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      LysoSensor? Green DND-189 溶酶體綠色熒光探針

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      產品說明書

      FAQ

      COA

      已發(fā)表文獻

      產品描述

             LysoSensor®系列探針是主要對活細胞中的酸性區(qū)室(如溶酶體、頂體精子)動態(tài)合成和功能進行研究的一類熒光探針,該類探針的染色具有向酸性,可通過質子化作用在酸性細胞器內累積。該類探針的這種質子化作用還可解除染料的熒光淬滅性,使其所發(fā)射的熒光強度更強。因此,與LysoTracker系列探針相比,LysoSensor®系列探針隨著細胞器的酸化程度其熒光強度呈pH依賴型(向酸)增強。

      本品LysoSensor™ Green DND-189具有較低的pKa值,僅在酸性區(qū)室內才具有熒光。本品以溶于無水DMSO的1 mM儲存液形式提供。

      如對活細胞中的酸性區(qū)室進行選擇性標記和染色,可選擇LysoTracker®系列探針。


      產品性質

      分子式(Molecular Formula)

      C24H22N4O2

      分子量(Molecular Weight)

      398.46

      Ex/Em

      443⁄505

      pKa

      ~5.2

      顏色(Color)

      綠色

      結構式(Structure)

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      運輸和保存方法

      冰袋運輸。-20℃避光干燥保存,避免反復凍融,有效期6個月。


      注意事項

      1)不能儲存在無霜冰箱,建議按照單次用量分裝于-20℃凍存。

      2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

      3)本產品僅作科研用途!


      使用方法

      使用前,先將本品取出回溫至室溫,并對其進行簡短離心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作濃度需根據不同的實驗要求、細胞類型、細胞或組織的膜通透性等進行優(yōu)化。

      1. 工作液的配制

      利用培養(yǎng)基或合適的緩沖液將1 mM 儲存液稀釋至工作濃度,推薦工作液濃度至少為1 µM;

      注1:為了降低探針加載過度可能引起的假陽性,建議在不影響染色效果的情況下盡量使用低濃度。2)若細胞在染色后于不含染料的培養(yǎng)基中孵育,會觀察到熒光信號的衰減和細胞的空泡化現象。

      注2:工作液現配現用。

      2. 染色

      2.1 對于貼壁細胞

      1)將細胞置于培養(yǎng)皿中的蓋玻片上,加入合適培養(yǎng)基,使其爬片生長。

      2)待細胞生長到合適豐度,吸除培養(yǎng)液,加入適量37℃預熱的含探針工作液。于生長狀態(tài)下孵育30 min~2 h(具體孵育時間需根據細胞類型而定)。

      3)利用新鮮培養(yǎng)基替換上述染色液并在熒光顯微鏡(含合適濾片)下觀察。若染色不夠充分,建議增加染料濃度或延長染色時間。

      2.2 對于懸浮細胞

      1)離心,吸除上清。

      2)利用37℃預熱的探針工作液重懸細胞,于生長狀態(tài)下孵育30 min~2 h(具體時間需根據細胞類型而定)。

      3)離心,吸除染色液,加入新鮮培養(yǎng)液重懸細胞。

      4)置于熒光鏡下觀察。若染色不夠充分,建議增加染料濃度或加長染色時間。

      注:對于懸浮細胞,也可將細胞貼附于經BD Cell-Tak處理過的蓋玻片上,然后使用類似于貼壁細胞的方法進行染色。

       

      HB210528

      400-6111-883