IP-10最初被鑒定為單核細胞、成纖維細胞和內(nèi)皮細胞中的IFN-γ誘導(dǎo)基因。人IP-10的小鼠同系物,CRG-2,與人IP-10有大約67%的氨基酸序列同一性。IP-10的氨基酸序列確定該蛋白是CXC趨化因子亞家族的成員。
翌圣Human CXCL10 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、血漿和細胞培養(yǎng)上清中的人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(Human CXCL10)。特異性抗干擾素誘導(dǎo)蛋白10抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的干擾素誘導(dǎo)蛋白10與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入檢測抗體(生物素標(biāo)記)孵育結(jié)合,經(jīng)洗滌,再加入酶結(jié)合物(HRP標(biāo)記鏈霉親和素)孵育結(jié)合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中干擾素誘導(dǎo)蛋白10的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm 主波長,630nm次波長測定吸光度值。
產(chǎn)品信息
貨號 |
97013ES48 / 97013ES96 |
規(guī)格 |
48 T / 96 T |
檢測范圍 |
15.6-1000 pg/mL |
檢測方法 |
雙抗夾心法 |
檢測物種 |
人 |
檢測時長 |
4小時45分鐘 |
靈敏度 |
4.460 pg/mL |
稀釋線性 |
72.2 - 119.4% |
回收率 |
73.3 - 129.6% |
板內(nèi)差 |
9.2% |
板間差 |
6.5% |
實驗數(shù)據(jù)
數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,生成的標(biāo)曲用于實驗數(shù)據(jù)分析。
人干擾素誘導(dǎo)蛋白10的最低檢測限為4.460 pg/mL,通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計算得出。
酶標(biāo)板內(nèi)精密度
3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測定20次,評估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。
酶標(biāo)板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測36次,評估酶標(biāo)板間的精密度。
項目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
||||
樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
20 |
20 |
20 |
36 |
36 |
36 |
|
平均值 |
553.0 |
137.2 |
37.4 |
630.1 |
142.2 |
37.6 |
標(biāo)準(zhǔn)差 |
46.9 |
12.4 |
3.8 |
55.3 |
7.3 |
1.8 |
變異系數(shù)(%) |
8.5 |
9.0 |
10.0 |
9.7 |
5.2 |
4.7 |
通過不同水平的人干擾素誘導(dǎo)蛋白10添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:
樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍(%) |
血清 |
107.7 |
94.5-125.3 |
血漿 |
105.1 |
75.6-129.6 |
細胞培養(yǎng)上清 |
97.6 |
73.3-121.3 |
血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍(%) |
1:02 |
108.4 |
94.0-111.9 |
1:04 |
98.6 |
88.3-112.6 |
1:08 |
104.7 |
93.4-119.4 |
1:16 |
97.6 |
88.4-112.0 |
血漿稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍(%) |
1:02 |
101.5 |
90.2-113.6 |
1:04 |
100.3 |
90.6-115.4 |
1:08 |
97.5 |
84.4-111.9 |
1:16 |
91.1 |
81.0-107.7 |
細胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍(%) |
1:02 |
93.9 |
87.4-97.4 |
1:04 |
84.1 |
73.9-95.7 |
1:08 |
86.2 |
74.5-107.0 |
1:16 |
82.3 |
72.2-100.1 |
應(yīng)用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。
樣本類型 |
樣本數(shù)目 |
平均值(pg/mL) |
樣本值(pg/mL) |
血清 |
10 |
128 |
40-490 |
EDTA血漿 |
4 |
117 |
35-340 |
肝素血漿 |
3 |
138 |
48-272 |
枸櫞酸鈉血漿 |
4 |
172 |
n.d.-424 |
細胞培養(yǎng)上清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得15.6 pg/mL
本試劑盒識別天然和重組人干擾素誘導(dǎo)蛋白10。下述因子進行了特異性的評估,沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
Recombinant human: |
Recombinant mouse: |
GROα |
IP-10/CRG-2 |
NRG1-β1/HRG1-β1 |
|
Lymphotactin |
|
MIG |
|
TNF-α |
|
TYK-2 |
|
檢測簡圖
疑問解答
問題 |
造成原因 |
解決方法 |
標(biāo)曲不好 |
移液量不準(zhǔn)確 |
檢查移液器,按時校準(zhǔn),仔細操作,充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
稀釋方法不恰當(dāng) |
||
顯色值偏低 |
孵育時間太短 |
給予足夠的孵育時間,樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。 |
移液量不足或稀釋不當(dāng) |
校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作 |
|
CV偏高 |
酶標(biāo)板清洗不當(dāng) |
使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機,檢查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 |
準(zhǔn)備新鮮洗液 |
|
靈敏度較低 |
試劑盒儲存不當(dāng) |
按照產(chǎn)品組分表進行保存。 |