產(chǎn)品說明書
FAQ
COA
已發(fā)表文獻(xiàn)
GW4869是一種具有細(xì)胞滲透性、非競爭性的N-Smase（中性鞘磷脂酶）抑制劑（外泌體抑制劑），IC50值為1 μM。它對N-SMase具有選擇性，在濃度高達(dá)150 μM時對酸性SMase沒有抑制作用。它能阻斷神經(jīng)酰胺介導(dǎo)的多泡體萌芽從而抑制多泡體釋放外泌體，是常用的抑制外泌體生成的藥物。研究發(fā)現(xiàn)，GW4869在體內(nèi)通過阻止外來體分泌減少淀粉樣斑塊形成，在達(dá)到抑制nSMase2引起的生理效應(yīng)的濃度（即有效濃度）下，GW4869具有較少毒性。
產(chǎn)品性質(zhì)
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英文別名 (English Synonym) |
GW 4869, GW 4869 hydrochloride hydrate |
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靶點 (Target) |
neutral sphingomyelinase |
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通路 (Pathway) |
Metabolic Enzyme/Protease--Phospholipase |
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CAS號 (CAS NO.) |
6823-69-4 |
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分子式 (Formula) |
C30H30Cl2N6O2 |
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分子量 (Molecular Weight) |
577.50 |
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外觀 (Appearance) |
粉末 |
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純度 (Purity) |
≥97% |
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溶解性 (Solubility) |
微溶于DMSO：＜0.2 mg/mL（如有必要，需加熱，超聲等輔助溶解） |
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結(jié)構(gòu)式 (Structure) |
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運輸和保存方法
冰袋運輸。粉末直接保存于-20℃，有效期3年。建議分裝后-20℃干燥保存，避免反復(fù)凍融，儲存液-80℃保存，6個月有效；-20℃保存，1個月有效。
注意事項
1. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2. 粉末溶解前請先短暫離心，以保證產(chǎn)品全在管底。
3. 請勿吸入、吞咽或者直接接觸皮膚和眼睛。
4. 本產(chǎn)品僅用于科研用途，禁止用于人身上。
使用濃度
【具體使用濃度請參考相關(guān)文獻(xiàn)，并根據(jù)自身實驗條件（如實驗?zāi)康?，?xì)胞種類，培養(yǎng)特性等）進(jìn)行摸索和優(yōu)化。】
使用方法（數(shù)據(jù)來自于公開發(fā)表的文獻(xiàn)，僅供參考）
（一）細(xì)胞實驗（體外實驗）
先將MCF7細(xì)胞接種在10 mL含有10% FBS的RPMI 1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)，待細(xì)胞數(shù)量在完全培養(yǎng)基中達(dá)到1.7 × 106個/10-cm培養(yǎng)皿時，24 h后將培養(yǎng)基更換為7 mL含2% FBS和25 mM Hepes (pH 7.5) 的RPMI 1640培養(yǎng)基，在培養(yǎng)箱中孵育2 h。同時將GW6849用DMSO配制成1.5 mM儲存液，儲存于-80℃。在使用前，加入5% MSA到GW4869儲存液中進(jìn)行溶解，此時GW4869的濃度為1.43 mM。將懸浮液充分混合，并置于37℃加熱，直至澄清。然后將GW4869抑制劑加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中，工作液濃度范圍：10-20 μM，處理細(xì)胞30分鐘。[2]
GW4869 (10-20 μM)抑制N-SMase，并不顯著地破壞TNF誘導(dǎo)的NF-κB易位入核。通過檢測核濃染、caspase激活、PARP的降解以及臺盼藍(lán)吸收發(fā)現(xiàn)，GW4869能以濃度依賴方式保護(hù)細(xì)胞免于死亡，同時顯著抑制細(xì)胞色素C從線粒體中的釋放以及caspase9的激活，因此N-SMase的激活應(yīng)位于線粒體線粒體功能障礙的上游。[2]
（二）動物實驗（體內(nèi)實驗）
按大約1.25 mg/kg劑量的GW4869試劑，處理完全缺失nSMase2活性的小鼠（遺傳背景：C57BL/6J小鼠），并不改變肝臟、心臟或骨骼肌中神經(jīng)酰胺或鞘磷脂的含量，但減少了腦中神經(jīng)酰胺的含量、增加了鞘磷脂含量。通過GW4869抑制nSMase2可延緩學(xué)習(xí)，在給小鼠使用GW4869后，沒有減少其在反復(fù)訓(xùn)練后找到隱蔽平臺的延遲，說明它們對應(yīng)用空間線索進(jìn)行導(dǎo)航的學(xué)習(xí)障礙。[3]
參考文獻(xiàn)
1.Dinkins MB, et al. Neurobiology of Aging. Exosome reduction in vivo is associated with lower amyloid plaque load in the 5XFAD mouse model of Alzheimer's disease. 2014, 35(8):1792-800.
2.Luberto C, et al. Inhibition of tumor necrosis factor-induced cell death in MCF7 by a novel inhibitor of neutral sphingomyelinase. J Biol Chem. 2002, 277(43):41128-39.
3.Tabatadze N, et al. Inhibition of neutral sphingomyelinase-2 perturbs brain sphingolipid balance and spatial memory in mice. J Neurosci Res. 2010, 88(13):2940-51.
客戶使用本產(chǎn)品發(fā)表的科研文獻(xiàn)（部分）
[1] Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cell-Derived Exosomes Accelerate Diabetic Wound Healing via Ameliorating Oxidative Stress and Promoting Angiogenesis. Front Bioeng Biotechnol. 2022 Jan 31;10:829868. IF: 5.89
HB221122
