本品采用了逆轉(zhuǎn)錄病毒載體,載體裝載了MERS(中東呼吸綜合征冠狀病毒)病毒ORF1 a/b 基因部分序列,ORF4 b 基因部分序列和N基因編碼區(qū)的全部序列。本品在293T細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行假病毒的制備,假病毒為逆轉(zhuǎn)病毒外膜包裹。本品用于MERS病毒核酸檢測試劑能力驗證以及提取試劑盒的性能驗證,也可用于開展MERS病毒核酸檢測實驗室進(jìn)行檢測能力驗證和實驗室內(nèi)質(zhì)量控制等。
產(chǎn)品組分
組分編號 |
組分名稱 |
產(chǎn)品編號/規(guī)格 |
|
11904ES70 |
11904ES74 |
||
11904 |
MERS-pseudovirus |
1×1 mL |
5×1 mL |
【注】
1)靶值(對數(shù)值)≥1×108 copies/mL,具體滴度請參考具體批次COA
2)本品非MERS病毒全序列,使用前請確認(rèn)所選引物探針在本品覆蓋范圍。序列見附錄。
3)凍融會導(dǎo)致假病毒的穩(wěn)定性降低,從而影響核酸抽提的效果及PCR檢測結(jié)果,使用時應(yīng)避免反復(fù)凍融。
4)病毒滅活處理可能會導(dǎo)致 RNA 的降解,請根據(jù)實際實驗需求合理選擇。
5)如果需要對本產(chǎn)品進(jìn)行稀釋處理,可以使用磷酸鹽緩沖液(PBS)或者生理鹽水(0.9% NaCl)進(jìn)行稀釋。
6)本產(chǎn)品區(qū)別于噬菌體假病毒,最大程度模擬了病毒結(jié)構(gòu),本品需要提取RNA后使用。
使用方法
1.假病毒融化:將假病毒從-80° C冰箱中取出,進(jìn)行冰浴融化或置于4℃條件下自然融化,然后開始相關(guān)的實驗操作。
2.假病毒滅活(可選項):在生物安全柜中吸取當(dāng)次實驗所需量的假病毒于EP管中,置于56℃條件下滅活30 min。
3.假病毒核酸提取及QPCR檢測:按照核酸提取試劑盒及QPCR測試劑盒的說明書要求進(jìn)行相關(guān)的實驗操作。
運(yùn)輸與保存方式
干冰運(yùn)輸。-80℃保存,有效期6個月。本品應(yīng)避免反復(fù)凍融,建議分裝保存。
注意事項
1.實驗過程中請使用RNase free耗材。
2.為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
3.如果使用時本品不慎濺到眼睛、皮膚或其他身體部位請立即使用大量清水沖洗。
4.使用本品所產(chǎn)生的實驗廢棄物需要通過高壓滅菌處理后按照醫(yī)療廢棄物處理要求進(jìn)行處理。
5.本產(chǎn)品僅作科研用途!
附錄
1.ORF1 a/b序列
TTCAGTGTGTCTCTATTGCCGTGCGCATATAGAACATCCTGATGTCTCTGGTGTTTGTAAATATAAGGGTAAGTTTGTCCAAATCCCTGCTCAGTGTG
TCCGTGACCCTGTGGGATTTTGTTTGTCAAATACCCCCTGTAATGTCTGTCAATATTGGATTGGATATGGGTGCAATTGTGACTCGCTTAGGCAAGCA
GCACTGCCCCAATCTAAAGATTCCAATTTTTTAAACGAGTCCGGGGTTCTATTGTAAATGCCCGAATAGAACCCTGTTCAAGTGGTTTGTCCACTGA
TGTCGTCTTTAGGGCATTTGACATCTGCAACTATAAGGCTAAGGTTGCTGGTATTGGAAAATACTACAAGACTAATACTTGTAGGTTTGTAGAATTAG
ATGACCAAGGGCATCATTTAGACTCCTATTTTGTCGTTAAGAGGCATACTATGGAGAATTATGAACTAGAGAAGCACTGTTACGACTTGTTACGTGAC
TGTGATGCTGTAGCTCCCCAT
2.N基因
GTATCTTAATTGATTTTAACGAATCTCAATTTCATTGTTATGGCATCCCCTGCTGCACCTCGTGCTGTTTCCTTTGCCGATAACAATGATATAACAAATAC
AAACCTATCTCGAGGTAGAGGACGTAATCCAAAACCACGAGCTGCACCAAATAACACTGTCTCTTGGTACACTGGGCTTACCCAACACGGGAAAGTC
CCTCTTACCTTTCCACCTGGGCAGGGTGTACCTCTTAATGCCAATTCTACCCCTGCGCAAAATGCTGGGTATTGGCGGAGACAGGACAGAAAAATTAA
TACCGGGAATGGAATTAAGCAACTGGCTCCCAGGTGGTACTTCTACTACACTGGAACTGGACCCGAAGCAGCACTCCCATTCCGGGCTGTTAAGGATG
GCATCGTTTGGGTCCATGAAGATGGCGCCACTGATGCTCCTTCAACTTTTGGGACGCGGAACCCTAACAATGATTCAGCTATTGTTACACAATTCGCGC
CCGGTACTAAGCTTCCTAAAAACTTCCACATTGAGGGGACTGGAGGCAATAGTCAATCATCTTCAAGAGCCTCTAGCTTAAGCAGAAACTCTTCCAGA
TCTAGTTCACAAGGTTCAAGATCAGGAAACTCTACCCGCGGCACTTCTCCAGGTCCATCTGGAATCGGAGCAGTAGGAGGTGATCTACTTTACCTTGAT
CTTCTGAACAGACTACAAGCCCTTGAGTCTGGCAAAGTAAAGCAATCGCAGCCAAAAGTAATCACTAAGAAAGATGCTGCTGCTGCTAAAAATAAGAT
GCGCCACAAGCGCACTTCCACCAAAAGTTTCAACATGGTGCAAGCTTTTGGTCTTCGCGGACCAGGAGACCTCCAGGGAAACTTTGGTGATCTTCAAT
TGAATAAACTCGGCACTGAGGACCCACGTTGGCCCCAAATTGCTGAGCTTGCTCCTACAGCCAGTGCTTTTATGGGTATGTCGCAATTTAAACTTACCCA
TCAGAACAATGATGATCATGGCAACCCTGTGTACTTCCTTCGGTACAGTGGAGCCATTAAACTTGACCCAAAGAATCCCAACTACAATAAGTGGTTGGA
GCTTCTTGAGCAAAATATTGATGCCTACAAAACCTTCCCTAAGAAGGAAAAGAAACAAAAGGCACCAAAAGAAGAATCAACAGACCAAATGTCTGAA
CCTCCAAAGGAGCAGCGTGTGCAAGGTAGCATCACTCAGCGCACTCGCACCCGTCCAAGTGTTCAGCCTGGTCCAATGATTGATGTTAACACTGATTAG
TGTCAC
3.ORF4 b序列
ACTCTAGCTTTGCTAAATCTCACTGATGAAGATTTAGCTAGAGATTTTTCACCCATTGCGCTCTTTTTGCGCAATGTCAGATTTGAGCTACATGAGTTCGC
CTTGCTGCGCAAAACTCTTGTTCTTAATGCATCAGAGATCTACTGTGCTAACATACATAGATTTAAGCCTGTGTATAGAGTTAACACGGCAATCCCTACTA
TTAAGGATTGGCTTCTCGTTCAG
HB20200410