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      Human GDF-15 ELISA Kit 人生長分化因子-15 ELISA檢測試劑盒

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      產(chǎn)品說明書

      FAQ

      COA

      已發(fā)表文獻

       

      人生長分化因子-15(GDF-15)又稱巨噬細胞抑制性細胞因子-1(Mic-1),是轉(zhuǎn)化生長因子β (TGF-β) 超家族的趨異成員。GDF-15的前體蛋白由308個氨基酸殘基組成,經(jīng)過酶切修飾后形成一個含有7個半胱氨酸殘基的C端結構域。在人體中,GDF-15在胎盤中高表達,腎臟、胰腺和前列腺中表達水平較低。白細胞介素-1和轉(zhuǎn)化生長因子-β等細胞因子可迅速誘導其表達。GDF-15具有多種生物學功能。GDF-15在腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移中也起著重要的作用,如結直腸癌、乳腺癌和前列腺癌,GDF-15的表達均有顯著增加。在腫瘤進展期間,GDF-15在細胞凋亡、分化、血管生成和轉(zhuǎn)移均有影響,并在成癌癥期間體重減輕方面有所影響。

      翌圣Human GDF-15 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、血漿中的人生長分化因子15(Human GDF-15)。特異性抗人生長分化因子15抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的人生長分化因子15與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質(zhì)后,加入檢測抗體孵育結合,經(jīng)洗滌,再加入酶結合物(Streptavidin-HRP)孵育結合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中人生長分化因子15的濃度成正比。加入終止液終止反應,在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。

       

      產(chǎn)品信息

      貨號

      97021ES48 / 97021ES96 

      規(guī)格

      48 T / 96 T

      檢測范圍

      7.81-500 pg/mL

      檢測方法

      雙抗夾心法

      檢測物種

      檢測時長

      5小時

      靈敏度

      0.205 pg/mL

      稀釋線性

      85.7 - 105.0 %

      回收率

      80.9 - 98.9%

      板內(nèi)差

      4.3%

      板間差

      4.4%

       

      實驗數(shù)據(jù)

      1. 標曲數(shù)據(jù)

      數(shù)據(jù)擬合繪制標準曲線,生成的標曲用于實驗數(shù)據(jù)分析
      標準曲線

      1. 靈敏度檢測

      人生長分化因子15的最低檢測限為0.205 pg/mL,通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。

      1. 精密度檢測

      酶標板內(nèi)精密度

      3個已知濃度的樣本酶標板內(nèi)重復測定20次,評估酶標板內(nèi)的精密度。

      酶標板間精密度

      3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測36次,評估酶標板間的精密度。

      項目

      板內(nèi)精密度

      板間精密度

      樣本

      1

      2

      3

      1

      2

      3

      20

      20

      20

      36

      36

      36

      平均值

      15.0

      59.4

      243.0

      14.7

      59.7

      246.2

      標準差

      0.72

      1.86

      12.18

      0.80

      2.01

      10.84

      變異系數(shù)%

      4.8

      3.1

      5.0

      5.4

      3.4

      4.4

      1. 回收率檢測

        通過不同水平的人生長分化因子15添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:

      樣本類型

      平均回收率(%)

      范圍(%)

      血清樣本

      92.1

      80.9-98.9

      血漿樣本

      91.4

      81.5-98.6

      1. 稀釋線性檢測

      血清稀釋比例

      平均期望值(%)

      范圍(%)

      1:02

      101.5

      99.8-103.8

      1:04

      101.4

      99.9-102.4

      1:08

      93.3

      90.3-95.3

      1:16

      88.7

      87.2-90.6

       

      血漿稀釋比例

      平均期望值(%)

      范圍(%)

      1:02

      100.2

      96.5-105.0

      1:04

      97.0

      94.0-100.0

      1:08

      91.1

      86.7-95.5

      1:16

      88.4

      85.7-90.5

      1. 樣本值

      應用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。

      樣本類型

      樣本數(shù)目

      平均值(pg/mL)

      樣本值(pg/mL)

      血清樣本

      10

      959.5

      260-3114.6

      肝素血漿

      10

      470.7

      145.1-1275.8

      EDTA血漿

      10

      1550.7

      197.8-6836.5

      枸櫞酸鈉血漿

      10

      1948.5

      247.7-9605.4

      1. 測定特異性

      本試劑盒識別天然和重組人生長分化因子15。下述因子進行了特異性的評估,沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。

      Recombinant human:

      Recombinant mouse:

      GDF-5

      GDF-5

      GDF-7

      GDF-6

      GDF-9

      GDF-7

      GDF-11

      GDF-8

      TGF-β RII/Fc

       

      TFG-β2

       

       

      檢測簡圖

       

      疑問解答

      問題

      造成原因

      解決方法

      標曲不好

      移液量不準確

      檢查移液器,按時校準,仔細操作,充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。

      稀釋方法不恰當

      顯色值偏低

      孵育時間太短

      給予足夠的孵育時間,樣本和溶解的標準品隔夜后更換。

      移液量不足或稀釋不當

      校準移液器和規(guī)范操作

      CV偏高

      酶標板清洗不當

      使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機,檢查所有的端口是否堵塞。

      受污染的洗液

      準備新鮮洗液

      靈敏度較低

      試劑盒儲存不當

      按照產(chǎn)品組分表進行保存。

       

      400-6111-883