人白介素8(Human IL-8),又稱為趨化因子CXCL8,是巨噬細胞和上皮細胞等分泌的細胞因子。白介素-8結(jié)合趨化因子受體白介素-8受體α(IL8RA,又叫CXCR1)和白介素-8受體β(IL8RB,又叫CXCR2)而對中性粒細胞有細胞趨化作用而實現(xiàn)其對炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)。 白介素-8還有很強的促血管生成作用。白介素-8在小支氣管炎和囊性纖維化的發(fā)病中起重要作用。
它是一種屬于趨化因子家族的細胞因子,近年來人們在研究中發(fā)現(xiàn)IL-8幾乎參與哺乳動物的整個生殖過程如排卵、黃體形成、子宮內(nèi)膜增殖、蛻膜化、胚胎著床及其生長發(fā)育等過程,許多臨床研究表明,IL-8還與某些生殖病理過程有關(guān),如子宮內(nèi)膜異位癥,不明原因的自然流產(chǎn)等。IL-8通過何種機制參與和調(diào)節(jié)人類生殖生理和病理過程備受國內(nèi)外研究者們的關(guān)注,較為肯定的一種觀點就是IL-8通過與其特異性的受體結(jié)合,引發(fā)一系列生物學事件,從而發(fā)揮作用。
翌圣Human IL-8 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、細胞培養(yǎng)上清中的人白介素8(Human IL-8)。特異性抗人白介素8抗體預(yù)包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的人白介素8與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入檢測抗體孵育結(jié)合,經(jīng)洗滌,再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中人白介素8的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產(chǎn)品信息
貨號 |
97035ES48 / 97035ES96 |
規(guī)格 |
48 T / 96 T |
檢測范圍 |
7.81-500 pg/mL |
檢測方法 |
雙抗夾心法 |
檢測物種 |
人 |
檢測時長 |
5小時 |
靈敏度 |
0.382 pg/mL |
稀釋線性 |
83.1 - 109.8 % |
回收率 |
73.7 - 112.4% |
板內(nèi)差 |
8.4% |
板間差 |
7.0% |
實驗數(shù)據(jù)
數(shù)據(jù)擬合繪制標準曲線,生成的標曲用于實驗數(shù)據(jù)分析。
標準曲線圖
濃度(pg/mL) |
顯色值 |
平均值 |
校準值 |
|
500 |
2.799 |
2.618 |
2.708 |
2.690 |
250 |
1.917 |
1.983 |
1.950 |
1.931 |
125 |
1.370 |
1.233 |
1.302 |
1.283 |
62.5 |
0.811 |
0.757 |
0.784 |
0.766 |
31.25 |
0.442 |
0.436 |
0.439 |
0.421 |
15.625 |
0.252 |
0.234 |
0.243 |
0.225 |
7.81 |
0.134 |
0.131 |
0.133 |
0.114 |
0 |
0.021 |
0.016 |
0.019 |
/ |
人白介素8的最低檢測限為0.382 pg/mL,通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
酶標板內(nèi)精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內(nèi)重復(fù)測定20次,評估酶標板內(nèi)的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復(fù)檢測30次,評估酶標板間的精密度。
項目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
||||
樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
20 |
20 |
20 |
30 |
30 |
30 |
|
平均值 |
14.0 |
73.6 |
251.6 |
13.5 |
71.0 |
249.4 |
標準差 |
1.25 |
5.49 |
22.26 |
0.87 |
5.01 |
18.69 |
變異系數(shù)(%) |
8.9 |
7.5 |
8.8 |
6.5 |
7.1 |
7.5 |
通過不同水平的人白介素8添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:
樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍(%) |
血清 |
90.0 |
73.7-111.6 |
細胞培養(yǎng)上清 |
90.9 |
81.6-112.4 |
血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍(%) |
1:02 |
90.1 |
83.5-99.7 |
1:04 |
88.3 |
87.0-89.0 |
1:08 |
91.6 |
83.7-98.2 |
1:16 |
89.2 |
83.1-95.2 |
細胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍(%) |
1:02 |
99.5 |
90.6-106.6 |
1:04 |
99.1 |
90.7-109.8 |
1:08 |
98.1 |
92.2-106.1 |
1:16 |
99.9 |
95.1-108.5 |
應(yīng)用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。
樣本類型 |
樣本數(shù)目 |
平均值(pg/mL) |
樣本值(pg/mL) |
血清樣本 |
10 |
148.1 |
24.0-280.0 |
細胞上清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)的7.81 pg/mL。
本試劑盒識別天然和重組人白介素8。下述因子進行了特異性的評估,沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
Recombinant human: |
Recombinant mouse: |
Recombinant amphibian: |
Natural proteins: |
||
IL-1α |
IL-6 R |
TGF-α |
IL-1α |
TGF-β5 |
bovine FGF acidic |
IL-1β |
IL-7 |
TGF-β1 |
IL-3 |
|
bovine FGF basic |
IL-1ra |
IL-9 |
TGF-β3 |
IL-4 |
|
human PDGF |
IL-2 |
IL-10 |
TGF-β RII |
IL-5 |
|
porcine PDGF |
IL-3 |
IL-11 |
TNF-α |
IL-6 |
|
human TGF-β1 |
IL-4 R |
IL-12 |
TNF-β |
IL-9 |
|
porcine TGF-β1 |
IL-5 |
IL-13 |
TNF RI |
IL-10 |
|
porcine TGF-β2 |
IL-5 Rβ |
IP-10 |
TNF RII |
IL-13 |
|
|
IL-6 |
SCF |
VEGF |
TNF-α |
|
|
問題 |
造成原因 |
解決方法 |
標曲不好 |
移液量不準確 |
檢查移液器,按時校準,仔細操作,充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
稀釋方法不恰當 |
||
顯色值偏低 |
孵育時間太短 |
給予足夠的孵育時間,樣本和溶解的標準品隔夜后更換。 |
移液量不足或稀釋不當 |
校準移液器和規(guī)范操作 |
|
CV偏高 |
酶標板清洗不當 |
使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機,檢查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 |
準備新鮮洗液 |
|
靈敏度較低 |
試劑盒儲存不當 |
按照產(chǎn)品組分表進行保存。 |
Ver. CN20231116