Topoisomerase I是一種來源于牛痘病毒,通過基因重組而獲得的Ⅰ型拓?fù)洚悩?gòu)酶。它既能解旋DNA的超螺旋結(jié)構(gòu),也可以識(shí)別并切割雙鏈DNA末端[5’C(T)CCTT],并且與DNA共價(jià)連接形成穩(wěn)定復(fù)合物,該復(fù)合物能與DNA的5’-OH重新連接形成完整DNA鏈。Topoisomerase I酶可適用于TOPO克隆載體的制備、NGS建庫中的接頭連接等。
組分信息
組分編號(hào) |
組分名稱 |
14971ES60 |
14971ES76 |
14971-A |
Topoisomerase I (20 U/µL) |
5 µL |
25 µL |
14971-B |
TOPO Buffer (10×) |
1 mL |
1 mL |
14971-C |
2 M NaCl |
1 mL |
1 mL |
儲(chǔ)存條件
-25~-15℃保存,有效期3年。
使用方法
1. DNA快速酶切流程
1) 按如下建議的加樣順序配制體系反應(yīng)液(冰上操作)
組分 |
體積(μL) |
超螺旋質(zhì)粒 |
20 μg |
TOPO Buffer (10×) |
2 µL |
Topoisomerase I (20 U/µL) |
1 µL |
超純水 |
to 20 µL |
2) 輕柔混勻(切勿渦旋)。
3) 37℃孵育15 min。
注意事項(xiàng)
Ver.CN20231108