白細(xì)胞介素6（IL-6）最初被鑒定為B細(xì)胞分化因子，現(xiàn)在已知是一種多功能細(xì)胞因子，可調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)、造血、急性期反應(yīng)和炎癥，其有3個(gè)受體結(jié)合位點(diǎn)，包括1個(gè)特異性受體IL-6R 結(jié)合位點(diǎn)，和2個(gè)gp130結(jié)合位點(diǎn)。IL-6是一種多效性、α螺旋、22-28kDa的糖蛋白，在急性期反應(yīng)、炎癥、造血、骨代謝和癌癥進(jìn)展中發(fā)揮重要作用，人IL-6與小鼠和大鼠IL-6具有39%的aa序列同一性。它是一種多效性細(xì)胞因子，不僅影響免疫系統(tǒng)，還作用于其他生物系統(tǒng)和各種器官的許多生理事件，同時(shí)也能誘導(dǎo)骨髓瘤和漿細(xì)胞瘤的生長(zhǎng)。

翌圣Human IL-6 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒，用于定量測(cè)定血清、血漿中的人白介素6(Human IL-6)。特異性抗人白介素6抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本，經(jīng)過孵育，樣本中存在的人白介素6與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測(cè)抗體孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中人白介素6的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng)570 - 630 nm)測(cè)定吸光度值。

 

產(chǎn)品信息

貨號(hào)	97068ES48 / 97068ES96
規(guī)格	48 T / 96 T
檢測(cè)范圍	7.81-500 pg/mL
檢測(cè)方法	雙抗夾心法
檢測(cè)物種	人
檢測(cè)時(shí)長(zhǎng)	4.5小時(shí)
靈敏度	2.53 pg/mL
稀釋線性	75 - 116%
回收率	75 - 108%
板內(nèi)差	6.1%
板間差	7.6%

 

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

濃度（pg/mL）	顯色值		平均值	校準(zhǔn)值
500	2.943	2.928	2.935	2.938
250	2.024	1.973	1.999	1.985
125	1.201	1.206	1.203	1.228
62.5	0.743	0.724	0.733	0.717
31.25	0.412	0.405	0.409	0.410
15.63	0.247	0.239	0.243	0.238
7.81	0.140	0.135	0.138	0.145
0	0.037	0.032	0.035	/

1. 標(biāo)曲數(shù)據(jù)

2. 靈敏度檢測(cè)

IL-6的最低檢測(cè)限為2.53 pg/mL，通過使用重復(fù)檢測(cè)20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算得出。

3. 精密度檢測(cè)

酶標(biāo)板內(nèi)精密度

3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測(cè)定10次，評(píng)估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。

酶標(biāo)板間精密度

3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測(cè)30次，評(píng)估酶標(biāo)板間的精密度。

項(xiàng)目	板內(nèi)精密度			板間精密度
樣本	1	2	3	1	2	3
	10	10	10	30	30	30
平均值	199.7	46.3	14.7	203.9	46.7	14.5
標(biāo)準(zhǔn)差	15.0	1.6	1.1	17.7	2.3	1.3
變異系數(shù)（%）	7.5%	3.4%	7.3%	8.7%	4.9%	9.2%

4. 回收率檢測(cè)

 通過不同水平的IL-6添加于樣本中來測(cè)定回收率，其回收率如下:

樣本類型	平均回收率(%)	范圍（%）
細(xì)胞培養(yǎng)上清	94.5	83.2-108.8
血清	84.4	75.4-94.4
血漿	91.4	83.6-100

5. 稀釋線性檢測(cè)

細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	95.9	92.4-101.5
1:04	92.6	89.2-97.8
1:08	96.1	91.8-104.6
1:16	85.4	79-88.5

 

血清稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	93.1	85.5-99.6
1:04	99.7	86.3-107.1
1:08	98.5	93.1-104.2
1:16	88.7	80-98.6

 

血漿稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	97.0	87.7-116.4
1:04	104.0	95.5-116.8
1:08	102.9	97.5-110.6
1:16	87.1	75.3-93.7

6. 樣本值

應(yīng)用本試劑盒，檢測(cè)若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。

樣本類型	樣本數(shù)目	平均值（pg/mL）	樣本值（pg/mL）
細(xì)胞培養(yǎng)上清	8	n.d.	n.d.
血清	12	25.8	n.d.-263.4
血漿	8	22.2	n.d.-177.58

n.d. 指樣本濃度值低于檢測(cè)范圍內(nèi)得7.8 pg/mL

7. 測(cè)定特異性

本試劑盒識(shí)別天然和重組人白介素6。下述因子進(jìn)行了特異性的評(píng)估，沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。

Recombinant human:		Recombinant Mouse:
IL-1α	IL-6R	IL-1β
IL-1β	gp 130	IL-2
IL-2	LIF	IL-4
IL-4	OSM	IL-6
IL-5	CNTF	IL-10
IL-8		IL-12
IL-10
IL-11
IL-12