Human IL-21 ELISA Kit 人白介素21 ELISA檢測(cè)試劑盒
批量采購(gòu)， 請(qǐng)點(diǎn)擊詢價(jià)
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
FAQ
COA
已發(fā)表文獻(xiàn)
人白介素21 (Human IL-21)是一種I型細(xì)胞因子，調(diào)節(jié)T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞和髓細(xì)胞的功能。IL-21由活化的濾泡輔助性T細(xì)胞（Tfh）、Th17細(xì)胞和NKT細(xì)胞產(chǎn)生。Tfh衍生的IL-21通過(guò)其對(duì)Tfh細(xì)胞的自分泌作用和對(duì)免疫球蛋白成熟、漿細(xì)胞分化和記憶B細(xì)胞的旁分泌作用，在體液免疫的發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。成熟人IL-21具133個(gè)氨基酸與小鼠和大鼠IL-21分別具有63%和61%序列同一性。IL-21與癌癥免疫治療、病毒感染和過(guò)敏等臨床疾病有很大關(guān)系，也通過(guò)限制過(guò)敏原特異性IgE的產(chǎn)生和肥大細(xì)胞脫顆粒來(lái)抑制皮膚超敏反應(yīng)。
翌圣Human IL-21 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒，用于定量測(cè)定血清、血漿中的人白介素21(Human IL-21)。特異性抗人白介素21抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本，經(jīng)過(guò)孵育，樣本中存在的人白介素21與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測(cè)抗體孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中人白介素21的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng)570 - 630 nm)測(cè)定吸光度值。
產(chǎn)品信息
|
貨號(hào) |
97030ES48 / 97030ES96 |
|
規(guī)格 |
48 T / 96 T |
|
檢測(cè)范圍 |
15.63-1000 pg/mL |
|
檢測(cè)方法 |
雙抗夾心法 |
|
檢測(cè)物種 |
人 |
|
檢測(cè)時(shí)長(zhǎng) |
4.5小時(shí) |
|
靈敏度 |
8.16 pg/mL |
|
稀釋線性 |
81 - 117% |
|
回收率 |
76 - 121% |
|
板內(nèi)差 |
3.3% |
|
板間差 |
5.0% |
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
- 標(biāo)曲數(shù)據(jù)
- 靈敏度檢測(cè)
IL-21的最低檢測(cè)限為8.16 pg/mL，通過(guò)使用重復(fù)檢測(cè)20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算得出。
- 精密度檢測(cè)
酶標(biāo)板內(nèi)精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測(cè)定10次，評(píng)估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。
酶標(biāo)板間精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測(cè)30次，評(píng)估酶標(biāo)板間的精密度。
|
項(xiàng)目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
||||
|
樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
10 |
10 |
10 |
30 |
30 |
30 |
|
|
平均值 |
810.2 |
282.4 |
17.5 |
818.2 |
274.9 |
16.6 |
|
標(biāo)準(zhǔn)差 |
21.1 |
3.7 |
1.1 |
21.7 |
7.2 |
1.6 |
|
變異系數(shù)（%） |
2.6 |
1.3 |
6.1 |
2.7 |
2.6 |
9.8 |
- 回收率檢測(cè)
通過(guò)不同水平的IL-21添加于樣本中來(lái)測(cè)定回收率，其回收率如下:
|
樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍（%） |
|
血清 |
104.0 |
94.5-119.4 |
|
血漿 |
85.5 |
76.8-91.8 |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
105.0 |
82.8-121.8 |
- 稀釋線性檢測(cè)
|
血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
104.7 |
104.2-105.0 |
|
1:04 |
101.3 |
100.1-101.9 |
|
1:08 |
112.5 |
108.0-117.8 |
|
1:16 |
113.6 |
112.3-114.9 |
|
血漿稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
99.3 |
97.1-101.3 |
|
1:04 |
93.9 |
93.0-95.3 |
|
1:08 |
92.3 |
90.6-93.1 |
|
1:16 |
87.0 |
81.3-91.6 |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
109.6 |
108.4-111.8 |
|
1:04 |
107.8 |
107.3-108.1 |
|
1:08 |
105.9 |
100.2-110.5 |
|
1:16 |
96.9 |
93.3-100.0 |
- 樣本值
應(yīng)用本試劑盒，檢測(cè)若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
|
樣本類型 |
樣本數(shù)目 |
平均值（pg/mL） |
樣本值（pg/mL） |
|
血清 |
10 |
3.7 |
n.d.-36.9 |
|
血漿 |
10 |
2.2 |
n.d.-21.7 |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
6 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測(cè)范圍內(nèi)得15.63 pg/mL
- 測(cè)定特異性
本試劑盒識(shí)別天然和重組人白介素21。下述因子進(jìn)行了特異性的評(píng)估，沒(méi)有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
|
Recombinant human: |
Recombinant Mouse: |
Recombinant Rat: |
|
|
IFN-γ |
IL-10 |
IFN-γ |
IFN-γ |
|
IL-1β |
IL-12 |
IL-1β |
IL-1β |
|
IL-2 |
IL-17 |
IL-2 |
IL-2 |
|
IL-4 |
IL-18 |
IL-4 |
IL-4 |
|
IL-5 |
IL-22 |
IL-6 |
IL-6 |
|
IL-6 |
MCP-1 |
IL-10 |
IL-10 |
|
IL-8 |
TNF-a |
TNF-a |
TNF-a |
檢測(cè)簡(jiǎn)圖
疑問(wèn)解答
|
問(wèn)題 |
造成原因 |
解決方法 |
|
標(biāo)曲不好 |
移液量不準(zhǔn)確 |
檢查移液器，按時(shí)校準(zhǔn)，仔細(xì)操作，充分混勻時(shí)蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
|
稀釋方法不恰當(dāng) |
||
|
顯色值偏低 |
孵育時(shí)間太短 |
給予足夠的孵育時(shí)間，樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。 |
|
移液量不足或稀釋不當(dāng) |
校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作 |
|
|
CV偏高 |
酶標(biāo)板清洗不當(dāng) |
使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機(jī)，檢查所有的端口是否堵塞。 |
|
受污染的洗液 |
準(zhǔn)備新鮮洗液 |
|
|
靈敏度較低 |
試劑盒儲(chǔ)存不當(dāng) |
按照產(chǎn)品組分表進(jìn)行保存。 |
