白細胞介素 10 （IL-10），也稱為細胞因子合成抑制因子（CSIF），能夠抑制Th1細胞的激活和相關(guān)細胞因子（如IL-1β和 TNF-α）的產(chǎn)生。IL-10是一種178個氨基酸的分子，含有兩個鏈內(nèi)二硫鍵橋，并以36kDa的非共價相關(guān)同源二聚體的形式表達。人與牛、犬、馬、貓、小鼠、綿羊、豬和大鼠IL-10具有72%至86%的氨基酸序列同一性。IL-10可以靶向各種白細胞，減弱過度的免疫反應(yīng)。它影響單核細胞/巨噬細胞的三個重要功能：抗原呈遞、免疫介質(zhì)的釋放和吞噬作用，這也代表它抑制了單核細胞/巨噬細胞的所有功能。與IL-4、IL-5類似，IL-10也參與了自身免疫病的發(fā)展。如炎癥性腸病（IBD）中可以觀察到IL-10 的存在；在慢性肝部炎癥中，IL-10起到了保護作用。

翌圣Mouse IL-10 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿中的小鼠白介素10(Mouse IL-10)。特異性抗小鼠白介素10抗體預(yù)包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本，經(jīng)過孵育，樣本中存在的小鼠白介素10與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測抗體孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中小鼠白介素10的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。

 

產(chǎn)品信息

貨號	98025ES48 / 98025ES96
規(guī)格	48 T / 96 T
檢測范圍	62.5-4000 pg/mL
檢測方法	雙抗夾心法
檢測物種	小鼠
檢測時長	4.5小時
靈敏度	27.53 pg/mL
稀釋線性	78 - 106%
回收率	78 - 118%
板內(nèi)差	3.9%
板間差	4.8%

 

實驗數(shù)據(jù)

1. 標曲數(shù)據(jù)

數(shù)據(jù)擬合繪制標準曲線，生成的標曲用于實驗數(shù)據(jù)分析。

2. 靈敏度檢測

IL-10的最低檢測限為27.53 pg/mL，通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。

3. 精密度檢測

酶標板內(nèi)精密度

3個已知濃度的樣本酶標板內(nèi)重復(fù)測定8次，評估酶標板內(nèi)的精密度。

酶標板間精密度

3個已知濃度的樣本酶標板間重復(fù)檢測24次，評估酶標板間的精密度。

項目	板內(nèi)精密度			板間精密度
樣本	1	2	3	1	2	3
	8	8	8	24	24	24
平均值	1865.20	446.00	120.01	1898.69	454.42	119.04
標準差	64.23	18.27	5.01	98.59	21.39	5.32
變異系數(shù)（%）	3.4	4.1	4.2	5.2	4.7	4.5

4. 回收率檢測

 通過不同水平的IL-10添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:

樣本類型	平均回收率(%)	范圍（%）
血清	85.6	77.5-95.8
細胞培養(yǎng)上清	110.7	106.0-117.9

5. 稀釋線性檢測

血清稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	83.2	79.6-88.1
1:04	94.1	90.6-97.3
1:08	99.1	89.5-104.9
1:16	91.8	88.7-95.7

 

細胞培養(yǎng)上清稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	85.5	77.7-97.0
1:04	90.6	83.4-95.5
1:08	99.4	95.5-102.5
1:16	96.2	89.8-105.8

6. 樣本值

應(yīng)用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。

樣本類型	樣本數(shù)目	平均值（pg/mL）	樣本值（pg/mL）
血清	4	n.d.	n.d.
血漿	4	n.d.	n.d.
細胞培養(yǎng)上清	4	n.d.	n.d.

n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得62.5 pg/mL

7. 測定特異性

本試劑盒識別天然和重組小鼠白介素10。下述因子進行了特異性的評估，沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。

Recombinant human:		Recombinant Mouse:	Recombinant Rat:
IL- 1β	IL-12	IL-1β	IL-1β
IL-2	IL-17A	IL-2	IL-2
IL-4	IL-21	IL-4	IL-4
IL-5	IL-22	IL-6	IL-6
IL-6	IL-23	IL- 17A	IL- 17A
IL-8	TNF-α	TNF-α	TNF-α
IL-10