MolPure® Mag32 Residual DNA Sample Preparation Kit FA適用于生物制品樣本中殘留DNA檢測(cè)的前處理。采用獨(dú)特的磁珠和精心優(yōu)化的緩沖體系，可最大限度的分離純化樣本中的微量宿主DNA。配合磁珠法自動(dòng)化提取儀器和移液法自動(dòng)化儀器使用，可實(shí)現(xiàn)核酸的高通量提取。

該前處理試劑盒可與本公司的多種宿主細(xì)胞DNA殘留（qPCR法）檢測(cè)試劑盒配合使用，包括CHO宿主細(xì)胞殘留DNA檢測(cè)試劑盒（Cat#41301ES）、HEK293宿主細(xì)胞殘留DNA檢測(cè)試劑盒（Cat#41302ES）、Vero宿主細(xì)胞殘留DNA檢測(cè)試劑盒（Cat#41303ES）和E.coli殘留DNA檢測(cè)試劑盒（Cat#41304ES）。

 

產(chǎn)品組分

類別	組分編號(hào)	組分名稱	產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格
			18462ES32 （2×16 T）	18462ES5 （6 ×16 T）
Part I	18462-A	蛋白酶K（20 mg/mL）	700 μL/支×1	1 mL/支×2
Part Ⅱ	18462-B	96孔預(yù)裝板	1塊×2	1塊×6
	18462-C	8聯(lián)磁棒套	2條/包×2	2條/包×6
	18462-D	裂解液	4 mL	12 mL
Part Ⅲ	18462-E	糖原	300 μL	900 μL
	18462-F	Poly A鉀鹽	200 μL	600 μL

【注】：適用機(jī)型為杭州奧盛Auto-Pure32A自動(dòng)化核酸提取儀及同類型儀器（加熱槽位為1、6、7、12）。

 

運(yùn)輸和保存方法

1. Part I組分冰袋運(yùn)輸，4℃可保存1年，長(zhǎng)期保存于-20℃。

2. Part II組分室溫運(yùn)輸，室溫保存，有效期1年。

3. Part Ⅲ組分干冰運(yùn)輸，-20℃保存1年。

4. 收到貨后，請(qǐng)檢查Part I、Part II和Part Ⅲ共3個(gè)組分是否齊全，并立即放入對(duì)應(yīng)的保存溫度中儲(chǔ)存。

 

注意事項(xiàng)

1. 使用前請(qǐng)?jiān)敿?xì)閱讀使用說(shuō)明書，嚴(yán)格按照使用說(shuō)明書操作，樣本處理建議在超凈臺(tái)或生物安全柜中進(jìn)行。

2. 配合全自動(dòng)核酸提取儀使用前，需對(duì)全自動(dòng)核酸提取儀進(jìn)行紫外消毒。使用完畢后，用75%酒精擦拭提取儀內(nèi)部并進(jìn)行紫外消毒30 min。

3. 注意觀察常溫保存溶液是否有析出或渾濁（尤其冬季室溫為低溫環(huán)境時(shí)），可37℃水浴至溶液澄清，避免影響使用效果。

4. 洗脫時(shí)可能存在磁珠殘留，吸取樣本時(shí)應(yīng)盡量避免吸入磁珠。

5. 處理樣本及加樣時(shí)，勤換槍頭，避免交叉污染。

6. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

7. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

 

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

1. 自備設(shè)備：漩渦振蕩器、水浴鍋或金屬浴、杭州奧盛Auto-Pure32A自動(dòng)化核酸提取儀或其他品牌全自動(dòng)化核酸提取儀。

2. 自備耗材：10μL-1000μL不等的低吸附帶濾芯槍頭、1.5 mL低吸附離心管。

3. 自備試劑：1×PBS緩沖液（pH 7.4，無(wú) Mg 和 Ca 離子）、超純水。

【注】：推薦您購(gòu)買本公司的超純水（Cat#10116ES）。

 

使用方法

配套自動(dòng)化儀器使用，以杭州奧盛Auto-Pure32A自動(dòng)化核酸提取儀為例（如要配套其他主流品牌自動(dòng)化儀器使用，程序可向翌圣生物科技（上海）股份有限公司獲?。?/span>

一、預(yù)封裝試劑準(zhǔn)備

1. 從試劑盒中取出預(yù)裝板，顛倒混勻數(shù)次使磁珠重懸，輕甩孔板，使試劑及磁珠都集中到孔板底部。小心撕去預(yù)裝板封膜，避免振動(dòng)，防止液體濺出。

2. 根據(jù)處理樣本數(shù)量，向預(yù)裝板樣品處理孔（第1、7列）加入9 μL糖原和6 μL Poly A鉀鹽。

二、 樣本處理

1. 待測(cè)樣本為疫苗等本身含有較高的DNA含量的樣本，可用1×PBS（pH7.4，無(wú)Ca和Mg）對(duì)樣本進(jìn)行適當(dāng)比例稀釋后提取（對(duì)樣本進(jìn)行稀釋是為了保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性，使樣本的檢測(cè)值在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍之內(nèi)，通?？煽紤]進(jìn)行100倍稀釋）。

2. 待測(cè)樣本為干粉的，可用超純水將樣本稀釋成10 mg/mL或者100 mg/mL后使用。

3. 待測(cè)樣本為復(fù)雜背景基質(zhì)的，可根據(jù)需要進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，以確定合適的樣本稀釋倍數(shù)。

4. 取100 μL樣本裝于1.5 mL離心管中，加入100 μL裂解液和10 μL蛋白酶K，渦旋混勻10 sec。

【注】：樣本蛋白濃度0-100 mg/mL，蛋白酶K用量為10 μL；樣本蛋白濃度100-200 mg/mL，蛋白酶K用量為20 μL。

5. 60℃孵育20 min，即為預(yù)處理樣本，待用。

三、自動(dòng)化提取

1. 將預(yù)處理樣本加入樣品處理孔（第1、7列）。

2. 按照提取儀的位置，正確安放上述96孔預(yù)裝板，并放置96深孔磁棒套。

3. 運(yùn)行如下程序，程序結(jié)束后，將洗脫板轉(zhuǎn)移至新的離心管中，溶液可置于-20℃短期保存，-80℃長(zhǎng)期保存。

奧盛Auto-Pure32A的提取儀器的提取程序

步驟	孔位	混合時(shí)間(min)	吸磁時(shí)間(sec)	等待時(shí)間(min)	容積(μL)	混合速度(1-10)	溫度(℃)	混合位置(0-100%)	混合幅度(1-100%)	吸磁位置(0-100%)	吸磁速度(1-10)
移磁珠	3	0.2	60	0	500	5	/	0	80	0	1
結(jié)合	1	15	90	0	600	5	/	0	80	0	1
清洗1	2	1	60	0	500	8	/	0	80	0	1
清洗2	3	1	60	4	500	8	/	0	80	0	1
洗脫	6	8	90	0	100	10	65	0	80	0	1
棄磁珠	3	0.2	0	0	500	5	/	0	80	0	1

 

HB220518