Human IL-2 ELISA Kit 人白介素2 ELISA檢測(cè)試劑盒
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已發(fā)表文獻(xiàn)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
人白介素2 (Human IL-2)也被稱(chēng)為T細(xì)胞生長(zhǎng)因子，是一種15-18kDa的可變糖基化α螺旋多肽，由第4號(hào)染色體上的一個(gè)基因編碼。可由CD4+和CD8+T細(xì)胞、γδT細(xì)胞、B細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞表達(dá)。IL-2/IL-2R信號(hào)傳導(dǎo)是T細(xì)胞增殖和其他免疫反應(yīng)基本功能所必需的。成熟的人IL-2與小鼠和大鼠IL-2分別具有56%和66%的氨基酸序列同一性。人和小鼠IL-2表現(xiàn)出跨物種活性。IL-2能誘導(dǎo)和增強(qiáng)細(xì)胞毒活性，可應(yīng)用治療某些疾病、特別是對(duì)腫瘤治療；還有病毒感染、免疫缺陷病及自身免疫病等治療。
翌圣Human IL-2 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒，用于定量測(cè)定血清、血漿中的人白介素2(Human IL-2)。特異性抗人白介素2抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本，經(jīng)過(guò)孵育，樣本中存在的人白介素2與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測(cè)抗體孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中人白介素2的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng)570 - 630 nm)測(cè)定吸光度值。
產(chǎn)品信息
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貨號(hào) |
97029ES48 / 97029ES96 |
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規(guī)格 |
48 T / 96 T |
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檢測(cè)范圍 |
15.63-1000 pg/mL |
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檢測(cè)方法 |
雙抗夾心法 |
|
檢測(cè)物種 |
人 |
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檢測(cè)時(shí)長(zhǎng) |
4.5小時(shí) |
|
靈敏度 |
3.06 pg/mL |
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稀釋線性 |
78 - 116% |
|
回收率 |
77 - 89% |
|
板內(nèi)差 |
6.3% |
|
板間差 |
8.7% |
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
標(biāo)曲數(shù)據(jù)
數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，生成的標(biāo)曲用于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析。
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
|
濃度（pg/mL） |
顯色值 |
平均值 |
校準(zhǔn)值 |
|
|
1000 |
2.454 |
2.419 |
2.436 |
2.440 |
|
500 |
1.547 |
1.475 |
1.511 |
1.492 |
|
250 |
0.790 |
0.817 |
0.803 |
0.835 |
|
125 |
0.453 |
0.465 |
0.459 |
0.455 |
|
62.5 |
0.289 |
0.268 |
0.279 |
0.258 |
|
31.25 |
0.165 |
0.165 |
0.165 |
0.162 |
|
15.63 |
0.112 |
0.120 |
0.116 |
0.116 |
|
0 |
0.062 |
0.063 |
0.063 |
/ |
- 靈敏度檢測(cè)
IL-2的最低檢測(cè)限為3.06 pg/mL，通過(guò)使用重復(fù)檢測(cè)20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算得出。
- 精密度檢測(cè)
酶標(biāo)板內(nèi)精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測(cè)定8次，評(píng)估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。
酶標(biāo)板間精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測(cè)24次，評(píng)估酶標(biāo)板間的精密度。
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項(xiàng)目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
||||
|
樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
8 |
8 |
8 |
24 |
24 |
24 |
|
|
平均值 |
400.2 |
83.6 |
18.7 |
399.0 |
83.3 |
19.2 |
|
標(biāo)準(zhǔn)差 |
24.6 |
4.8 |
1.3 |
37.3 |
5.2 |
2.0 |
|
變異系數(shù)（%） |
6.1 |
5.7 |
7.1 |
9.3 |
6.3 |
10.5 |
- 回收率檢測(cè)
通過(guò)不同水平的IL-2添加于樣本中來(lái)測(cè)定回收率，其回收率如下:
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樣本類(lèi)型 |
平均回收率(%) |
范圍（%） |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
81.5 |
76.8-89.3 |
- 稀釋線性檢測(cè)
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
102.9 |
90.4-107.8 |
|
1:04 |
94.5 |
79.2-107.8 |
|
1:08 |
95.2 |
85.7-116.0 |
|
1:16 |
88.4 |
77.6-104.0 |
5.測(cè)定特異性
本試劑盒識(shí)別天然和重組人白介素2。下述因子進(jìn)行了特異性的評(píng)估，沒(méi)有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
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Recombinant human: |
Recombinant Mouse: |
|
|
GM-CSF |
IL-10 |
GM-CSF |
|
IL-1β |
IL-12 |
IL-1β |
|
IL-3 |
IL-17 |
IL-3 |
|
IL-4 |
IL-18 |
IL-4 |
|
IL-5 |
IL-21 |
IL-6 |
|
IL-6 |
TGF-β1 |
IL-10 |
|
IL-8 |
TNF-a |
TNF-a |
檢測(cè)簡(jiǎn)圖
疑問(wèn)解答
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問(wèn)題 |
造成原因 |
解決方法 |
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標(biāo)曲不好 |
移液量不準(zhǔn)確 |
檢查移液器，按時(shí)校準(zhǔn)，仔細(xì)操作，充分混勻時(shí)蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
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稀釋方法不恰當(dāng) |
||
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顯色值偏低 |
孵育時(shí)間太短 |
給予足夠的孵育時(shí)間，樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。 |
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移液量不足或稀釋不當(dāng) |
校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作 |
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CV偏高 |
酶標(biāo)板清洗不當(dāng) |
使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機(jī)，檢查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
準(zhǔn)備新鮮洗液 |
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靈敏度較低 |
試劑盒儲(chǔ)存不當(dāng) |
按照產(chǎn)品組分表進(jìn)行保存。 |
