白細(xì)胞介素-10 (IL-10),也稱為細(xì)胞因子合成抑制因子(CSIF),是IL-10α-螺旋細(xì)胞因子家族的創(chuàng)始成員。IL-10由許多活化的造血細(xì)胞類型以及肝星狀細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞和胎盤細(xì)胞滋養(yǎng)層分泌。包含兩個鏈內(nèi)二硫鍵,并被表達(dá)為一種36 kDa非共價相關(guān)的同源二聚體。IL-10參與免疫調(diào)節(jié)包括抑制和刺激作用。
翌圣Rat IL-10 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中的大鼠白細(xì)胞介素10(Rat IL-10)。特異性抗大鼠白細(xì)胞介素10抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的大鼠白細(xì)胞介素10與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入檢測抗體(生物素標(biāo)記)孵育結(jié)合,經(jīng)洗滌,再加入酶結(jié)合物(HRP標(biāo)記鏈霉親和素)孵育結(jié)合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中大鼠白細(xì)胞介素10的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm 主波長,630nm次波長測定吸光度值。
產(chǎn)品信息
貨號 |
98501ES48 / 98501ES96 |
規(guī)格 |
48 T / 96 T |
檢測范圍 |
23.4-1500 pg/mL |
檢測方法 |
雙抗夾心法 |
檢測時長 |
2小時40分鐘 |
靈敏度 |
0.871 pg/mL |
稀釋線性 |
82.8 - 125.1% |
回收率 |
70.7 - 123.0% |
板內(nèi)差 |
8.2% |
板間差 |
4.5% |
數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,生成的標(biāo)曲用于實驗數(shù)據(jù)分析。
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
濃度(pg/mL) |
顯色值 |
平均值 |
校準(zhǔn)值 |
|
1500 |
2.601 |
2.706 |
2.654 |
2.613 |
750 |
1.594 |
1.486 |
1.540 |
1.500 |
375 |
0.859 |
0.772 |
0.816 |
0.775 |
187.5 |
0.514 |
0.412 |
0.463 |
0.423 |
93.8 |
0.266 |
0.218 |
0.242 |
0.202 |
46.9 |
0.161 |
0.124 |
0.142 |
0.102 |
23.4 |
0.104 |
0.084 |
0.094 |
0.054 |
0 |
0.040 |
0.040 |
0.040 |
/ |
大鼠IL-10的最低檢測限為0.871 pg/mL,通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計算得出。
酶標(biāo)板內(nèi)精密度
3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測定20次,評估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。
酶標(biāo)板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測36次,評估酶標(biāo)板間的精密度。
項目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
||||
樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
20 |
20 |
20 |
36 |
36 |
36 |
|
平均值 |
70.9 |
281.3 |
1078.2 |
61.3 |
295.9 |
1178.1 |
標(biāo)準(zhǔn)差 |
6.3 |
24.5 |
74.7 |
0.8 |
20.5 |
62.2 |
變異系數(shù)(%) |
8.8 |
8.7 |
6.9 |
1.3 |
6.9 |
5.3 |
通過不同水平的大鼠IL-10添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:
樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍(%) |
血清 |
91.0 |
81.9-109.6 |
血漿 |
74.6 |
70.7-79.5 |
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
105.2 |
82.3-123.0 |
血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍(%) |
1:02 |
99.4 |
93.3-103.3 |
1:04 |
103.6 |
82.8-113.6 |
1:08 |
112.3 |
97.6-118.3 |
1:16 |
112.7 |
110.6-116.8 |
血漿稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍(%) |
1:02 |
115.0 |
108.9-118.6 |
1:04 |
117.6 |
112.7-124.0 |
1:08 |
121.1 |
117.4-125.1 |
1:16 |
121.9 |
118.5-123.6 |
細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍(%) |
1:02 |
102.9 |
97.9-109.0 |
1:04 |
102.1 |
99.0-105.3 |
1:08 |
105.8 |
103.0-110.0 |
1:16 |
95.8 |
95.2-96.2 |
應(yīng)用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。
樣本類型 |
樣本數(shù)目 |
平均值(ng/mL) |
樣本值(ng/mL) |
血清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
EDTA血漿 |
10 |
n.d. |
n.d. |
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得23.4 pg/mL
本試劑盒識別天然和重組大鼠IL-10,沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
Recombinant Human: |
Recombinant Mouse: |
CINC-1 |
GM-CSF |
GDNF |
IFN-γ |
GM-CSF |
PDGF-CC |
IFN-γ |
TNF-α |
IL-1α |
|
IL-1β |
|
IL-2 |
|
問題 |
造成原因 |
解決方法 |
標(biāo)曲不好 |
移液量不準(zhǔn)確 |
檢查移液器,按時校準(zhǔn),仔細(xì)操作,充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
稀釋方法不恰當(dāng) |
||
顯色值偏低 |
孵育時間太短 |
給予足夠的孵育時間,樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。 |
移液量不足或稀釋不當(dāng) |
校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作 |
|
CV偏高 |
酶標(biāo)板清洗不當(dāng) |
使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機(jī),檢查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 |
準(zhǔn)備新鮮洗液 |
|
靈敏度較低 |
試劑盒儲存不當(dāng) |
按照產(chǎn)品組分表進(jìn)行保存。 |
Ver. CN20231121