產(chǎn)品說明書
FAQ
COA
已發(fā)表文獻(xiàn)
人干擾素γ (Human IFN-γ)是可溶性二聚體細(xì)胞因子，是II型干擾素的唯一成員。它主要由自然殺傷細(xì)胞(NK)和自然殺傷T細(xì)胞(NKT)分泌，發(fā)揮免疫作用。干擾素-γ對抵抗病毒、某些細(xì)菌和原生動物感染的固有免疫和適應(yīng)性免疫具有重要作用。干擾素-γ 是巨噬細(xì)胞重要的激活劑，也是II型主要組織相容性復(fù)合物(MHC II)表達(dá)的誘導(dǎo)劑。IFN-γ的異常表達(dá)和很多自身炎癥和自身免疫疾病相關(guān)。除了直接抑制病毒復(fù)制，IFN-γ對免疫系統(tǒng)的重要性更體現(xiàn)在其免疫刺激和免疫調(diào)控功能。IFN-γ可以有效抑制細(xì)胞增殖，當(dāng)人體內(nèi)出現(xiàn)異常細(xì)胞繁殖速度過快，機(jī)體產(chǎn)生干擾素γ來抑制分裂異常的細(xì)胞生長，臨床中常用來治療原發(fā)性血小板增多癥、慢性粒細(xì)胞白血病、真性紅細(xì)胞增多癥、原發(fā)性骨髓纖維化等不良疾病。
翌圣Human IFN-γ ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿中的人干擾素γ(Human IFN-γ)。特異性抗人干擾素γ抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本，經(jīng)過孵育，樣本中存在的人干擾素γ與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測抗體孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中人干擾素γ的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產(chǎn)品信息
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貨號 |
97024ES48 / 97024ES96 |
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規(guī)格 |
48 T / 96 T |
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檢測范圍 |
15.63-1000 pg/mL |
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檢測方法 |
雙抗夾心法 |
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檢測物種 |
人 |
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檢測時(shí)長 |
4.5小時(shí) |
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靈敏度 |
9.64 pg/mL |
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稀釋線性 |
84 - 115% |
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回收率 |
86 - 126% |
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板內(nèi)差 |
4.2% |
|
板間差 |
7.3% |
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
- 標(biāo)曲數(shù)據(jù)
數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，生成的標(biāo)曲用于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析。
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
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濃度（pg/mL） |
顯色值 |
平均值 |
校準(zhǔn)值 |
|
|
1000 |
2.715 |
2.784 |
2.749 |
2.751 |
|
500 |
1.649 |
1.675 |
1.662 |
1.651 |
|
250 |
0.860 |
0.844 |
0.852 |
0.871 |
|
125 |
0.443 |
0.439 |
0.441 |
0.441 |
|
62.5 |
0.285 |
0.238 |
0.262 |
0.236 |
|
31.25 |
0.142 |
0.144 |
0.143 |
0.145 |
|
15.63 |
0.088 |
0.095 |
0.092 |
0.106 |
|
0 |
0.042 |
0.046 |
0.044 |
/ |
- 靈敏度檢測
IFN-γ的最低檢測限為9.64 pg/mL，通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算得出。
- 精密度檢測
酶標(biāo)板內(nèi)精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測定10次，評估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。
酶標(biāo)板間精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測30次，評估酶標(biāo)板間的精密度。
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項(xiàng)目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
||||
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樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
10 |
10 |
10 |
30 |
30 |
30 |
|
|
平均值 |
434.9 |
99.4 |
23.0 |
440.6 |
100.6 |
22.6 |
|
標(biāo)準(zhǔn)差 |
18.1 |
4.1 |
1.0 |
28.9 |
5.3 |
2.3 |
|
變異系數(shù)（%） |
4.2% |
4.1% |
4.3% |
6.5% |
5.3% |
10.3% |
- 回收率檢測
通過不同水平的IFN-γ添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:
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樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍（%） |
|
血清 |
114.6 |
98.3-126.2 |
|
血漿 |
101.6 |
94.8-119.5 |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
99.5 |
94.9-104.3 |
- 稀釋線性檢測
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血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
98.1% |
86.4-104.2 |
|
1:04 |
100.0% |
89.3-103.6 |
|
1:08 |
107.2% |
102.4-115.7 |
|
1:16 |
97.7% |
86.4-104.5 |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
103.8% |
101.4-106.1 |
|
1:04 |
107.8% |
100.5-113.2 |
|
1:08 |
104.6% |
100.3-108.2 |
|
1:16 |
99.1% |
95.9-103 |
- 樣本值
應(yīng)用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
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樣本類型 |
樣本數(shù)目 |
平均值（pg/mL） |
樣本值（pg/mL） |
|
血清 |
10 |
3.5 |
n.d.-34.8 |
|
血漿 |
8 |
n.d. |
n.d. |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得15.63 pg/mL
- 測定特異性
本試劑盒識別天然和重組人干擾素γ。下述因子進(jìn)行了特異性的評估，沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
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Recombinant protein: |
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Human IFN-α |
Mouse IFN-γ |
Rat IFN-γ |
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Human IFN-β |
Mouse IFN-α |
Bovine IFN-γ |
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Human IL-6 |
Mouse IFN-β |
Canine IFN-γ |
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Human TNF-α |
Equine IFN-γ |
Porcine IFN-γ |
檢測簡圖
疑問解答
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問題 |
造成原因 |
解決方法 |
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標(biāo)曲不好 |
移液量不準(zhǔn)確 |
檢查移液器，按時(shí)校準(zhǔn)，仔細(xì)操作，充分混勻時(shí)蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
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稀釋方法不恰當(dāng) |
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顯色值偏低 |
孵育時(shí)間太短 |
給予足夠的孵育時(shí)間，樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。 |
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移液量不足或稀釋不當(dāng) |
校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作 |
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CV偏高 |
酶標(biāo)板清洗不當(dāng) |
使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機(jī)，檢查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
準(zhǔn)備新鮮洗液 |
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靈敏度較低 |
試劑盒儲存不當(dāng) |
按照產(chǎn)品組分表進(jìn)行保存。 |
Ver. CN20231016
