Dextran G25 M葡聚糖凝膠過濾介質(zhì)是一種具有三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的高分子化合物,它是由葡聚糖加入交聯(lián)劑環(huán)氧氯丙烷通過醚鍵互相交聯(lián)聚合而成。層析時(shí),大于層析介質(zhì)孔徑的大分子,被阻于凝膠相外,沿著層析介質(zhì)顆粒之間的間隙走,下移速度最快,故最先洗脫下來,中等大小的分子進(jìn)入部分層析介質(zhì)孔中,洗脫速度次之,而小分子因?yàn)槟軌蜻M(jìn)入全部層析介質(zhì)孔中,受到阻力最大,故最后被洗脫下來,由此,物質(zhì)得到分離和純化。 Dextran G25 M葡聚糖層析介質(zhì)分離范圍為1000~5000,適用于脫鹽、肽與其它小分子的分離。
產(chǎn)品性質(zhì)
基質(zhì) |
葡聚糖 |
分離范圍 |
1000~5000 |
粒徑(干) |
75-150 µm |
粒徑(濕) |
85-260 µm |
溶脹度 |
4~6 mL/g干粉 |
最大耐壓 |
0.3 MPa |
最大流速 |
150 cm/h |
PH穩(wěn)定性 |
2~13 |
運(yùn)輸和保存方法
1.常溫運(yùn)輸,避免日曬、雨淋、重壓。
2.干粉保存在 4~30℃,干燥、通風(fēng)、清潔處;溶脹后的介質(zhì)保存在 4~8℃,20%乙醇溶液中,避免與氧化劑接觸,不可冷凍。
3.有效期4年。
注意事項(xiàng)
1.樣品必須澄清沒有顆粒。
2.樣品與層析介質(zhì)必須徹底平衡后,才能進(jìn)行柱層析。
3.所裝的柱床必須表面平整,無溝流及氣泡,否則應(yīng)重裝。
4.洗脫過程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速,且勿過快。
5.加樣及整個(gè)洗脫過程中,嚴(yán)防柱面變干。
6.本品應(yīng)避免與氧化劑接觸,避免長時(shí)間暴露在空氣中。
7.為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
8.本產(chǎn)品僅作科研用途!
使用方法
1 預(yù)處理
葡聚糖凝膠過濾層析介質(zhì)一般是干粉狀態(tài),使用前必須在過剩的緩沖溶液中進(jìn)行溶脹(室溫溶脹過夜,或者在沸水中溶脹 1h,避免使用磁力攪拌、藥匙或者玻璃棒攪拌造成填料損壞)。溶脹后,使用緩沖液進(jìn)行調(diào)節(jié),形成濃稠的漿液,75%(體積百分比)左右,再進(jìn)行脫氣。
2 裝柱
裝柱按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。裝柱前,必須保證每種材料都處于工作溫度,緩沖液、填料的溫度須一致(室溫)。
3 平衡
使用 2~5 倍柱床體積的上樣平衡液平衡柱子,務(wù)必使流出液的電導(dǎo)和pH同上樣緩沖液的電導(dǎo)和pH完全一致。
4 上樣
1)介質(zhì)對樣品組分的分離是按組分分子量大小進(jìn)行的,分子量大的先流出來。
2)凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2% 的床體積,視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時(shí)建議上樣量小于10%的柱體積,最大不超過30%的柱床體積,柱高的選擇也與分離要求相關(guān)。
3)樣品中如有雜質(zhì)或沉淀應(yīng)該在上樣前過濾或離心除去,樣品的粘度不能過高,否則影響分離效果。
5 洗脫
可以采用無鹽水,也可以采用用平衡緩沖液做洗脫劑進(jìn)行洗脫。在平衡緩沖液中加入 NaCl等梯度洗脫或者鹽梯度洗脫都可以完全分離。
6 在位清洗
凝膠使用10次后作一次CIP,目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。 方法是以40 cm/h用1 M氫氧化鈉反向洗4 個(gè)柱床體積,再以至少3個(gè)柱床體積平衡緩沖液再生。
HB220524
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