產(chǎn)品描述
傳統(tǒng)方法常使用單價(jià)鹽,乙醇/異丙醇沉淀DNA或RNA,但該方法受其濃度的影響,當(dāng)核酸濃度低于50 ng/mL時(shí),則較難定量,且沉淀后形成的核酸沉淀肉眼難以辨別,影響回收率。而加入線性丙烯酰胺則會改善這些情況,并提高核酸得率。
線性丙烯酰胺,英文名稱Linear Acrylamide(Linear Polyacrylamide,簡稱LPA),是一種共沉淀劑,有助于核酸純化過程中核酸的沉淀。本質(zhì)上講,該丙烯酰胺是一種中性載體,且非生物性來源,因此,不含潛在的核酸或核酸酶污染。此外,本品不會干擾A260/A280讀數(shù)、且不會抑制聚合酶以及限制性內(nèi)切酶活性,因此兼容于其他后續(xù)分子生物學(xué)應(yīng)用,如PCR,酶切消化等。
本品為線性丙烯酰胺溶液,濃度為5 mg/mL,無DNase、RNase以及核酸污染。使用時(shí)2-4 μL(即10-20 μg)溶液即可用于1 mL DNA或RNA溶液的沉淀。
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。4℃保存,有效期3年。
操作步驟
1)添加線性化丙烯酰胺到樣本內(nèi)使其終濃度為10-20 μg/mL,完全混勻;
2)添加一倍體積的異丙醇或者兩倍體積的乙醇至樣本內(nèi)(乙醇推薦用于沉淀寡核苷酸);
3)將樣本至于-20℃冰浴10 min,然后于10,000 g以上的轉(zhuǎn)速至少離心10 min;
4)小心去除上清(需注意,線性化丙烯酰胺沉淀不能緊緊粘附在離心管底,去除上清液的過程中小心操作防止去除沉淀),然后重懸沉淀于水,TE緩沖液或其他合適的緩沖液內(nèi)。
注意事項(xiàng)
1)使用前請回溫至室溫。
2)為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
3)本產(chǎn)品僅作科研用途!
HB210802