產(chǎn)品簡介

Cell and Tissue Lysis Buffer for Nitric Oxide Assay 細(xì)胞與組織裂解液(一氧化氮檢測用) 是一種專門用于一氧化氮或總一氧化氮檢測的細(xì)胞與組織裂解液。使用該產(chǎn)品裂解的樣品，可以用于一氧化氮檢測試劑盒和總一氧化氮檢測試劑盒（50107ES）的檢測。
   經(jīng)過該產(chǎn)品的裂解，樣品中包含了細(xì)胞或組織樣品中的大部分蛋白，可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒(20200ES/20201ES)測定蛋白濃度，并可以用于SDS-PAGE和Western印跡檢測。需要注意的是本產(chǎn)品不含蛋白酶和磷酸酯酶的抑制劑，如添加蛋白酶和磷酸酯酶抑制劑可能會(huì)干擾后續(xù)的一氧化氮檢測。
   本產(chǎn)品可反復(fù)凍融，如果用于培養(yǎng)于六孔板中一個(gè)孔的細(xì)胞的裂解，或者用于20 mg組織的裂解液，可以裂解約500-1000個(gè)樣品。

產(chǎn)品信息

使用方法

1. 對于培養(yǎng)的細(xì)胞樣品

1. 輕搖混勻細(xì)胞與組織裂解液。
   2) 貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照6孔板每孔加入100-200 μL裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞1-2秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。
   3) 對于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞加入100-200 μL裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，需分裝成50-100萬細(xì)胞/管，然后再裂解。大團(tuán)的細(xì)胞較難裂解充分，而少量的細(xì)胞由于裂解液容易和細(xì)胞充分接觸，相對比較容易裂解充分。
   4) 充分裂解后：10000-14000g離心3-5 min，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的一氧化氮檢或蛋白濃度測定等操作。樣品制備后如果當(dāng)日不能完成一氧化氮檢測，可以-25~-15℃保存，但仍宜盡快完成檢測。
   5) 裂解液用量說明：通常6孔板每孔細(xì)胞加入100 μL裂解液已經(jīng)足夠，但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到150 μL或200 μL。
   2. 對于組織樣品
   1）輕搖混勻細(xì)胞與組織裂解液。
   2）把組織剪切成細(xì)小的碎片。
   3）按照每20 mg組織加入100-200 μL裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量。)
   4）用玻璃勻漿器或其它適當(dāng)?shù)膭驖{設(shè)備勻漿，直至充分裂解。(如果組織樣品本身非常細(xì)小，加入裂解液后可以直接通過強(qiáng)烈vortex使樣品裂解充分。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是比較方便，不必使用勻漿設(shè)備，缺點(diǎn)是不如使用勻漿設(shè)備那樣裂解得比較充分。)
   5）充分裂解后，10000-14000g離心3-5 min，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的一氧化氮檢或蛋白濃度測定等操作。樣品制備后如果當(dāng)日不能完成一氧化氮檢測，可以-25~-15℃保存，但仍宜盡快完成檢測。

儲(chǔ)存條件

-25~-15℃保存，有效期1年。

注意事項(xiàng)  

1. 裂解樣品的所有步驟需在冰上或2~8℃進(jìn)行。
2. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
3. 本產(chǎn)品僅用于科研用途，禁止用于人身上。

Ver.CN20240407