產(chǎn)品說明書
FAQ
COA
已發(fā)表文獻
白細胞介素-4（IL-4），也稱為B細胞刺激因子-1，是一種多效性細胞因子，誘導(dǎo)初始輔助性T細胞向Th2細胞分化，由肥大細胞、活化的T細胞和骨髓基質(zhì)細胞產(chǎn)生。成熟的人IL-4與牛、小鼠和大鼠IL-4分別具有55%、39%和43%的氨基酸序列同一性。它是一種由T細胞產(chǎn)生的強效細胞因子，在較小程度上由腫瘤相關(guān)的自然殺傷細胞、嗜堿性粒細胞和肥大細胞產(chǎn)生。IL-4是分泌Th3的轉(zhuǎn)化生長因子β的分化因子。IL-4通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子Stat6和一種名為4PS的170K蛋白的酪氨酸磷酸化激活兩種不同的信號通路。
翌圣Rat IL-4 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿中的大鼠白介素4(Rat IL-4)。特異性抗大鼠白介素4抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本，經(jīng)過孵育，樣本中存在的大鼠白介素4與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測抗體孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中大鼠白介素4的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產(chǎn)品信息
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貨號 |
98503ES48 / 98503ES96 |
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規(guī)格 |
48 T / 96 T |
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檢測范圍 |
15.63-1000 pg/mL |
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檢測方法 |
雙抗夾心法 |
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檢測物種 |
大鼠 |
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檢測時長 |
4.5小時 |
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靈敏度 |
11.6 pg/mL |
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稀釋線性 |
85 - 117% |
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回收率 |
76 - 123% |
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板內(nèi)差 |
2.0% |
|
板間差 |
3.0% |
實驗數(shù)據(jù)
- 標(biāo)曲數(shù)據(jù)
數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，生成的標(biāo)曲用于實驗數(shù)據(jù)分析。
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
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濃度（pg/mL） |
顯色值 |
平均值 |
校準(zhǔn)值 |
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|
1000 |
2.821 |
2.716 |
2.768 |
2.777 |
|
500 |
2.148 |
2.029 |
2.088 |
2.056 |
|
250 |
1.322 |
1.245 |
1.283 |
1.326 |
|
125 |
0.802 |
0.775 |
0.788 |
0.767 |
|
62.5 |
0.432 |
0.414 |
0.423 |
0.423 |
|
31.25 |
0.252 |
0.243 |
0.247 |
0.238 |
|
15.625 |
0.145 |
0.142 |
0.144 |
0.147 |
|
0 |
0.060 |
0.058 |
0.059 |
/ |
- 靈敏度檢測
IL-4的最低檢測限為11.6 pg/mL，通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計算得出。
- 精密度檢測
酶標(biāo)板內(nèi)精密度
3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測定6次，評估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。
酶標(biāo)板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測22次，評估酶標(biāo)板間的精密度。
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項目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
||||
|
樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
6 |
6 |
6 |
22 |
22 |
22 |
|
|
平均值 |
468.10 |
122.28 |
32.29 |
468.08 |
123.19 |
32.10 |
|
標(biāo)準(zhǔn)差 |
12.47 |
2.48 |
0.43 |
15.75 |
2.68 |
1.07 |
|
變異系數(shù)（%） |
2.7 |
2.0 |
1.3 |
3.4 |
2.2 |
3.3 |
- 回收率檢測
通過不同水平的IL-4添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:
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樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍（%） |
|
血清 |
82.4 |
75.7-89.5 |
|
血漿 |
118.4 |
112.0-123.2 |
|
細胞培養(yǎng)上清 |
89.2 |
82.4-93.6 |
- 稀釋線性檢測
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血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
99.0 |
94.8-105.1 |
|
1:04 |
96.8 |
95.3-99.6 |
|
1:08 |
104.7 |
103.3-105.8 |
|
1:16 |
110.0 |
105.7-116.7 |
|
血漿稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
98.7 |
95.1-104.8 |
|
1:04 |
100.1 |
94.5-107.5 |
|
1:08 |
103.6 |
97.5-106.9 |
|
1:16 |
92.4 |
85.2-104.5 |
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細胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
100.0 |
97.4-101.9 |
|
1:04 |
101.3 |
96.8-104.4 |
|
1:08 |
107.2 |
100.9-112.9 |
|
1:16 |
104.7 |
94.8-112.7 |
- 樣本值
應(yīng)用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
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樣本類型 |
樣本數(shù)目 |
平均值（pg/mL） |
樣本值（pg/mL） |
|
血清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
|
血漿 |
8 |
n.d. |
n.d. |
|
細胞培養(yǎng)上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得15.63 pg/mL
- 測定特異性
本試劑盒識別天然和重組大鼠白介素4。下述因子進行了特異性的評估，沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
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Recombinant Rat: |
Recombinant Human: |
Recombinant Mouse: |
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IL-1α |
IL-10 |
IL-4 |
IL-4 |
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IL-1β |
IL-18 |
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IL-2 |
IFN-γ |
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IL-6 |
TNF-α |
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檢測簡圖
疑問解答
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問題 |
造成原因 |
解決方法 |
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標(biāo)曲不好 |
移液量不準(zhǔn)確 |
檢查移液器，按時校準(zhǔn)，仔細操作，充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
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稀釋方法不恰當(dāng) |
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顯色值偏低 |
孵育時間太短 |
給予足夠的孵育時間，樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。 |
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移液量不足或稀釋不當(dāng) |
校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作 |
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CV偏高 |
酶標(biāo)板清洗不當(dāng) |
使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機，檢查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
準(zhǔn)備新鮮洗液 |
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靈敏度較低 |
試劑盒儲存不當(dāng) |
按照產(chǎn)品組分表進行保存。 |
Ver.CN20231106
