產(chǎn)品說明書
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產(chǎn)品簡介
PCSK9(前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草桿菌蛋白酶kexin 9)，也稱為前蛋白轉(zhuǎn)化酶9或NARC-1(神經(jīng)凋亡調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)化酶1)，是枯草桿菌蛋白酶相關(guān)絲氨酸內(nèi)蛋白酶的蛋白酶K亞家族的成員。小鼠PCSK9 cDNA編碼694個氨基酸，包括一個信號肽、一個前結(jié)構(gòu)域和一個催化結(jié)構(gòu)域。PCSK9在肝、腸和腎中高度表達。
PCSK9的主要生理功能是介導(dǎo)低密度脂蛋白受體(LDLR)的降解。在人類中，遺傳分析表明，在PCSK9基因中具有無義或功能喪失突變的個體具有顯著較低的血漿LDL膽固醇水平，而在小鼠中，施用PCSK9中和抗體或反義寡核苷酸降低血清膽固醇。這些研究清楚地表明，PCSK9在降低肝臟LDLR水平中起著關(guān)鍵作用。矛盾的是，服用降膽固醇藥物如他汀類藥物似乎會增加PCSK9的產(chǎn)生。
產(chǎn)品信息
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貨號 |
98019ES48 / 98019ES96 |
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規(guī)格 |
48 T / 96 T |
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檢測范圍 |
31.25-2000 pg/mL |
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檢測方法 |
雙抗夾心法 |
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檢測物種 |
小鼠 |
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檢測時長 |
4小時50分鐘 |
|
靈敏度 |
1.620 pg/mL |
|
稀釋線性 |
71.3 - 103.2% |
|
回收率 |
72.9 - 129.4% |
|
板內(nèi)差 |
7.2% |
|
板間差 |
7.4% |
實驗數(shù)據(jù)
- 標(biāo)曲數(shù)據(jù)
數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，生成的標(biāo)曲用于實驗數(shù)據(jù)分析。
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
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濃度（pg/mL） |
顯色值 |
平均值 |
校準(zhǔn)值 |
|
|
2000 |
2.971 |
2.754 |
2.862 |
2.817 |
|
1000 |
1.744 |
1.610 |
1.677 |
1.631 |
|
500 |
0.909 |
0.901 |
0.905 |
0.860 |
|
250 |
0.519 |
0.488 |
0.503 |
0.458 |
|
125 |
0.295 |
0.277 |
0.286 |
0.241 |
|
62.5 |
0.188 |
0.165 |
0.176 |
0.131 |
|
31.25 |
0.111 |
0.103 |
0.107 |
0.062 |
|
0 |
0.047 |
0.044 |
0.045 |
/ |
- 靈敏度檢測
Mouse PCSK9的最低檢測限為1.620 pg/mL，通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計算得出。
- 精密度檢測
酶標(biāo)板內(nèi)精密度
3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測定20次，評估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。
酶標(biāo)板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測32次，評估酶標(biāo)板間的精密度。
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項目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
||||
|
樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
20 |
20 |
20 |
32 |
32 |
32 |
|
|
平均值 |
784.0 |
182.4 |
39.9 |
850.1 |
199.6 |
42.8 |
|
標(biāo)準(zhǔn)差 |
49.4 |
13.0 |
3.3 |
57.5 |
17.6 |
2.8 |
|
變異系數(shù)（%） |
6.3 |
7.1 |
8.1 |
6.8 |
8.8 |
6.5 |
- 回收率檢測
通過不同水平的Mouse PCSK9添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:
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樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍（%） |
|
血清 |
96.2 |
72.9-114.6 |
|
血jiang |
101.8 |
81.8-119.4 |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
107.2 |
86.5-129.4 |
- 稀釋線性檢測
|
血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
98.0 |
95.6-104.0 |
|
1:04 |
93.8 |
89.1-96.1 |
|
1:08 |
87.7 |
84.7-92.3 |
|
1:16 |
78.7 |
71.3-88.1 |
|
血漿稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
96.5 |
90.3-103.2 |
|
1:04 |
91.3 |
78.1-100.6 |
|
1:08 |
89.7 |
80.3-102.3 |
|
1:16 |
75.9 |
75.0-76.4 |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
93.2 |
88.5-98.3 |
|
1:04 |
91.4 |
88.9-95.3 |
|
1:08 |
84.8 |
81.5-88.3 |
|
1:16 |
80.2 |
77.9-83.3 |
- 樣本值
應(yīng)用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
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樣本類型 |
樣本數(shù)目 |
平均值（ng/mL） |
樣本值（ng/mL） |
|
血清 |
13 |
217 |
112-312 |
|
血漿 |
11 |
583 |
412-748 |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得31.25 pg/mL
- 測定特異性
本試劑盒識別天然和重組小鼠PCSK9。下述因子進行了特異性的評估，沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
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Recombinant human: |
Recombinant Mouse: |
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PCSK1 |
Furin |
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PCSK7 |
LDL R |
|
PCSK9 |
VLDL R |
檢測簡圖
疑問解答
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問題 |
造成原因 |
解決方法 |
|
標(biāo)曲不好 |
移液量不準(zhǔn)確 |
檢查移液器，按時校準(zhǔn)，仔細(xì)操作，充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
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稀釋方法不恰當(dāng) |
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顯色值偏低 |
孵育時間太短 |
給予足夠的孵育時間，樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。 |
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移液量不足或稀釋不當(dāng) |
校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作 |
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CV偏高 |
酶標(biāo)板清洗不當(dāng) |
使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機，檢查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
準(zhǔn)備新鮮洗液 |
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靈敏度較低 |
試劑盒儲存不當(dāng) |
按照產(chǎn)品組分表進行保存。 |
