
|
|
GM-CSF |
IL-6 |
IFN-γ |
|
IFN-γ |
IL-10 |
IL-1α |
|
IL-1α |
IL-12 |
IL-1β |
|
IL-1β |
IL-17A |
IL-4 |
|
IL-2 |
IL-23 |
IL-6 |
|
IL-3 |
TNF-α |
IL-10 |
|
IL-4 |
|
IL-17A |
|
IL-5 |
|
TNF-α |
檢測簡圖
疑問解答
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問題 |
造成原因 |
解決方法 |
|
標曲不好 |
移液量不準確 |
檢查移液器，按時校準，仔細操作，充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
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稀釋方法不恰當 |
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顯色值偏低 |
孵育時間太短 |
給予足夠的孵育時間，樣本和溶解的標準品隔夜后更換。 |
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移液量不足或稀釋不當 |
校準移液器和規(guī)范操作 |
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CV偏高 |
酶標板清洗不當 |
使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機，檢查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
準備新鮮洗液 |
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靈敏度較低 |
試劑盒儲存不當 |
按照產(chǎn)品組分表進行保存。 |
