白細胞介素 20(IL-20),屬于IL-10家族。它是一種在結(jié)構(gòu)上與白細胞介素10相關(guān)的細胞因子。人和小鼠的IL-20分子均由176個氨基酸組成,兩者有76%的同源性,由激活的角質(zhì)形成細胞和單核細胞分泌,通過其他內(nèi)皮細胞表面表達的兩個受體傳遞信號到胞內(nèi)。研究表明,IL-20在免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)、造血以及表皮細胞和角質(zhì)形成細胞分化中發(fā)揮關(guān)鍵作用,特別是與皮膚相關(guān)的炎癥,如銀屑病有關(guān)。
翌圣Mouse IL-20 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、血漿中的小鼠白介素20(Mouse IL-20)。特異性抗小鼠白介素20抗體預(yù)包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的小鼠白介素20與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入檢測抗體孵育結(jié)合,經(jīng)洗滌,再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中小鼠白介素20的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產(chǎn)品信息
貨號 |
98014ES48 / 98014ES96 |
規(guī)格 |
48 T / 96 T |
檢測范圍 |
31.25-2000 pg/mL |
檢測方法 |
雙抗夾心法 |
檢測物種 |
小鼠 |
檢測時長 |
4.5小時 |
靈敏度 |
8.22 pg/mL |
稀釋線性 |
91 - 120% |
回收率 |
91 - 115% |
板內(nèi)差 |
3.7% |
板間差 |
6.1% |
實驗數(shù)據(jù)
IL-20的最低檢測限為8.22 pg/mL,通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
酶標板內(nèi)精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內(nèi)重復(fù)測定10次,評估酶標板內(nèi)的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復(fù)檢測30次,評估酶標板間的精密度。
項目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
||||
樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
10 |
10 |
10 |
30 |
30 |
30 |
|
平均值 |
1807.8 |
1075.2 |
149.4 |
1786.5 |
1034.2 |
152.1 |
標準差 |
46.8 |
39.2 |
7.2 |
131.6 |
51.7 |
9.2 |
變異系數(shù)(%) |
2.6 |
3.6 |
4.8 |
7.4 |
5.0 |
6.0 |
通過不同水平的IL-20添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:
樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍(%) |
血清 |
104.9 |
95.6-114.4 |
細胞培養(yǎng)上清 |
103.4 |
91.1-115.0 |
血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍(%) |
1:02 |
106.4 |
100.6-112.4 |
1:04 |
109.4 |
98.6-115.6 |
1:08 |
109.0 |
99.0-120.7 |
1:16 |
107.8 |
102.3-115.1 |
細胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍(%) |
1:02 |
103.4 |
92.9-114.6 |
1:04 |
103.6 |
93.6-118.4 |
1:08 |
105.1 |
91.3-115.8 |
1:16 |
105.2 |
102.4-111.5 |
應(yīng)用本試劑盒,檢測若干正常小鼠的血清和鼠源細胞培養(yǎng)上清,數(shù)據(jù)僅供參考。
樣本類型 |
樣本數(shù)目 |
平均值(pg/mL) |
樣本值(pg/mL) |
血清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
細胞培養(yǎng)上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得31.25 pg/mL
本試劑盒識別天然和重組小鼠白介素20。下述因子進行了特異性的評估,沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
Recombinant human: |
Recombinant Mouse: |
Recombinant Rat: |
||
IL-1α |
IL-10 |
IL-1α |
IL-10 |
IL-1β |
IL-1β |
IL-12 |
IL-1β |
IL-13 |
IL-1ra |
IL-1ra |
IL-13 |
IL-2 |
IL-21 |
IL-2 |
IL-2 |
IL-16 |
IL-4 |
IL-22 |
IL-4 |
IL-4 |
IL-17 |
IL-5 |
IL-27 |
IL-6 |
IL-5 |
IL-22 |
IL-6 |
IL-33 |
IL-10 |
IL-6 |
IL-24 |
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問題 |
造成原因 |
解決方法 |
標曲不好 |
移液量不準確 |
檢查移液器,按時校準,仔細操作,充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
稀釋方法不恰當 |
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顯色值偏低 |
孵育時間太短 |
給予足夠的孵育時間,樣本和溶解的標準品隔夜后更換。 |
移液量不足或稀釋不當 |
校準移液器和規(guī)范操作 |
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CV偏高 |
酶標板清洗不當 |
使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機,檢查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 |
準備新鮮洗液 |
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靈敏度較低 |
試劑盒儲存不當 |
按照產(chǎn)品組分表進行保存。 |