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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本產(chǎn)品是2×Mix預(yù)混合試劑,能夠?qū)崿F(xiàn)在單個(gè)反應(yīng)孔中進(jìn)行多達(dá)四重的熒光定量PCR反應(yīng)。本產(chǎn)品含有基因改造的抗體法熱啟動(dòng)Taq酶,極大地提高了擴(kuò)增靈敏度和特異性。同時(shí),本產(chǎn)品對(duì)多重反應(yīng)緩沖體系進(jìn)行了深度優(yōu)化,能夠提高反應(yīng)的擴(kuò)增效率,促進(jìn)低濃度模板的有效擴(kuò)增。本產(chǎn)品可用于基因分型和基因多重定量分析。
產(chǎn)品信息
貨號(hào) |
11211ES03/ 11211ES08 / 11211ES09 / 11211ES20/ 11211ES60/ 11211ES61 |
規(guī)格 |
1 mL/5×1 mL/5 mL /20 mL/100×1 mL/100 mL |
組分信息
組分編號(hào) |
組分名稱 |
11211ES03 |
11211ES08 |
11211ES09 |
11211ES20 |
11211ES60 |
11211ES61 |
11211 |
2× TaqMan qPCR mix |
1 mL |
5×1 mL |
5 mL |
20 mL |
100×1 mL |
100 mL |
儲(chǔ)存條件
-25~-15℃保存,有效期2年。
使用說(shuō)明
組分 |
體積(μL) |
終濃度 |
2×TaqMan qPCR Mix |
12.5 |
1× |
Primer mix (10 μM)** |
X |
0.1 μM-0.5 μM |
Probe mix (10 μM)*** |
X |
50 nM-250 nM |
Rox reference dye**** |
0.5 |
1× |
Template DNA/cDNA***** |
1-10 |
- |
ddH2O |
up to 25****** |
- |
*使用前務(wù)必充分混勻,避免劇烈震蕩產(chǎn)生過(guò)多氣泡。
**引物濃度:Primer Mix中包含多對(duì)引物,通常每條引物終濃度為0.2 μM,也可以根據(jù)情況在0.1-0.5 μM間進(jìn)行調(diào)整;
***探針濃度:Probe Mix中包含多條不同熒光信號(hào)的探針,每條探針的濃度可根據(jù)具體情況在50-250 nM間調(diào)整;
**** Rox reference dye:本產(chǎn)品不含Rox reference dye。如需,推薦使用貨號(hào)10200ES產(chǎn)品;
*****模板稀釋:qPCR靈敏度極高,建議將模板進(jìn)行稀釋使用。若模板為cDNA原液,則模板體積不超過(guò)總體積的1/10;
******反應(yīng)體系:推薦使用25 μL、30 μL或50 μL,以保證目的基因擴(kuò)增的有效性和重復(fù)性;
******* 體系配制:請(qǐng)于超凈工作臺(tái)內(nèi)配制,并使用無(wú)核酸酶殘留的槍頭、反應(yīng)管;推薦使用帶濾芯的槍頭,避免交叉污染和氣溶膠污染;
步驟 |
溫度 |
時(shí)間 |
循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 |
95℃ |
5 min |
1 |
變性 |
95℃ |
|
45 |
退火/延伸 |
60℃ |
30 sec |
*擴(kuò)增反應(yīng):擴(kuò)增反應(yīng)溫度根據(jù)設(shè)計(jì)的引物Tm值進(jìn)行調(diào)整;熒光信號(hào)采集:不同的qPCR儀器所需的熒光信號(hào)采集時(shí)間不同,請(qǐng)根據(jù)最短時(shí)間限制進(jìn)行設(shè)置。
Applied Biosystems: 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™, 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex;
Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;
Stratagene: MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™;
Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR;SLAN:SLAN-96S,SLAN-96P.
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅作科研用途。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20240628