產(chǎn)品簡介

 

Cebrary® Colorectal Differentiation Medium（Human）結(jié)直腸類器官分化培養(yǎng)基用于人結(jié)直腸類器官的分化培養(yǎng)，可得到成熟的人結(jié)直腸類器官，含有腸上皮所有細胞類型。其中人結(jié)直腸類器官的建立和維持培養(yǎng)需使用結(jié)直腸類器官生長培養(yǎng)基（41444ES）。

 

組分信息

 

組分名稱	41444ES60	41444ES76
Cebrary® Colorectal Differentiation Medium（Human） 結(jié)直腸類器官分化培養(yǎng)基	100 mL	500 mL

 

儲存條件

 

2 ~ 8℃避光儲存，有效期3月。

 

使用說明

 

一、人源結(jié)直腸原代培養(yǎng)

方法參照41443ES步驟。

 

二、人源結(jié)直腸類器官分化誘導(dǎo)

1. 當(dāng)80%的類器官直徑達到100 - 150 μm時，可進行類器官的分化誘導(dǎo)。
2. 取出培養(yǎng)板，沿孔邊緣吸去培養(yǎng)基。每孔加入預(yù)冷的500 μL DPBS，使用移液器吸頭劃膠使基質(zhì)膠從板底脫落，將類器官轉(zhuǎn)移至15 mL離心管。 
3. 補充適量DPBS吹打混勻，使類器官從基質(zhì)膠中洗脫出來。 4℃，300 g，離心 5 min。離心結(jié)束棄上清，保留沉淀。
4. 補充適量DPBS，吸打混勻。4℃，300 g，離心 5 min；離心后棄去上清，保留沉淀。 
5. 使用預(yù)冷的完全培養(yǎng)基將基質(zhì)膠稀釋到70%。 
6. 向離心管中加入適量基質(zhì)膠重懸至20 ± 5類器官/10 μL。 
7. 將預(yù)熱的48孔細胞培養(yǎng)板取出，按照20 μL/孔接種類器官基質(zhì)膠懸液。
8. 37℃、CO₂培養(yǎng)箱中孵育10 - 15 min。 
9. 孵育結(jié)束后每孔加入500 μL人結(jié)直腸類器官分化培養(yǎng)基。 
10. 37℃、5% CO₂培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)，每2 - 3天更換一次新鮮培養(yǎng)基。
11. 7 - 14天后為完全成熟的人結(jié)直腸類器官，多數(shù)為出芽類器官，少數(shù)為未出芽類器官，可用于后續(xù)分析。

 

 

注意事項

 

1. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

3. 產(chǎn)品的分裝、使用等操作需在無菌環(huán)境下進行。

 

 

Ver.CN20250415