Hieff Trans?Calcium Phosphate Cell Transfection Kit 磷酸鈣法細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑
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產(chǎn)品說明書
FAQ
COA
已發(fā)表文獻(xiàn)
產(chǎn)品簡介
磷酸鈣法轉(zhuǎn)染DNA 是基于形成磷酸鈣 DNA 沉淀的原理：磷酸鈣可促使細(xì)胞膜和 DNA 的結(jié)合，之后通過細(xì)胞內(nèi)吞的作用將外源 DNA 轉(zhuǎn)入目的細(xì)胞。該方法曾被用于多種細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染。 翌圣生物的磷酸鈣法細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑是在傳統(tǒng)磷酸鈣法的基礎(chǔ)上經(jīng)過特別優(yōu)化，不僅在轉(zhuǎn)染效率有了較大提高，且降低了細(xì)胞毒性，特別適合于 HEK293 或 293T 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，對(duì)其他大多數(shù)常見細(xì)胞如 Hela 、 CHO 也具有較好的轉(zhuǎn)染效果，不僅適用于細(xì)胞的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染，且適用于穩(wěn)轉(zhuǎn)株的篩選。
本品為無菌包裝，可直接使用。
組分信息
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組分編號(hào) |
組分名稱 |
40803ES70 |
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40803-A |
CaCl2 溶液 |
2×1.4 mL |
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40803-B |
HBS溶液 |
2×20 mL |
儲(chǔ)存條件
2-8℃保存，有效期2年。
使用說明
- 按照60％左右的密度種植細(xì)胞入培養(yǎng)皿（瓶），細(xì)胞貼壁生長12-24小時(shí)后即可準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染；
- 準(zhǔn)備1.5 mL離心管，按照下表指示，依次加入DNA、HBS和CaCl2；
- 振蕩混勻后室溫靜置15分鐘；
- 吹打3－5 次后均勻加到待轉(zhuǎn)染細(xì)胞的培養(yǎng)液中，輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿（瓶）；
- 放置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)；
- 轉(zhuǎn)染6小時(shí)后換液；
- 24-48小時(shí)檢測(cè)目的蛋白質(zhì)的表達(dá)。
不同培養(yǎng)容器試劑使用量（僅供參考）
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細(xì)胞培養(yǎng)試劑 |
6孔板 |
T-25培養(yǎng)瓶 |
10 cm平皿 |
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培養(yǎng)基（mL） |
2 |
5 |
10 |
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DNA（μg） |
2 |
4 |
7.5 |
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HBS（mL） |
0.2 |
0.5 |
1 |
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CaCl2（μL） |
14 |
35 |
70 |
注：如果您使用的細(xì)胞培養(yǎng)體系不在上表，請(qǐng)根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)面積進(jìn)行換算; * 為獲得最佳轉(zhuǎn)染效果，調(diào)節(jié)質(zhì)粒DNA濃度為1mg/mL；如果轉(zhuǎn)染體系超過一種質(zhì)粒，表格中為所有DNA總量。加入DNA最大體積不超過HBS使用量的1/10。
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅作科研用途。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20240813
