RNase抑制劑 (RNase inhibitor) 是存在于人的胎盤中一種特異性核糖核酸酶 (RNase) 抑制劑,其特異性失活RNase的原理是:與RNase以非共價鍵結(jié)合形成復合體,造成RNase失活。
本產(chǎn)品是以可溶形式在大腸桿菌中表達純化的重組鼠源RNase抑制劑,能夠廣泛抑制各種類型RNase (RNase A, B, C)。經(jīng)RT-PCR、RT-qPCR檢驗,本產(chǎn)品能與Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase (Cat#11111ES) 及各種DNA Polymerase兼容。與人源RNase inhibitor相比,本產(chǎn)品不含人源蛋白中的兩個對氧化非常敏感的半胱氨酸,因而具有更高的抗氧化活性。同時,更加適合于對高DTT敏感性實驗,如qPCR等。
與Murine RNase Inhibitor (300 U/µL) (Cat#14671ES) 相比,UCF.ME® Murine RNase Inhibitor (300 U/µL)的宿主殘留更低,適合對背景菌要求更為嚴格的應用場景,如病原微生物檢測等。
產(chǎn)品組分
編號 |
組分名稱 |
產(chǎn)品編號/規(guī)格 |
||
14674ES03 (1 mL) |
14674ES50 (50 mL) |
14674ES76 (500 mL) |
||
14674 |
UCF.ME® Murine RNase Inhibitor (300 U/µL) |
1 mL |
50 mL |
500 mL |
單位定義
抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定義為1 U。RNase A活性通過水解Cyclic 2’,3’-CMP生成3’-CMP定量求得。
運輸與保存方法
干冰運輸。-25~-15℃保存,有效期1年。
注意事項
1. 本品抑制 RNase活性的pH值范圍較廣,在pH 7-8時表現(xiàn)最大活性。
2. 避免起泡或劇烈攪拌、渦旋等操作,以防止本品失活。
3. 本品不抑制RNase H活性。
4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
應用實例(逆轉(zhuǎn)錄實驗)
1. 在RNase free離心管中配制如下混合液:
組分 |
體積 (μL) |
RNase-free ddH2O |
to 20 |
5×Hifair® Ⅲ Buffer |
4 |
Oligo(dT)18 (50 μM) |
1 |
dNTP Mix (10 mM each) |
1 |
UCF.ME® Murine RNase Inhibitor (300 U/µL) |
0.15 |
Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase (200 U/μL) |
1 |
模板RNA |
Total RNA:1 ng-5 μg |
2. 輕輕混勻;
3. 42℃ 45 min,85℃ 5 min;
4. 產(chǎn)物于-25~-15℃保存。
HB23022
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