【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】

 

微球菌核酸酶也被稱為Micrococcal Endonuclease、S7 Nuclease或 MNase，是一種來(lái)源于金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的核酸內(nèi)切酶。在pH7-10和Ca²⁺存在的條件下可降解單鏈、雙鏈、線狀、環(huán)狀等多種形式的DNA或RNA，并產(chǎn)生3'磷酸末端的單核苷酸和寡核苷酸。

 

【產(chǎn)品應(yīng)用】

 

1. 染色質(zhì)分析；

2. 核小體定位；

3. 降解蛋白制劑中的核酸；

4. 快速RNA測(cè)序。

 

【產(chǎn)品性能】

 

DNA底物切除能力（酶活）與進(jìn)口品牌A*一致

圖1  酶活性測(cè)試（1ug λ DNA底物，50 uL體系，37℃反應(yīng)15min）

 

 

無(wú)蛋白酶殘留檢測(cè)

圖2蛋白酶檢測(cè)（10000 U Micrococcal Nuclease分別與相應(yīng)的底物蛋白在37℃孵育16 h）

 

E. coli基因組DNA殘留< 1 copy/2000 U

圖2 E. coli g DNA殘留檢測(cè)（不同批次Micrococcal Nuclease宿主gDNA殘留遠(yuǎn)低于1 copy/2000 U）

 

【產(chǎn)品信息】

 

組分信息

組分編號(hào)	組分名稱	14547ES73	14547ES83
14547-A	Micrococcal Nuclease(2000 U/µL)	160 μL	800 μL
14547-B	10×MNase Reaction Buffer	1.5 mL	8 mL

 

儲(chǔ)存條件

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

【使用說(shuō)明】

 

1. 以消化λDNA為例，該酶1U理論上即可在15 min內(nèi)消化 1 µg Lambda DNA 產(chǎn)生小于400 bp的DNA片段。

2. 配制以下體系并充分混勻：

組分	體積（μL）
10×MNase Reaction buffer	5
λDNA(500 ng/μL)	2
Micrococcal Nuclease(2000 U/µL)	1
BSA(2 mg/mL)*	2.5
DEPC水	39.5
Total	50

*: 反應(yīng)體系需添加BSA。

3. 37℃孵育15min。
4. 終止反應(yīng)：向反應(yīng)體系中加入1μL0.5M EDTA，混勻。

 

【注意事項(xiàng)】

 

1. 該酶反應(yīng)時(shí)需添加100 µg/mL的終濃度的BSA，且需要Ca²⁺。

2. 該酶的活性范圍為 pH 7-10，pH 9.2 時(shí)活性最佳，且鹽離子濃度低于100 mM。

3. 該酶對(duì)單鏈核酸的切割效率比雙鏈核酸更高。

4. 該酶偏向于切割富含腺苷酸、脫氧腺苷酸或胸腺苷酸的位點(diǎn)。

5. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

6. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

 

 

 

Ver. CN20250211