產(chǎn)品描述
本試劑盒采用獨特的裂解緩沖液體系,可以快速的裂解多種動物組織樣品并釋放出基因組 DNA,如昆蟲足翅、鼠尾、 鼠趾、動物皮膚和內(nèi)臟等。裂解產(chǎn)物可以用于 DNA 提取純化、也可以直接用于 PCR 反應(yīng)、也可以在 -20℃ 或以下溫度條件下長期保存?zhèn)溆谩?/span>
產(chǎn)品組分
編號 |
組分 |
產(chǎn)品編號/規(guī)格 |
儲存 |
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19698ES50(50 T) |
19698ES70(200 T) |
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19698-A |
Lysis Buffer |
10 mL |
20 mL × 2 |
2-8℃ |
19698-B |
Proteases |
100 μL |
400 μL |
-20℃ |
運輸與保存
冰袋運輸。有效期1年。
操作方法
1. 在離心管中加入 200 μL Lysis Buffer和2 μL Proteases,輕輕渦旋混勻。
2. 取約 10 mg(長度2 mm左右)動物組織,置于上述離心管中,輕輕渦旋混勻。
3. 55℃孵育5-30 min,然后 95℃處理5 min。
4. 12000 rpm 離心2 min。
5. 將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管,-20℃保存或直接用于 PCR 擴增。
【注】
a)Lysis Buffer與 Proteases混合后盡快使用,不宜長期保存;大量樣本操作時,可以將Lysis Buffer與Proteases按100 μL:1 μL的比例混勻備用。
b)組織應(yīng)取少量并盡量剪碎,以便裂解反應(yīng)更順利進行。各組織推薦使用量:鼠尾:長度2-4 mm;鼠趾:1-4個;鼠臟器、腦:直徑2-4 mm;斑馬魚、線蟲、果蠅等昆蟲組織:1-4個;細胞數(shù)量:105-108個。斑馬魚、線蟲、果蠅等較小樣本的組織,可適當(dāng)減少Lysis Buffer至50-100 μL。昆蟲等外殼堅硬的樣本,建議剪碎樣本并增加Proteases至4 μL。
c)55℃孵育,一般5 min 即可滿足多數(shù)PCR需求,如鼠尾、鼠耳等組織;若需要的DNA量較大或樣品較難裂解,可將時間延長至30 min或更久;裂解時間可在5-30 min之間調(diào)整,組織塊不需完全裂解,殘余的部分在后續(xù)離心步驟中可被除去。
注意事項
1. 建議使用新鮮采取的動物組織,若為長期冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致模板的降解,影響PCR效率。
2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服、佩戴口罩、眼罩、一次性手套等采取防護性措施進行實驗操作。
3. 本產(chǎn)品僅作科研用途!
HB211025