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COA
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產品簡介
人血清白蛋白 (Human Serum Albumin)，簡稱HSA，由580個氨基酸殘基單鏈組成，約占血液中總蛋白的60%。它主要由肝臟產生，對維持膠體滲透壓極其重要，還保持了血管室和血管外組織之間的流體平衡。同時作為一種運輸蛋白，攜帶脂肪酸、膽紅素以及各種藥物和激素。血清白蛋白升高常見于濃縮脫水、大量出汗。降低則見于多種疾病，比如肝炎、腎病、營養(yǎng)不良等。
翌圣Human Serum Albumin (HSA) ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿中的人血清白蛋白(Human Serum Albumin)。特異性抗人血清白蛋白抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本，經過孵育，樣本中存在的人血清白蛋白與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質后，加入檢測抗體孵育結合，經洗滌，再加入酶結合物(Streptavidin-HRP)孵育結合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中人血清白蛋白的濃度成正比。加入終止液終止反應，在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產品信息
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貨號 |
97048ES48 / 97048ES96 |
|
規(guī)格 |
48 T / 96 T |
|
檢測范圍 |
3.13-200 ng/mL |
|
檢測方法 |
雙抗夾心法 |
|
檢測物種 |
人 |
|
檢測時長 |
4小時 |
|
靈敏度 |
0.2 ng/mL |
|
稀釋線性 |
81 - 126% |
|
回收率 |
85 - 118% |
|
板內差 |
7.9% |
|
板間差 |
8.3% |
實驗數據
- 標曲數據
數據擬合繪制標準曲線，生成的標曲用于實驗數據分析。
標準曲線圖
|
濃度（ng/mL） |
顯色值 |
平均值 |
校準值 |
|
|
200 |
2.189 |
2.201 |
2.195 |
2.107 |
|
100 |
1.306 |
1.393 |
1.350 |
1.262 |
|
50 |
0.776 |
0.843 |
0.810 |
0.722 |
|
25 |
0.429 |
0.430 |
0.430 |
0.342 |
|
12.5 |
0.273 |
0.257 |
0.265 |
0.177 |
|
6.25 |
0.183 |
0.192 |
0.187 |
0.099 |
|
3.13 |
0.143 |
0.152 |
0.147 |
0.059 |
|
0 |
0.083 |
0.092 |
0.088 |
/ |
- 靈敏度檢測
人血清白蛋白的最低檢測限為0.2 ng/mL，通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
- 精密度檢測
酶標板內精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內重復測定20次，評估酶標板內的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測36次，評估酶標板間的精密度。
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項目 |
板內精密度 |
板間精密度 |
||||
|
樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
20 |
20 |
20 |
36 |
36 |
36 |
|
|
平均值 |
90 |
21.3 |
2.22 |
90.8 |
22.03 |
2.3 |
|
標準差 |
4.6 |
2.3 |
0.2 |
6.37 |
1.8 |
0.22 |
|
變異系數（%） |
5.2 |
10.9 |
7.5 |
7.0 |
8.2 |
9.6 |
- 回收率檢測
通過不同水平的人血清白蛋白添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:
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樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍（%） |
|
血清 |
104.5 |
84.5-117.7 |
|
血漿 |
99.2 |
88.0-110.0 |
|
細胞培養(yǎng)上清 |
100.5 |
91.8-111.0 |
- 稀釋線性檢測
|
血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
97.7 |
87.8-100.4 |
|
1:04 |
96.9 |
82.8-104.4 |
|
1:08 |
99.2 |
82.4-109.2 |
|
1:16 |
104.5 |
83.6-125.7 |
|
血漿稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
100.2 |
82.2-115.2 |
|
1:04 |
93.8 |
83.2-108.6 |
|
1:08 |
90.8 |
80.8-111.2 |
|
1:16 |
100.1 |
82.0-116.9 |
|
細胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
103.8 |
102.3-105.9 |
|
1:04 |
98.0 |
93.7-100.5 |
|
1:08 |
99.8 |
91.8-111.0 |
|
1:16 |
116.0 |
89.1-124. |
應用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
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樣本類型 |
樣本數目 |
平均值（mg/mL） |
樣本值（mg/mL） |
|
血清 |
6 |
22.6 |
9.7-58.2 |
|
血漿 |
6 |
20.7 |
11.1-36.6 |
|
細胞培養(yǎng)上清 |
3 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內得3.13 ng/mL
- 測定特異性
本試劑盒識別天然和重組人血清白蛋白。下述因子進行了特異性的評估，沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。
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Recombinant human: |
Natural proteins: |
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a-Fetoprotein |
Human Pre-Albumin |
|
Parvalbumin |
Bovine Serum Albumin |
|
|
Mouse Serum Albumin |
檢測簡圖
疑問解答
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問題 |
造成原因 |
解決方法 |
|
標曲不好 |
移液量不準確 |
檢查移液器，按時校準，仔細操作，充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
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稀釋方法不恰當 |
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顯色值偏低 |
孵育時間太短 |
給予足夠的孵育時間，樣本和溶解的標準品隔夜后更換。 |
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移液量不足或稀釋不當 |
校準移液器和規(guī)范操作 |
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CV偏高 |
酶標板清洗不當 |
使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機，檢查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
準備新鮮洗液 |
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靈敏度較低 |
試劑盒儲存不當 |
按照產品組分表進行保存。 |
