產(chǎn)品簡介
Ceturegel® Matrix LDEV-Free基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白的EHS小鼠腫瘤中提取出來的可溶性基底膜制備物,其主要成分由層粘連蛋白,Ⅳ型膠原,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)和巢蛋白等組成,還包含生長因子如TGF-beta、EGF、IGF、FGF、組織纖溶酶原激活物和EHS腫瘤自身含有的其他生長因子。在室溫條件下,聚合形成具有生物學(xué)活性的三維基質(zhì),模擬體內(nèi)細胞基底膜的結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能,有利于體外細胞的培養(yǎng)和分化,可用于對細胞形態(tài)、生化功能、遷移、侵襲和基因表達等的研究。
基質(zhì)膠形成的三維培養(yǎng)基質(zhì),可促進上皮細胞、肝細胞、塞爾托利氏細胞、黑色素瘤細胞、血管內(nèi)皮細胞、甲狀腺細胞及毛囊細胞等的貼壁與分化。Ceturegel®基質(zhì)膠能影響成鼠肝臟細胞和人乳腺上皮細胞三維培養(yǎng)物的基因表達。同時,Ceturegel® 基質(zhì)膠可用作多種腫瘤細胞侵襲研究的基本支架,體內(nèi)外血管新生研究必不可少的基質(zhì),以及體內(nèi)動物模型移植瘤細胞生長的三維支架。Ceturegel®基質(zhì)膠還能支持外周神經(jīng)的新生和牛輸卵管上皮細胞的分化。
YEASEN 基質(zhì)膠為無菌制品,濃度為8~12 mg/mL,滿足多種實驗要求,包括:血管生成研究和腫瘤細胞遷移。
產(chǎn)品信息
貨號 |
40183ES03 / 40183ES08 / 40183ES10 |
規(guī)格 |
1.5 mL / 5 mL / 10 mL |
組分信息
組分名稱 |
40183ES03 |
40183ES08 |
40183ES10 |
Ceturegel® Matrix LDEV-Free基質(zhì)膠 |
1.5 mL |
5 mL |
10 mL |
儲存條件
干冰運輸。-20℃保存,有效期兩年。
使用說明
1. Ceturegel®基底膜/基質(zhì)膠的融化與保存
【注】:Ceturegel®基質(zhì)膠對溫度非常敏感,千萬不可多次重復(fù)凍融。Ceturegel®基質(zhì)膠的分裝以及凝膠前的準備過程中都必須在冰上(4℃)操作,因為溫度稍微提高,都很可能出現(xiàn)成膠現(xiàn)象,從而導(dǎo)致基質(zhì)膠不均勻或者影響后續(xù)的凝膠。用來盛放的試管或者分裝的槍頭都必須進行預(yù)冷。
a)收到產(chǎn)品后,如果暫時不使用,請整瓶直接放到-20℃凍存(不要放在無霜冰箱內(nèi))。
b)第一次使用,將整瓶Ceturegel®基質(zhì)膠放入冰盒內(nèi)再放到4℃過夜,使其充分融解。
2. Ceturegel®基底膜/基質(zhì)膠的使用特別注意
基質(zhì)膠在22 - 35℃能夠快速成膠。為了保證Ceturegel®基質(zhì)膠的成膠性能與穩(wěn)定性,最終稀釋濃度不應(yīng)低于3 mg/mL(Ceturegel®基質(zhì)膠原液的濃度因批次不同有差異)??捎脽o血清培養(yǎng)基來稀釋Ceturegel®基質(zhì)膠,稀釋后需要立即使用。
A. 薄膠制備方法
1)融化后,用預(yù)冷的槍頭混勻Ceturegel®基質(zhì)膠。
2)將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上,按50 μL/cm2生長面積的濃度加入Ceturegel®基質(zhì)膠。
3)在37℃放置30min,此時平板即可使用。
B. 厚膠制備方法
1)融化后,用預(yù)冷的槍頭混勻Ceturegel®基質(zhì)膠。
2)將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上,將培養(yǎng)的細胞與Ceturegel®基質(zhì)膠混合,用遇冷的槍頭使細胞懸浮均勻。按照150 - 200 μL/cm2生長面積的濃度加入Ceturegel®基質(zhì)膠。
3)在37℃放置30min,此時即可加入細胞培養(yǎng)液。細胞也可生長在此厚膠的上層。
C.薄層包被方法
1)融化后,用預(yù)冷的槍頭混勻Ceturegel®基質(zhì)膠。
2)采用無血清培養(yǎng)基稀釋Ceturegel®基質(zhì)膠到需要的濃度。建議根據(jù)具體的實驗做個梯度實驗,從而確定最佳的包被濃度。
3)將稀釋的Ceturegel®基質(zhì)膠加入需要包被的培養(yǎng)器皿中,包被量至少覆蓋細胞的所有生長表面。室溫下孵育1 h。
4)去除未凝固結(jié)合的Ceturegel®基質(zhì)膠,用無血清培養(yǎng)基輕輕地沖洗。此時平板即可使用。
【注】:Ceturegel®基底膜/基質(zhì)膠包被的平板最好當天使用,但也可根據(jù)具體應(yīng)用調(diào)整。包被好的平板加入培養(yǎng)基后,在37℃最久可存放1周。
產(chǎn)品特性
Ceturegel®基質(zhì)膠會有色差變化(淡黃色到深紅色),是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,但是與5% CO2平衡后色差即會減少。凍融后,輕輕搖晃試劑瓶使Ceturegel®基質(zhì)膠分散均勻。所有操作均需在無菌環(huán)境下進行,試劑瓶瓶蓋可用70%乙醇擦拭,并自然干燥。應(yīng)使用預(yù)冷的移液器以保證Ceturegel®基質(zhì)膠呈勻漿狀。
細胞可在0.5 mm厚度的Ceturegel®基質(zhì)層表面生長,也可在1 mm厚度的Ceturegel®基質(zhì)膠三維基質(zhì)內(nèi)生長。過度稀釋的Ceturegel®基質(zhì)膠會形成非膠質(zhì)的蛋白層,可以用于細胞貼壁,但不能用于細胞的分化研究。
【注】:可將融化后的Ceturegel®分裝在多個小管,所有分裝均需用預(yù)冷的凍存管,迅速冷凍并保存,避免多次凍融。
Ceturegel®在22 - 35℃溫度環(huán)境下快速成膠,因此融化時在4℃冰上過夜解凍(4℃時會隨著溫度的上升部分成膠)。所有用品在使用前需置于冰浴,必須使用預(yù)冷的移液管、吸頭及小管操作Ceturegel®基質(zhì)膠。成膠后的Ceturegel®基質(zhì)膠可以在4℃ 24 - 48 h后重新呈液態(tài)。
注意事項
1. 本產(chǎn)品僅作科研用途。
2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
3. 產(chǎn)品的分裝、使用等操作需在無菌環(huán)境下進行,與產(chǎn)品接觸的實驗器材(如:槍頭、產(chǎn)品管等)使用前需預(yù)冷。
Ver.CN20250211
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