血小板衍生生長因子(PDGF)是由二硫鍵連接二聚體蛋白組成,其家族共有四種同二聚體蛋白質(zhì)組成,分別為PDGF-AA、PDGF-BB、PDGF-CC和PDGF-DD,以及一種異二聚體,PDGF-AB,主要作用于結(jié)締組織。PDGF-BB可與PDGFR-β結(jié)合,隨后激活幾個(gè)細(xì)胞內(nèi)信號級聯(lián),包括MAPK和PI3K/Akt通路,進(jìn)而激活下游靶mTOR和p70S6K。PDGF-BB在胚胎發(fā)育、細(xì)胞增殖、細(xì)胞遷移、存活和趨化性的調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用。作為一種同源二聚體,也是間充質(zhì)來源細(xì)胞的有效有絲分裂原,是中樞神經(jīng)系統(tǒng)、皮膚、肺、心臟和胎盤中周細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞正常增殖和募集所必需的。PDGF-BB也對正常的血管發(fā)育、腎小球的正常發(fā)育和傷口愈合至關(guān)重要。
翌圣Human PDGF-BB ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中的人血小板衍生生長因子(Human PDGF-BB)。特異性抗人血小板衍生生長因子抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的人血小板衍生生長因子與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入檢測抗體孵育結(jié)合,經(jīng)洗滌,再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中人血小板衍生生長因子的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產(chǎn)品信息
貨號 |
97042ES48 / 97042ES96 |
規(guī)格 |
48 T / 96 T |
檢測范圍 |
15.63-1000 pg/mL |
檢測方法 |
雙抗夾心法 |
檢測時(shí)長 |
4.5小時(shí) |
靈敏度 |
4.8 pg/mL |
稀釋線性 |
79.0 - 121% |
回收率 |
77.0 - 114% |
板內(nèi)差 |
3.8% |
板間差 |
5.0% |
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
濃度(pg/mL) |
顯色值 |
平均值 |
校準(zhǔn)值 |
|
1000 |
3.047 |
2.996 |
3.022 |
3.023 |
500 |
1.782 |
1.779 |
1.780 |
1.773 |
250 |
0.818 |
0.873 |
0.845 |
0.859 |
125 |
0.387 |
0.398 |
0.392 |
0.384 |
62.5 |
0.188 |
0.186 |
0.187 |
0.179 |
31.3 |
0.105 |
0.101 |
0.103 |
0.099 |
15.63 |
0.057 |
0.058 |
0.057 |
0.068 |
0 |
0.019 |
0.019 |
0.019 |
/ |
數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,生成的標(biāo)曲用于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析。
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
人PDGF-BB的最低檢測限為4.8 pg/mL,通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算得出。
酶標(biāo)板內(nèi)精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測定10次,評估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。
酶標(biāo)板間精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測24次,評估酶標(biāo)板間的精密度。
項(xiàng)目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
||||
樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
10 |
10 |
10 |
24 |
24 |
24 |
|
平均值 |
594.4 |
166.8 |
44.3 |
603.3 |
166.6 |
44.7 |
標(biāo)準(zhǔn)差 |
16.3 |
5.2 |
2.5 |
20.1 |
6.6 |
3.5 |
變異系數(shù)(%) |
2.7 |
3.1 |
5.6 |
3.3 |
4.0 |
7.8 |
通過不同水平的PDGF-BB添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:
樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍(%) |
血清 |
89.8 |
76.7-106.8 |
血漿 |
104.1 |
94.6-113.9 |
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
89.7 |
78.2-102.4 |
血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍(%) |
1:02 |
99.5 |
83.8-111.6 |
1:04 |
95.8 |
83.5-108.9 |
1:08 |
98.6 |
84.7-110 |
1:16 |
106.6 |
92.6-121 |
血漿稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍(%) |
1:02 |
115.6 |
115.2-116 |
1:04 |
114.6 |
113.3-115.9 |
1:08 |
105.1 |
102.7-107.6 |
1:16 |
104.3 |
98.2-110.4 |
細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍(%) |
1:02 |
105.5 |
85-116.5 |
1:04 |
99.5 |
82.2-119.5 |
1:08 |
99.0 |
79.1-118 |
1:16 |
103.5 |
86.9-120.0 |
應(yīng)用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。
樣本類型 |
樣本數(shù)目 |
平均值(ng/mL) |
樣本值(ng/mL) |
血清 |
10 |
1554 |
680-2103 |
EDTA血漿 |
6 |
2027 |
682-3586 |
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得15.63 pg/mL
本試劑盒識別天然和重組人PDGF-BB,沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
Recombinant Human: |
Recombinant Mouse: |
|
β-ECGF |
IGF-1 |
GM-CSF |
β-NGF |
IGF-2 |
IFN-γ |
EGF |
PD-ECGF |
PDGF-CC |
FGF acidic |
PDGF-AA |
TNF-α |
FGF basic |
PDGF-CC |
|
FGF-4 |
PDGF Rα |
|
FGF-5 |
SPARC |
|
FGF-6 |
VEGF |
|
HB-EGF |
|
|
Ver. CN20231102