產(chǎn)品描述
Fluorescein diacetate即FDA,中文名為二乙酸熒光素,是一種具細(xì)胞膜滲透性的酯酶底物,常用作細(xì)胞活力分析。不僅可以測(cè)定酯酶活力,因FDA需要在酯酶的催化下才能活化產(chǎn)生綠色熒光;而且還可用來(lái)鑒定細(xì)胞膜完整性,只有在完整膜內(nèi)才能維持熒光。也可用于流式分析。最大激發(fā)波長(zhǎng)(Ex)和發(fā)射波長(zhǎng)(Em)分別為490 nm和526 nm。另外,F(xiàn)DA還有一些其他用途:1)細(xì)胞內(nèi)相互作用研究;2)作為底物,用于組織化學(xué)酯酶檢測(cè);3)用于分離的肝細(xì)胞中線粒體電位研究等。
產(chǎn)品性質(zhì)
英文別名(English Synonym) |
Cellstain-FDA; 3,6-Diacetoxyfluoran; Di-O-acetylfluorescein; |
中文別名(Chinese Synonym) |
熒光素二乙酸酯;二乙酸熒光素酯;熒光素雙醋酸酯; |
CAS號(hào)(CAS NO.) |
596-09-8 |
分子式(Formula) |
C24H16O7 |
分子量(Molecular Weight) |
416.39 |
熔點(diǎn)(Melting Point) |
204-210℃ |
純度(Purity) |
>98%(HPLC) |
溶解性(Solubility) |
溶于氯仿,DMSO,乙醇,微溶于水 |
結(jié)構(gòu)式(Structure) |
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運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃避光干燥保存,有效期2年。
使用方法
1.儲(chǔ)備液配置
取4.1639 mg FDA粉末溶于1ml DMSO中以制備10mM儲(chǔ)備溶液。建議早使用儲(chǔ)備液;或按照單次用量分裝,并在<-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,2個(gè)月效期。
2.工作液配置
用HHBS緩沖液或其他生理緩沖液(pH 7.0)稀釋染料儲(chǔ)備液,稀釋濃度至1-20μM,渦旋混合均勻。
3.細(xì)胞染色及檢測(cè):
3.1用待測(cè)試化合物細(xì)胞培養(yǎng)一段時(shí)間。
3.2離心細(xì)胞,每管2-10×105個(gè)細(xì)胞。
3.3在500μL染料工作溶液中重懸細(xì)胞。
3.4在室溫或37°C下避光孵育細(xì)胞15-30min。
3.5吸掉染料工作溶液,用HHBS或其他緩沖液清洗細(xì)胞。 將細(xì)胞重懸于500μL預(yù)熱的HHBS或培養(yǎng)基中,使其密度為2-10×105個(gè)細(xì)胞/管。
3.6用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡觀察Ex / Em = 490 / 520nm處的熒光變化。
注意事項(xiàng)
1)本品保存及使用過(guò)程中避免與氧化劑接觸。
2)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
3)本產(chǎn)品僅作科研用途!
HB230503