正常粘膜上皮細胞可分泌粘液,分為中性粘液和酸性粘液,在HE染色中兩者無法區(qū)分,常用粘液物質(zhì)染色來區(qū)分;在病理狀態(tài)下,胃、腸、結(jié)締組織、心肌、腎臟等器官,也可以出現(xiàn)粘液變性、粘液水腫、黏蛋白增多的現(xiàn)象,也需要粘液物質(zhì)染色區(qū)分和證明;在一些腫瘤的診斷和研究中也常常需要粘液染色進行觀察和鑒別。
阿利新藍(又稱阿爾辛藍,AB)和過碘酸雪夫(PAS)技術(shù)聯(lián)合使用可鑒別同一組織中的中性黏蛋白和酸性黏蛋白。阿利新藍是顯示酸性粘液物質(zhì)最特異的染料,這種陽離子染料與酸性基團形成鹽鍵,也即阿利新藍與組織內(nèi)含有的陰離子基團如羧基和硫酸根形成不溶性復(fù)合物。分子中帶正電荷的鹽鍵與酸性黏蛋白多糖物質(zhì)中帶負電荷的酸性基團結(jié)合形成不溶性的復(fù)合物而呈藍色,再于PAS進行復(fù)合染色,就能顯示三種不同黏液物質(zhì)成分。
產(chǎn)品組分
組分編號 |
組分名稱 |
產(chǎn)品編號/規(guī)格 |
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6×50 mL |
6×100 mL |
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60534-A |
阿利新蘭染色液 |
50 mL |
100 mL |
60534-B |
過碘酸溶液 |
50 mL |
100 mL |
60534-C |
Schiff Reagent |
50 mL |
100 mL |
60534-D |
Leagene 蘇木素染色液 |
50 mL |
100 mL |
60534-E |
酸性分化液 |
50 mL |
100 mL |
60534-F |
Scott藍化液 |
50 mL |
100 mL |
操作步驟(僅供參考)
1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ 20 min-二甲苯Ⅱ 20 min-無水乙醇Ⅰ 5 min-無水乙醇Ⅱ 5 min-75%酒精5 min,自來水洗。
2、阿利新藍染色:切片入阿利新藍染液中染色5 min,自來水洗2 min;
3、過碘酸染色:切片入高碘酸染液中15 min,自來水洗,蒸餾水洗兩遍;
4、雪弗染色:切片入雪弗染液避光染色30 min,,流水沖洗5 min;
5、蘇木素染色:切片入蘇木素染液染3-5 min,自來水洗,酸性分化液分化,自來水洗,Scott藍化液返藍,流水沖洗3 min。
6、脫水封片:切片依次入無水乙醇I 5 min -無水乙醇II 5 min-無水乙醇Ⅲ 5 min -二甲苯Ⅰ 5 min -二甲苯Ⅱ 5 min透明,中性樹膠封片。
7、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。
8、染色結(jié)果:糖原、中性黏蛋白、各種糖蛋白(紫紅色);酸性黏蛋白(藍色);蛋白多糖和透明質(zhì)酸(藍色)
運輸和保存方法
冰袋運輸,2-8℃保存。有效期1年。
注意事項
1. 在使用過程中要特別注意避免溶液被微生物污染。
2. 過碘酸氧化時間不宜過久,氧化時的溫度以18-22℃為佳。
3. 阿利新藍、過碘酸、Schiff Reagent均應(yīng)置于4℃密閉保存,使用時避免接觸過多陽光和空氣;使用前提前30 min取出恢復(fù)至室溫,避光使用。
4. 酸性分化液應(yīng)經(jīng)常更換新液,分化時間應(yīng)根據(jù)切片厚薄、組織類別、酸性分化液的新舊而定,另外分化后自來水沖洗時間應(yīng)該足夠。
5. 切片在過碘酸溶液和Schiff Reagent中作用時間非常重要,依據(jù)切片厚薄、組織類別等決定。
6. 用Leagene 蘇木素染色液復(fù)染細胞核時應(yīng)淡染,以免影響陽性物質(zhì)AB的觀察,防止胞漿或黏蛋白著色而掩蓋阿利新藍的顏色。
7. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
8. 本產(chǎn)品僅作科研用途!
HB220715