Endotoxin Removal Agarose Resin,High Performance 內(nèi)毒素高效去除純化樹(shù)脂
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產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
FAQ
COA
已發(fā)表文獻(xiàn)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Endotoxin Removal Agarose Resin是一種用于去除生物源蛋白類產(chǎn)品(包括蛋白、多肽、抗體、多糖等)中內(nèi)毒素的樹(shù)脂。其原理是將修飾過(guò)的多粘菌素B連接至4%瓊脂糖微球上，進(jìn)行特異性去除內(nèi)毒素，經(jīng)純化可將樣品中內(nèi)毒素降低至0.1 EU/mL，且樣品回收率高。
翌圣為您提供蛋白純化實(shí)驗(yàn)整體解決方案，相關(guān)產(chǎn)品選購(gòu)請(qǐng)參考：蛋白純化系列產(chǎn)品-選購(gòu)指南
產(chǎn)品信息
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貨號(hào) |
20518ES10/ 20518ES60/20518ES76 |
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規(guī)格 |
10 mL /100 mL / 500 mL |
產(chǎn)品性質(zhì)
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基質(zhì)（Matrix） |
4%瓊脂糖微球 |
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配體（Ligand） |
修飾過(guò)的多粘菌素B |
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粒徑（Bead size） |
45-165 µm |
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載量（Capacity） |
＞2000000 EU/mL基質(zhì) |
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最大壓力（PressureMax） |
0.1 MPa, 1bar |
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pH穩(wěn)定范圍（pH range） |
5-10 |
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儲(chǔ)存緩沖液（Buffer） |
20%乙醇 |
儲(chǔ)存條件
2~8℃保存，有效期2年。
需準(zhǔn)備試劑
所用水和Buffer以及耗材均需無(wú)熱原處理，防止在使用過(guò)程中引入內(nèi)毒素。
平衡液：20 mM 磷酸鹽，150 mM NaCl，pH7.4。
再生液：1% Triton X-114的平衡液
【注】平衡液和洗脫液可根據(jù)樣品性質(zhì)進(jìn)行改變，建議pH7-8, NaCl約150 mM-500 mM。
使用說(shuō)明
【注】a 樣品在上樣前最好用0.22 µm或0.45 µm濾膜過(guò)濾，減少雜質(zhì)以防阻塞柱子；
b 內(nèi)毒素結(jié)合柱子的最佳pH為6-9，因此樣品pH最好控制在7-8；
c 樣品最好控制在適當(dāng)?shù)碾x子強(qiáng)度，減少非特異吸附，NaCl約150 mM-500 mM。
樣品純化（以1 mL樹(shù)脂為例）
1）裝柱：充分混勻Endotoxin Removal Agarose Resin，用無(wú)熱原槍頭吸取適量漿液加入合適的層析柱中，注意避免產(chǎn)生氣泡，打開(kāi)下出口去掉保護(hù)液，用3 mL再生液進(jìn)行清洗，控制流速在0.25 mL/min，或＜10滴/min，溫度控制在2~8℃，重復(fù)至少2次，確保柱中無(wú)內(nèi)毒素。
2）平衡：用3 mL的平衡液平衡柱管內(nèi)壁及樹(shù)脂，流干，流速約0.5 mL/min，溫度控制在2~8℃，重復(fù)至少兩次。
3）過(guò)柱及檢測(cè)：將樣品加到平衡好的樹(shù)脂中，調(diào)節(jié)流速在0.25 mL/min，或＜10滴/min，當(dāng)流出液流出約1 mL 時(shí)，開(kāi)始收集流出液，流干后加入1 mL平衡液繼續(xù)收集。檢測(cè)樣品中內(nèi)毒素含量及樣品回收率。
【注】如果樣品中內(nèi)毒素含量仍高于目標(biāo)值，繼續(xù)重復(fù)1-3。
注意事項(xiàng)
1.本品可耐受試劑：20%DMSO,20%乙醇,20%甘油；1 M尿素,300 mM咪唑；0.05% Tween 20,10 mM DTT等。
2.本產(chǎn)品僅作科研用途。
3.為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
附表 問(wèn)題及解決方案
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問(wèn)題 |
原因分析 |
推薦解決方案 |
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內(nèi)毒素去除效率低 |
樣品pH值不在內(nèi)毒素結(jié)合范圍內(nèi) |
用0.1 M NaOH或0.1 M HCl調(diào)節(jié)至pH7-8 |
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樣品與樹(shù)脂接觸時(shí)間短 |
減少流速，增加樣品接觸時(shí)間 |
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去除或檢測(cè)系統(tǒng)被內(nèi)毒素污染 |
所有試驗(yàn)用品均需無(wú)熱源產(chǎn)品 |
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內(nèi)毒素與目的蛋白結(jié)合較強(qiáng) |
優(yōu)化樣品pH，使樣品與內(nèi)毒素分離 增加接觸時(shí)間 |
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樣品被污染 |
樹(shù)脂純化過(guò)其他樣品 |
不用使用過(guò)的樹(shù)脂去除不同樣品內(nèi)毒素 |
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樣品回收率低 |
樣品非特異性吸附在樹(shù)脂上 |
增加樣品和平衡液的NaCl濃度 |
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目的蛋白與內(nèi)毒素結(jié)合一起被去除 |
優(yōu)化樣品pH，使樣品與內(nèi)毒素分離 |
Ver.CN20230719
