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      Rat IL-10 ELISA Kit 大鼠白細(xì)胞介素-10 ELISA檢測試劑盒

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      產(chǎn)品說明書

      FAQ

      COA

      已發(fā)表文獻(xiàn)

       

      白細(xì)胞介素-10 (IL-10),也稱為細(xì)胞因子合成抑制因子(CSIF),是IL-10α-螺旋細(xì)胞因子家族的創(chuàng)始成員。IL-10由許多活化的造血細(xì)胞類型以及肝星狀細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞和胎盤細(xì)胞滋養(yǎng)層分泌。包含兩個鏈內(nèi)二硫鍵,并被表達(dá)為一種36 kDa非共價相關(guān)的同源二聚體。IL-10參與免疫調(diào)節(jié)包括抑制和刺激作用。

      翌圣Rat IL-10 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中的大鼠白細(xì)胞介素10(Rat IL-10)。特異性抗大鼠白細(xì)胞介素10抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的大鼠白細(xì)胞介素10與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入檢測抗體(生物素標(biāo)記)孵育結(jié)合,經(jīng)洗滌,再加入酶結(jié)合物(HRP標(biāo)記鏈霉親和素)孵育結(jié)合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中大鼠白細(xì)胞介素10的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm 主波長,630nm次波長測定吸光度值。

       

      產(chǎn)品信息

      貨號

      98501ES48 / 98501ES96 

      規(guī)格

      48 T / 96 T

      檢測范圍

      23.4-1500 pg/mL

      檢測方法

      雙抗夾心法

      檢測時長

      2小時40分鐘

      靈敏度

      0.871 pg/mL

      稀釋線性

      82.8 - 125.1%

      回收率

      70.7 - 123.0%

      板內(nèi)差

      8.2%

      板間差

      4.5%

       

      實驗數(shù)據(jù)

      1. 標(biāo)曲數(shù)據(jù)

      數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,生成的標(biāo)曲用于實驗數(shù)據(jù)分析。

      標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

       

      濃度(pg/mL)

      顯色值

      平均值

      校準(zhǔn)值

      1500

      2.601

      2.706

      2.654

      2.613

      750

      1.594

      1.486

      1.540

      1.500

      375

      0.859

      0.772

      0.816

      0.775

      187.5

      0.514

      0.412

      0.463

      0.423

      93.8

      0.266

      0.218

      0.242

      0.202

      46.9

      0.161

      0.124

      0.142

      0.102

      23.4

      0.104

      0.084

      0.094

      0.054

      0

      0.040

      0.040

      0.040

      /

      1. 靈敏度檢測

      大鼠IL-10的最低檢測限為0.871 pg/mL,通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計算得出。

      1. 精密度檢測

      酶標(biāo)板內(nèi)精密度

      3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測定20次,評估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。

      酶標(biāo)板間精密度

      3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測36次,評估酶標(biāo)板間的精密度。

      項目

      板內(nèi)精密度

      板間精密度

      樣本

      1

      2

      3

      1

      2

      3

      20

      20

      20

      36

      36

      36

      平均值

      70.9

      281.3

      1078.2

      61.3

      295.9

      1178.1

      標(biāo)準(zhǔn)差

      6.3

      24.5

      74.7

      0.8

      20.5

      62.2

      變異系數(shù)%

      8.8

      8.7

      6.9

      1.3

      6.9

      5.3

      1. 回收率檢測

       通過不同水平的大鼠IL-10添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:

      樣本類型

      平均回收率(%)

      范圍(%)

      血清

      91.0

      81.9-109.6

      血漿

      74.6

      70.7-79.5

      細(xì)胞培養(yǎng)上清

      105.2

      82.3-123.0

      1. 稀釋線性檢測

      血清稀釋比例

      平均期望值(%)

      范圍(%)

      1:02

      99.4

      93.3-103.3

      1:04

      103.6

      82.8-113.6

      1:08

      112.3

      97.6-118.3

      1:16

      112.7

      110.6-116.8

       

      血漿稀釋比例

      平均期望值(%)

      范圍(%)

      1:02

      115.0

      108.9-118.6

      1:04

      117.6

      112.7-124.0

      1:08

      121.1

      117.4-125.1

      1:16

      121.9

      118.5-123.6

       

      細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例

      平均期望值(%)

      范圍(%)

      1:02

      102.9

      97.9-109.0

      1:04

      102.1

      99.0-105.3

      1:08

      105.8

      103.0-110.0

      1:16

      95.8

      95.2-96.2

      1. 樣本值

      應(yīng)用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。

      樣本類型

      樣本數(shù)目

      平均值(ng/mL)

      樣本值(ng/mL)

      血清

      10

      n.d.

      n.d.

      EDTA血漿

      10

      n.d.

      n.d.

      細(xì)胞培養(yǎng)上清

      10

      n.d.

      n.d.

      n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得23.4 pg/mL

      1. 測定特異性

      本試劑盒識別天然和重組大鼠IL-10,沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。

      Recombinant Human:

      Recombinant Mouse:

      CINC-1

      GM-CSF

      GDNF

      IFN-γ

      GM-CSF

      PDGF-CC

      IFN-γ

      TNF-α

      IL-1α

       

      IL-1β

       

      IL-2

       

       

      檢測簡圖

       

      疑問解答

      問題

      造成原因

      解決方法

      標(biāo)曲不好

      移液量不準(zhǔn)確

      檢查移液器,按時校準(zhǔn),仔細(xì)操作,充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。

      稀釋方法不恰當(dāng)

      顯色值偏低

      孵育時間太短

      給予足夠的孵育時間,樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。

      移液量不足或稀釋不當(dāng)

      校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作

      CV偏高

      酶標(biāo)板清洗不當(dāng)

      使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機(jī),檢查所有的端口是否堵塞。

      受污染的洗液

      準(zhǔn)備新鮮洗液

      靈敏度較低

      試劑盒儲存不當(dāng)

      按照產(chǎn)品組分表進(jìn)行保存。

       

      Ver. CN20231121

      400-6111-883