產(chǎn)品簡介  

白細(xì)胞介素-4（IL-4），也稱為B細(xì)胞刺激因子-1，是一種多效性細(xì)胞因子，誘導(dǎo)初始輔助性T細(xì)胞分化為Th2細(xì)胞，由肥大細(xì)胞、活化的T細(xì)胞和骨髓基質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生。成熟的人IL-4與牛、小鼠和大鼠IL-4分別具有55%、39%和43%的氨基酸序列同一性。IL-4在調(diào)節(jié) T 淋巴細(xì)胞、B 淋巴細(xì)胞、單核-巨噬細(xì)胞等多種細(xì)胞的增殖、分化、凋亡中發(fā)揮重要作用，也對(duì)腫瘤、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、造血干細(xì)胞移植、過敏性疾病、疫苗免疫等疾病有多重生物學(xué)功能和治療作用。

翌圣Human IL-4 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿中的人白介素4(Human IL-4)。特異性抗人白介素4抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本，經(jīng)過孵育，樣本中存在的人白介素4與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測抗體孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中人白介素4的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。

 

產(chǎn)品信息

貨號(hào)	97066ES48 / 97066ES96
規(guī)格	48 T / 96 T
檢測范圍	31.25-2000 pg/mL
檢測方法	雙抗夾心法
檢測物種	人
檢測時(shí)長	4.5小時(shí)
靈敏度	5.57 pg/mL
稀釋線性	79 - 123%
回收率	76 - 116%
板內(nèi)差	3.3%
板間差	8.4%

 

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

1. 標(biāo)曲數(shù)據(jù)

數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，生成的標(biāo)曲用于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析。

標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

濃度（pg/mL）	顯色值		平均值	校準(zhǔn)值
2000	2.840	2.700	2.770	2.790
1000	2.478	2.426	2.452	2.424
500	1.903	1.835	1.869	1.860
250	1.143	1.233	1.188	1.217
125	0.677	0.680	0.678	0.694
62.5	0.409	0.415	0.412	0.373
31.25	0.216	0.234	0.225	0.208
0	0.044	0.044	0.044	/

 

2. 靈敏度檢測

IL-4的最低檢測限為5.57 pg/mL，通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算得出。

3. 精密度檢測

酶標(biāo)板內(nèi)精密度

3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測定6次，評(píng)估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。

酶標(biāo)板間精密度

3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測24次，評(píng)估酶標(biāo)板間的精密度。

項(xiàng)目	板內(nèi)精密度			板間精密度
樣本	1	2	3	1	2	3
	6	6	6	24	24	24
平均值	1061.34	282.31	61.95	1139.72	291.45	64.65
標(biāo)準(zhǔn)差	54.70	7.39	1.25	108.02	26.82	4.20
變異系數(shù)（%）	5.2	2.6	2.0	9.5	9.2	6.5

4. 回收率檢測

 通過不同水平的IL-4添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:

樣本類型	平均回收率(%)	范圍（%）
血清	90.7	79.3-101.4
血漿	93.5	90.3-101.0
細(xì)胞培養(yǎng)上清	97.1	75.8-116.4

5. 稀釋線性檢測

血清稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	94.0	87.7-104.5
1:04	93.0	83.3-108.3
1:08	97.1	86.5-113.5
1:16	106.4	94.6-123.6

 

血漿稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	85.6	83.6-88.9
1:04	91.5	83.6-98.2
1:08	91.8	87.1-96.2
1:16	92.9	79.2-101.7

 

細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	105.6	94.8-111.6
1:04	110.1	107.0-113.7
1:08	109.0	100.4-116.0
1:16	106.1	99.1-109.9

6. 樣本值

應(yīng)用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。

樣本類型	樣本數(shù)目	平均值（pg/mL）	樣本值（pg/mL）
血清	12	n.d.	n.d.
血漿	8	n.d.	n.d.
細(xì)胞培養(yǎng)上清	4	n.d.	n.d.

n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得15.63 pg/mL

7. 測定特異性

本試劑盒識(shí)別天然和重組人白介素4。下述因子進(jìn)行了特異性的評(píng)估，沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。

Recombinant human:		Recombinant Mouse:
IL-1α	IL-7	IL-1α	IL-6
IL-1β	IL-8	IL-1β	GM-CSF
IL-2	IL-10	IL-2	IFN-γ
IL-3	GM-CSF	IL-3
IL-5	CSF	IL-4
IL-6	IFN-γ	IL-5