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      超潔凈鼠源RNase抑制劑含甘油UCF.ME? Advanced Murine RNase Inhibitor (40 U/μL)

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      產(chǎn)品說明書

      FAQ

      COA

      已發(fā)表文獻

      產(chǎn)品簡介

       

      RNase 抑制劑 (RNase inhibitor) 是存在于人的胎盤中一種特異性核糖核酸酶 (RNase) 抑制劑,其特異性失活 RNase 的原理是:與 RNase 以非共價鍵結(jié)合形成復(fù)合體,造成 RNase 失活。

      本產(chǎn)品是以可溶形式在大腸桿菌中表達純化的重組鼠源 RNase 抑制劑,能夠廣泛抑制各種類型 RNase (RNase A, B, C)。 經(jīng) RT-PCR、RT-qPCR 檢驗,本產(chǎn)品能與各種逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA 聚合酶兼容。與人源 RNase inhibitor 相比,本產(chǎn)品不含人源蛋白中的兩個對氧化非常敏感的半胱氨酸,因而具有更高的抗氧化活性。同時,更加適合于對高 DTT 敏感性實驗,如 qPCR 等。

      Murine RNase Inhibitor (40 U/µL) 鼠源 RNase 抑制劑 (Cat#10603ES) 相比,本品經(jīng)過翌圣生物 UCF.ME®超低殘留工藝處理,產(chǎn)品中核酸酶、宿主gDNA等殘留更低,適合對背景菌要求更為嚴(yán)格、性能要求更高的應(yīng)用場景,如支持引物探針提前預(yù)混的熒光定量PCR體系的開發(fā)等。

       

      產(chǎn)品信息

       

      貨號

      14676ES05 / 14676ES10 / 14676ES20 / 14676ES50 / 14676ES60 / 14676ES70

      規(guī)格

      2 KU / 10 KU / 20 KU / 40 KU /  100 KU / 400 KU

      活性定義

      抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定義為1 U。RNase A活性通過水解Cyclic 2’,3’-CMP生成3’-CMP定量求得

       

      組分信息

       

      組分編號

      組分名稱

      14676ES05

      (2 KU)

      14676ES10

      (10 KU)

      14676ES20

      (20 KU)

      14676ES50

      (40 KU)

      14676ES60

      (100 KU)

      14676ES70

      (400 KU)

      14676

      UCF.ME® Advanced Murine RNase Inhibitor (40 U/µL)

      50 μL

      250 μL

      500 μL

      1 mL

      2.5 mL

      10 mL

       

      儲存條件

       

      -25~-15℃保存,有效期1年。

       

      使用說明

       

      1. 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系配制(20 μL體系)

      組分

      使用量

      RT Buffer

      4 μL

      dNTP Mix (10 mM)

      1 μL

      Hifair UCF. ME® Advanced Reverse Transcriptase (200 U/μL)

      1 μL

      UCF.ME® Advanced Murine RNase Inhibitor (40 U/µL)

      1 μL

      RNase free ddH2O

      To 20 μL

      模板RNA

      Total RNA:1 ng-5 μg

      1. 逆轉(zhuǎn)錄程序設(shè)置

      溫度

      時間

      25℃*

      5 min

      42℃**

      15-30 min

      85℃***

      5 min

      *當(dāng)使用Random Primers時,需25℃,孵育5 min;若使用Oligo (dT)18或Gene Specific Primers,此步可省略。

      **逆轉(zhuǎn)錄溫度:推薦使用42℃。對于高GC含量模板或者復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)的模板,可將逆轉(zhuǎn)錄溫度提高至50-60℃。

      ***85℃加熱5 min,目的是使逆轉(zhuǎn)錄酶失活。

      1. 逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可立即用于后續(xù)PCR或qPCR反應(yīng),也可-20℃短期保存,若需長期保存,建議分裝后,于-80℃保存,避免反復(fù)凍融。
      2. 適用機型

      ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™,ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex;

      Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™;

      Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™;

      Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;

      Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000;

      Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96;

      Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR; SLAN 96S, 96P.

       

      注意事項

       

      1. 本品抑制 RNase 活性的 pH 值范圍較廣,在 pH 7-8 時表現(xiàn)最大活性。

      2. 避免起泡或劇烈攪拌、渦旋等操作,以防止本品失活。

      3. 本品不抑制 RNase H 活性。

      4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

       

       

      Ver.CN20241119

       

      400-6111-883