YXK26/70層析空柱是為廣大用戶精心設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)室型低壓層析空柱,適合瓊脂糖、葡聚糖基架以及以聚合物為基架的低壓層析介質(zhì),能方便的連接到 AKTA 等層析系統(tǒng)上,該產(chǎn)品由高精度玻璃管和 POM 塑料制成,具有良好的生物相容性和化學(xué)耐受性,適合絕大部分水性溶液。此規(guī)格的空柱常用于凝膠層析介質(zhì)的裝填。
YXK 柱主要由三部分組成:柱頭適配器、玻璃柱管、下柱頭。
柱管:柱管為雙層設(shè)計(jì),內(nèi)管由高精度玻璃制成,外管為聚丙烯酸塑料制成,用于保護(hù)內(nèi)管,同時(shí)形成的夾套層可以通水浴保溫。
柱頭適配器(上柱頭):由軟管、柱頭螺桿、O 型圈、篩網(wǎng)、分布器等組成。
下柱頭:由軟管、O 型圈、下篩網(wǎng)、分布器等組成。
YXK26/70層析空柱具有以下優(yōu)點(diǎn):
1) 使用方便、操作容易;
2) 倒翻口接口設(shè)計(jì)以及高彈性密封圈有效防止?jié)B漏;
3) 柱頭液流分布均勻,容易裝出高柱效的層析柱;
4) 外配有恒溫夾套,方便層析過(guò)程的溫度控制。
產(chǎn)品性質(zhì)
內(nèi)徑 |
26 mm |
高度 |
70 cm |
體積 |
104-134 µm |
柱高 |
52-67 cm |
操作壓力 |
5 bar(最大) |
操作溫度 |
4-60℃ |
PH穩(wěn)定性 |
1~14 |
化學(xué)穩(wěn)定性 |
常見水相溶液 |
網(wǎng)孔尺寸 |
10 µm |
運(yùn)輸和保存方法
室溫運(yùn)輸和保存即可。
注意事項(xiàng)
1. 層析柱外殼使用的是聚丙烯酸材質(zhì),不可以使層析柱外殼接觸濃度大于40%的有機(jī)溶劑,如乙醇、乙腈、丙酮等,也不可以使用高濃度的有機(jī)溶劑如70%乙醇擦拭外殼,否則會(huì)導(dǎo)致其龜裂。
2. 裝柱前確認(rèn)柱塞頭與螺旋桿是否擰緊,若沒(méi)擰緊會(huì)導(dǎo)致漏液。
3. 裝填好的層析柱堵塞嚴(yán)重的時(shí)候可以使用反向清洗的方法,但是反向沖洗需要降低流速至正常流速的一半以下。
4. 使用層析柱時(shí)將保護(hù)軟管置于柱頭內(nèi),防止連接軟管被折影響流速。
5. 柱頭螺旋桿處頂絲需保證隨時(shí)擰緊、到位,若松動(dòng)會(huì)磕壞絲桿,導(dǎo)致無(wú)法擰緊密封圈。
6. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
7. 本產(chǎn)品僅作科研用途!
使用方法
1 下柱頭組裝:
1)先將底部螺旋桿旋進(jìn)調(diào)整旋鈕;
2)再將底部螺旋桿穿過(guò)底部固定器;
3)將O型圈裝入柱塞頭末端;
4)將帶有O型圈的柱塞頭與螺旋桿連接,旋緊;
5)將篩板平整放在柱塞頭上;
6)將分布器扣在柱塞頭上;
7)最后將底部固定器旋進(jìn)柱管底端。
2 上柱頭組裝:
1)將O型圈裝入柱塞頭末端;
2)上柱頭的柱塞頭、上篩板、分布器的安裝參考下柱頭的組裝方法;
3)將組裝好的上柱頭,接入柱管,旋緊柱頭固定器,即完成柱頭組裝。
3 層析柱裝填
1)組裝層析柱(如有需要連接裝柱器)。
2)取下下柱頭用裝柱緩沖液沖洗柱底適配器,排除篩網(wǎng)下面的氣泡,將下柱頭安裝在層析柱底部,旋緊調(diào)整旋鈕,并在層析柱底部保留 1cm 左右高度的液體。
3)用裝柱緩沖液重懸介質(zhì),制成 50%~75%左右的介質(zhì)懸浮液。
4)一次性將介質(zhì)倒入柱管中,避免產(chǎn)生氣泡。
5)如連接有裝柱器,立即往裝柱器中緩慢加入裝柱緩沖液。將適配器或裝柱器上蓋與層析系統(tǒng)相連接。
6)設(shè)定所需流速+ ,打開柱下端,啟動(dòng)泵,進(jìn)行壓柱。
7)柱床穩(wěn)定后保持 30min 以上,關(guān)閉泵和底閥。
8)如連接有裝柱器,移除裝柱器后連接適配器。
9)調(diào)節(jié)適配器,使其固定在膠面上 0.5~1cm 處,并保證適配器入口充滿液體。
10)打開底閥,連接泵,繼續(xù)用設(shè)定的流速(注意壓力不要超過(guò) 0.3Mpa)繼續(xù)壓柱待膠面高度保持不變,標(biāo)記此時(shí)膠面高度。
11)暫停機(jī)器,關(guān)閉底閥,斷開柱頭入口,調(diào)低適配器至膠面下 3~5mm 處。封閉上柱口,裝柱完成。
4 柱效檢測(cè)
1)柱效測(cè)定可以采用丙酮作為指示劑或者NaCl作為指示劑,按照下表配制指示劑溶液和流動(dòng)相。
丙酮法測(cè)柱效 |
NaCl法測(cè)柱效 |
|
樣品 |
1.0%(v/v)丙酮水溶液 |
0.8 M NaCl(溶于水) |
樣品體積 |
1.0%柱體積 |
1.0%柱體積 |
流動(dòng)相 |
水 |
0.4 M NaCl水溶液 |
流速 |
20 cm/h |
20 cm/h |
檢測(cè)器 |
UV 280 nm |
電導(dǎo)率 |
2)計(jì)算柱效: 根據(jù)UV或者電導(dǎo)率曲線計(jì)算理論塔板高度(HETP)、理論塔板數(shù)(N)和非對(duì)稱因子(As), 公式如下:
HETP=L/N ;N=5.54(VR/Wh)2
其中:VR=保留體積;Wh=半高峰寬;L=柱高;N=理論塔板數(shù);VR和Wh的單位應(yīng)一致; As=b/a
其中:a=在10%峰高處的第一個(gè)半峰寬; b=在10%峰高處的第二個(gè)半峰寬
3)結(jié)果評(píng)價(jià)
由以上公式計(jì)算出的HETP的數(shù)值若小于三倍介質(zhì)平均顆粒大小且非對(duì)稱因子在0.7~1.3則判定為合格(對(duì)于Geldex介質(zhì)每米的塔板數(shù)應(yīng)該大于10000)。對(duì)于不理想的柱效需要分析原因并重新裝柱。
HB220526