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產(chǎn)品描述
Ceturegel® Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白的EHS小鼠腫瘤中提取出來(lái)的可溶性基底膜制備物,其主要成分由層粘連蛋白,Ⅳ型膠原,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)和巢蛋白等組成,還包含生長(zhǎng)因子如TGF-beta、EGF、IGF、FGF、組織纖溶酶原激活物和EHS腫瘤自身含有的其他生長(zhǎng)因子。在室溫條件下,聚合形成具有生物學(xué)活性的三維基質(zhì),模擬體內(nèi)細(xì)胞基底膜的結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能,有利于體外細(xì)胞的培養(yǎng)和分化,可用于對(duì)細(xì)胞形態(tài)、生化功能、遷移、侵襲和基因表達(dá)等的研究。
Ceturegel® Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus基質(zhì)膠為無(wú)菌制品,經(jīng)過(guò)類器官培養(yǎng)驗(yàn)證,滿足類器官構(gòu)建所需。
產(chǎn)品組分
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40192ES03 |
40192ES08 |
40192ES10 |
Ceturegel® Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus基質(zhì)膠 |
1.5 mL |
5 mL |
10 mL |
運(yùn)輸與保存方法
干冰運(yùn)輸。-20℃保存,有效期兩年。
產(chǎn)品應(yīng)用
1. Ceturegel®基質(zhì)膠的融化與保存
【注】:Ceturegel®基質(zhì)膠對(duì)溫度非常敏感,不可多次重復(fù)凍融。Ceturegel®基質(zhì)膠的分裝以及凝膠前的準(zhǔn)備過(guò)程中必須在冰上(4℃)操作,因?yàn)闇囟壬晕⑻岣撸芸赡艹霈F(xiàn)成膠現(xiàn)象,從而導(dǎo)致基質(zhì)膠不均勻或者影響后續(xù)凝膠,所使用耗材都必須進(jìn)行預(yù)冷。
a)收到產(chǎn)品后,如果暫時(shí)不使用,請(qǐng)整瓶或分裝為500 μL/支直接放到-20℃凍存(不要放在無(wú)霜冰箱內(nèi))。
b)第一次使用,將整瓶Ceturegel®基質(zhì)膠放入冰盒內(nèi)再放到4℃過(guò)夜,使其充分融解。
c)Ceturegel®基質(zhì)膠的使用特別注意,基質(zhì)膠在22-35℃能夠快速成膠。可用無(wú)血清培養(yǎng)基來(lái)稀釋基質(zhì)膠,稀釋后需要立即使用。
d)基質(zhì)膠使用過(guò)程中如有氣泡產(chǎn)生,可4℃瞬離15-30s。
2. 類器官培養(yǎng)過(guò)程(以24孔板為例,僅供參考)
1)解凍后的Ceturegel®基質(zhì)膠用類器官專用培養(yǎng)基進(jìn)行混合,將混合液與細(xì)胞或組織進(jìn)行混合,盡快操作以避免基質(zhì)膠形成凝膠。
【注】:基質(zhì)膠稀釋比例≥50%以保證培養(yǎng)過(guò)程中Ceturegel®基質(zhì)膠結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。
2)將類器官混合懸液種植于24孔板底部正中央,每孔20-30 μL左右,輕微平鋪膠滴,使膠滴厚度在2 mm左右即可,但避免懸液接觸孔板側(cè)壁,并將種植后的培養(yǎng)板至于37℃二氧化碳恒溫培養(yǎng)箱中,孵育20-30 min左右待基質(zhì)膠凝固。
3)待Ceturegel®基質(zhì)膠完全凝固后,沿壁緩慢加入已配制好的類器官培養(yǎng)基,按照700-800 μL/孔。
4)將 24 孔板置于37℃二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),定期更換新鮮類器官培養(yǎng)基并監(jiān)測(cè)類器官生長(zhǎng)狀態(tài)。(培養(yǎng)類器官常用的是24孔板培養(yǎng),按30 μL/孔形成膠滴,再加入500-800 μL類器官培養(yǎng)基覆蓋膠滴;96孔板按10 μL/孔形成膠滴,再加入200 μL類器官培養(yǎng)基覆蓋膠滴;6孔板每孔可以種植多個(gè)40 μL膠滴,加入2-3 mL類器官培養(yǎng)基覆蓋膠滴)
產(chǎn)品特性
Ceturegel®基質(zhì)膠凍融后,輕輕搖晃試劑瓶使Ceturegel®基質(zhì)膠分散均勻。所有操作均需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行,試劑瓶瓶蓋可用70%乙醇擦拭,并自然干燥。應(yīng)使用預(yù)冷的移液器以保證Ceturegel®基質(zhì)膠呈勻漿狀。
【注】:可將融化后的Ceturegel®分裝在多個(gè)小管,所有分裝均需用預(yù)冷的凍存管,迅速冷凍并保存,避免多次凍融。
Ceturegel®在22-35℃溫度環(huán)境下快速成膠,因此融化時(shí)在4℃冰上過(guò)夜解凍(4℃時(shí)會(huì)隨著溫度的上升部分成膠)。所有用品在使用前需置于冰浴,必須使用預(yù)冷的移液管、吸頭及小管操作Ceturegel®基質(zhì)膠。成膠后的Ceturegel®基質(zhì)膠可以在4℃ 24-48小時(shí)后重新呈液態(tài)。
注意事項(xiàng)
1. 產(chǎn)品的分裝、使用等操作需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行,與產(chǎn)品接觸的實(shí)驗(yàn)器材(如:槍頭等)使用前需預(yù)冷。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
3. 本產(chǎn)品僅供科研使用,禁止用于人體。
Ver.CN20250410