PerfCell Tryzyme™ Express酶是一種非動物來源的重組胰蛋白酶,能裂解賴氨酸和精氨酸C端肽鍵,可直接替代胰蛋白酶,適用于解離各類貼壁哺乳動物細胞,包括 CHO、HEK 293、A529等細胞。產品純度高,其特異性比天然胰蛋白酶制劑更強,對細胞損害低。產品溶于DPBS/ 1mM EDTA中,室溫穩(wěn)定,使用方便。
運輸和保存方法
室溫保存,避光。有效期24個月。
注意事項
1)單用稀釋劑即可使 PerfCell Tryzyme™ Express酶失活,無需使用胰蛋白酶抑制劑(如 FBS)。
2)PerfCell Tryzyme™ Express酶在 2°C至8°C和-20°C至-5°C保存時也很穩(wěn)定,可避光長達24個月。
3)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
4)本產品僅作科研用途!
操作方法
PerfCell Tryzyme™ Express酶被設計為現(xiàn)有方案中胰蛋白酶的直接替代品。
1.使用前預熱PerfCell Tryzyme™ Express酶和完全生長培養(yǎng)基至37°C。盡量減少停留時間。
【注意】:PerfCell Tryzyme™ Express酶可在室溫環(huán)境下用于多種類型的細胞。
2.吸取用過的培養(yǎng)基并丟棄。
3.用5 mL不含鈣和鎂的磷酸緩沖鹽水(DPBS)沖洗單層細胞,吸取和丟棄。
4.向培養(yǎng)瓶中加入適量的PerfCell Tryzyme™ Express酶(如75 cm2培養(yǎng)瓶加入5 mL)。用PerfCell Tryzyme™ Express酶確保單層細胞被完全覆蓋。
5.在37°C孵育直到細胞分離。用倒置顯微鏡觀察細胞單層,以確保細胞完全脫離培養(yǎng)瓶表面。如有必要,輕敲培養(yǎng)瓶以去除細胞。
6.向培養(yǎng)瓶中加入5-10 mL預熱過的完全培養(yǎng)基。向各個方向傾斜培養(yǎng)瓶以徹底沖洗培養(yǎng)瓶。細胞懸浮液加到15 mL離心管中。
7.100 g離心5-10 min。
8.丟棄上清,用2-5 mL預熱過的完全培養(yǎng)基重懸細胞。
HB230801