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細(xì)胞裂解后的蛋白粗提物中含有大量的內(nèi)源性蛋白酶,這些酶可以降解細(xì)胞提取物中的蛋白。因此為了防止蛋白純化過程中目的蛋白不受蛋白酶的破壞,需要加入蛋白酶抑制劑對其進(jìn)行活性抑制。
該蛋白酶抑制劑 Cocktail 包含對半胱氨酸蛋白酶、絲氨酸蛋白酶、酸性蛋白酶、氨基肽酶具有廣泛特異性的Aprotinin、Bestatin、E-64、Leupeptin 等組分。本產(chǎn)品不含 AEBSF,可避免由于 AEBSF 導(dǎo)致的質(zhì)譜峰漂移而干擾質(zhì)譜(Mass Spectrometry, MS)分析,因此使用本產(chǎn)品提取的蛋白樣品可兼容質(zhì)譜檢測。
該產(chǎn)品作為 DMSO 即用溶液提供,并單獨(dú)額外提供 EDTA(一種金屬蛋白酶抑制劑),以便選擇性使用。 如用于檢測活性中心為金屬離子依賴的蛋白,則不宜添加EDTA。
組分信息
編號 |
組分名稱 |
20138ES05(2mL) |
20138-A |
InStab™ Protease Inhibitor Cocktail for MS-SAFE, 50×Stock Solution |
1 mL |
20138-B |
EDTA, 50×Stock Solution |
1 mL |
儲(chǔ)存條件
-25~-15℃保存,有效期1年。
使用說明(僅供參考)
1. 在室溫下解凍,然后在實(shí)驗(yàn)前以1:50 (v/v)將Protease Inhibitor Cocktail加入至溶液樣品(如細(xì)胞裂解液或組織提取物)。
2. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,可將額外包裝的EDTA(濃度0.05 M)也按照1:50 (v/v)的比例加入到裂解液中。
注意事項(xiàng)
1.本品具有廣譜的蛋白酶抑制活性,但是不具有磷酸酶抑制劑活性。若進(jìn)行磷酸化蛋白的研究,可搭配使用我司的磷酸酶抑制劑混合物(100×)(Cat#20109ES)。
2.收到本品后可適當(dāng)分裝后于-25~-15℃保存,避免反復(fù)凍融,臨使用時(shí)再取出添加到裂解液中。
3.蛋白酶抑制劑Cocktail和裂解液混合后盡快進(jìn)行下步實(shí)驗(yàn),不宜配制后凍存待后續(xù)使用。
4.本產(chǎn)品僅作科研用途。
5.為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20230821
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