產(chǎn)品簡介  

本試劑盒利用獨(dú)特的磁珠與緩沖液系統(tǒng)，可以特異性地吸附RNA，有效去除蛋白、鹽離子和其它雜質(zhì)。常用于純化去除rRNA后的總RNA樣本，體外轉(zhuǎn)錄的RNA產(chǎn)物，RNA標(biāo)記產(chǎn)物以及合成的RNA等。純化后的RNA適用于RNA文庫構(gòu)建、RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northern Blot和RNAi等實(shí)驗(yàn)。

 

產(chǎn)品信息

貨號(hào)	12602ES03 /12602ES08 / 12602ES56/ 12602ES75
規(guī)格	1 mL / 5 mL / 60 mL / 450 mL

 

儲(chǔ)存條件

2~ 8℃保存，有效期2年。

 

使用說明

所需額外試劑：

100% 乙醇，Nuclease-free水，磁力架，Nuclease-free離心管。

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：

1. 將RNA clean beads 從4 ℃取出，平衡至室溫（約30 min）。
2. 在一個(gè)Nuclease free PCR管中，用Nuclease-free水將0.5-5 μg總RNA稀釋至50 μL。

RNA純化：

1. 顛倒或渦旋振蕩使磁珠充分混勻，吸取2×磁珠（100 μL）加入總RNA樣品中（50 μL），用移液器吹打6次充分混勻。
2. 室溫孵育5 min，使RNA結(jié)合到磁珠上。
3. 將樣品置于磁力架上5 min，待溶液澄清后，小心移除上清。
4. 保持樣品置于磁力架上，加入200 μL新鮮配制的80%乙醇,漂洗磁珠，室溫孵育30 s，小心移除上清。

【注】漂洗時(shí)使用的80%乙醇需要使用Nuclease-free水新鮮配制，以防止引入RNase酶導(dǎo)致RNA降解。

5. 重復(fù)步驟4，共漂洗2次。
6. 保持樣品始終處于磁力架上，開蓋空氣干燥磁珠5 min。

【注】磁珠開蓋晾干時(shí)要避免過分干燥，如果磁珠出現(xiàn)龜裂，則提示磁珠過分干燥，此時(shí)RNA的洗脫效率會(huì)降低。

7. 將樣品從磁力架上取出，加入12 μL Nuclease-free 水，用移液器吹打6次以充分混勻，室溫靜置5 min。
8. 將樣品置于磁力架5 min，待溶液澄清后，小心轉(zhuǎn)移上清10 μL至一個(gè)新的Nuclease-free PCR管中。

【注】建議轉(zhuǎn)移上清時(shí)留2-3 μL液體，以免吸到磁珠影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。得到的RNA極不穩(wěn)定，建議盡快進(jìn)入下一步。若要保存，請(qǐng)置于-80℃保存。

 

注意事項(xiàng)

1. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

3. 磁珠使用前一定要平衡到室溫后混勻，否則可能影響樣品的回收效率。

4. 操作過程要嚴(yán)格保證無RNase酶和核酸污染。

5. 80%乙醇需現(xiàn)用現(xiàn)配，否則將影響回收效率。

6. 本試劑盒和其他試劑配套使用時(shí)，請(qǐng)按照具體實(shí)驗(yàn)說明來進(jìn)行操作。

 

結(jié)果展示

使用總RNA純化試劑盒純化前后，RNA樣品qRT-PCR Ct值變化

RNA樣品	人		小鼠		擬南芥
檢測基因	GAPDH	β-Actin	GAPDH	β-Actin	PP2A	TUB2
純化前Ct值	12.92	12.36	18.74	18.53	24.33	22.2
純化后Ct值	12.32	11.89	17.62	17.91	23.38	21.35

【注】使用Hieff NGS® RNA Cleaner可以有效去除影響RT-PCR的抑制劑，讓檢測結(jié)果更加真實(shí)。

 

Ver.CN20240408